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renzhuan铁蛋白(TF)试剂盒

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大发888真renapp名称: renzhuan铁蛋白(TF)试剂盒
大发888真renappxing号: TF
大发888真renapp展商: ELISA试剂盒
大发888真renappwendang: 无相guanwendang

jian单介绍

manbetx平台


renzhuan铁蛋白(TF)试剂盒  的详细介绍


renzhuan铁蛋白(TF)试剂盒

使用shuo明书

renzhuan铁蛋白(TF)试剂盒基本原li:

本试剂盒采用双大发888真ren平台夹心ELISA法。用抗renTF大发888真ren平台包被yu酶biaoban上,实yan时样pin或biao准pinzhong的renTF与包被大发888真ren平台结he,游离的成分被洗去。襩ai渭尤肷鷚u素化的抗renTF大发888真ren平台和辣gen过氧化wu酶biao记的亲和素。抗renTF大发888真ren平台与结簒ian诎淮蠓?88真ren平台上的renTF结he、生wu素与亲和素特异性结heerxing成**复hewu,游离的成分被洗去。加入xianse底wu(TMB),TMB在辣gen过氧化wu酶的催化下呈现lanse,加终止液后bian成黄se。用酶biao仪在450nmbochang处测OD值,renTF浓度与OD450值之间呈zheng比,通过绘制biao准曲线计算出样pinzhongrenTF的浓度

renzhuan铁蛋白(TF)试剂盒描述:

英wen名称 Human TF (Transferrin) ELISA Kit
zhongwen名称 renzhuan铁蛋白(TF)酶联**xi附测定试剂盒
货号 X-EL-H0171c zhong属 Human/ren
gui格 96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips)
jian测方法 双大发888真ren平台夹心法
jian测fan围 1.563~100ng/mL 灵min度 0.938ng/mL

试剂盒组成:

zhongwen名称

英wen名称

gui格

保存

  ELISA酶biaoban(可拆卸)

  Micro ELISA  Plate(Dismountable)

  8×12 / 8×6*

4/-20 #

冻干biao准pin

Reference Standard

  2/1 *

4/-20 #

biao准pin&样pinxishi液

Reference Standard & Sample Diluent

  1 20mL/12mL*

4

浓缩生wu素化大发888真ren平台

Concentrated Biotinylated Detection Ab

  1 120μL/70μL*

4/-20 #

生wu素化大发888真ren平台xishi液

Biotinytated Detection Ab Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓缩HRP酶结hewu

Concentrated HRP Conjugate

  1 120μL/70μL*

4(避光)

酶结hewuxishi液

HRP Conjugate Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓缩洗涤液(25×

ConcentratedWashBuffer (25×)

  1 30mL/16mL*

4

底wurong液(TMB

Substrate Reagent

  1 10mL/6mL*

4(避光)

fanying终止液

Stop Solution

  1 10mL/6mL*

4

封ban覆mo

Plate Sealer

  5/3 *

 

大发888真renappshuo明书

Product  Description

  1 

 

质jian报告

Certificate of Analysis

  1 

 

特别shuo明
*: [96T/48T](打kai包装后请ji时jian查所youwupin是否齐全完zheng)
#: 一周内使用可存yu4℃,xuchang时间存放或duo次使用建议存yu-20.                                      

renzhuan铁蛋白(TF)试剂盒jian测前准备工作:

1. 请提前20穤hong哟颖鋤hong取出试剂盒,平衡至室温。

2. 将浓缩洗涤液用双zheng水xishi(1:25)。wei用完的放回4℃。从冰箱zhong取出的浓缩洗涤液可能you结晶,属yuzheng常现象,可用40℃水浴微加re使结晶完全rong解后再配制洗涤液(加re温度不要超过50℃,使用时洗涤液yingwei室温)。当日使用。

3. biao准pinyu10000×g离心1穤hong樱尤隻iao准pin&样pinxishi液1.0mL至冻干biao准pinzhong,旋紧管盖,静置10穤hong樱舷碌遜ao数次,待其充分rong解后,用移液器将其轻轻混匀(浓度wei8000pg/mL)。ran后gen据xu要进行bei比xishi(zhu:不要直接在fanyingkongzhong进行bei比xishi)。建议配制成以下浓度:按zhaoxishi方法tuli biao准pin&样pinxishi液直接作wei空白kong0ng/mL。如配制5ng/mLbiao准pin:取0.5mL10ng/mL的上述biao准pin加入含you0.5mLbiao准pin&样pinxishi液的EP管zhong,混匀即可,其yu浓度襩ai薼ei推。 

4. 生wu素化大发888真ren平台工作液:实yan前计算当次实yan所xu用liang(以100μL/kong计),实际配制时yingduo配制100-200μL。使用前15穤hong樱陨鷚u素化大发888真ren平台xishi襤ehi浓缩生wu素化大发888真ren平台(1:100)成工作浓度。当日使用。

5. 酶结hewu工作液:实yan前计算当次实yan所xu用liang(以100μL/kong计),实际配制时yingduo配制100-200μL。使用前15穤hong樱悦附醜ewuxishi襤ehi浓缩HRP酶结hewu(1:100)成工作浓度。

当日使用。

renzhuan铁蛋白(TF)试剂盒biao准pinxishi方法tuli:(以500μL/管weili,也可gen据实际用lianglaixishi,如200μL/管)

            

1. 在各kongzhong加入biao准pin或样pin各100μL 37℃fu育90穤hong尹/span>

2. 加入100μ生wu素化大发888真ren平台工作液,37℃fu育60穤hong尹/span>

3. 洗涤3

4. 加入100μL酶结hewu工作液, 37℃fu育30穤hong尹/span>

5. 洗涤5

6. 加入90μL底wurong液, 37℃fu育15穤hong觶uo右

7. 加入50μL终止液,立即在450nmbochang处测liangOD

8. 结果计算

一、操作yin素对ELISA结果的影响ELISA操作步骤复杂,操作不当将yin起较大的误差。以下叙述各个步骤zhong的影响yin素。

1.加样

2.温育

3.洗涤

4.xianse

5.比se

er、灰区的设置通常qing况下,ELISA定性实yan以“yang性”和“阴性”lai报告结果,liangzhe间you一条分界线被称wei“yang性判断值”(cut-off valueCO值),这是定性**测定结果报告的依据。

san、biao本复查ELISA手工jian测过程复杂,影响yin素较duo,即使室内质控在控,也可能yinkong间差异er造成结果的差异,yinci加大复查力度是保证结果准确性的可kao方法,眗e缍狱/span>HBsAgHBeAgHCV-AbHIV-AbTP-Ab等xiang目的可疑、弱yang性biao本ji少见mo式的jian测结果进行复查。

四、结果判断和报告常用下lie几zhong方法表示结果:

1.定性测定

2.半定liang测定 结果一般以滴度表示。

3.定liang测定 即用已知liang的biao准pin作一系liexishi后进行ELISA测定,绘制biao准曲线,结果以优良liang或单位表示。在ELISA定liangjian测zhong每一块fanyingban都bixu绘制相ying的biao准曲线。

zhu意事xiang:

仔细阅读shuo明书。

jian查试剂盒biaoqian上的you效期。如果超过you效期,请勿使用。

按shuo明书萬anㄋ鵼ou试剂齐全(数liang、ti积)。

biao本制备要guifan,每份biao本ti积要按2-3个复kong以上的liang制备(zhu存),尽liang分装做备份。短期内无法实yanzhe,zhu意di温保存。

准备好所you实yan额外所xuwupin,(眗e缫埔浩鳎怨埽逑雌鳎竍iao仪)。

按shuo明书将所用试剂平衡至室温,gen据jian测biao本数liang萬anㄋ鵻u试剂的liang。

jian查试剂盒内每zhong试剂的zhu存条件,保证所you试剂均按zhao试剂盒内shuo明书推荐的条件存储。

jian查不稳定或zhebian质的试剂rong液(眗e绯恋砘騜ianse)。youxie试剂,眗e鏱iao准pinxishi液或zhejian测xishi液,可能在设计时就含you沉淀wu。所you试剂在滴入酶biaoban之前,bixu充分混匀。er由yu沉淀wu的特性,在加入酶biaoban之前,bixu不停jiao拌。

保证充分的fu育时间和温度。

qie勿使用不tong生产批号的试剂取代现you试剂或混he现you试剂。

在混he或rong解蛋白rong液时,避免paomo产生。

在实yankai始之前,安排好实yan流程。

在实yankai始之前,清洁工作台。

若you问题,ying与wo公司或代li商的技术支持联系

renzhuan铁蛋白(TF)试剂盒结果判断:

1. 每个biao准pin的OD值减去空白kong的OD值后作tu,如设置复kong,则ying取其平均值计算。以biao准pin的浓度weiheng坐biao,OD值wei纵坐biao,绘出biao准曲线。yi可以OD值weiheng坐biao,biao准pin的浓度wei纵坐biao,绘出biao准曲线。

2. 推荐使用zhuan襠ang那咧谱魅砑纥/span>curve expert 1.31.4,在软件界面既可gen据样pinOD值,由biao准曲线查出相ying的浓度,cheng以xishibei数;yi可将样pin的OD值代入biao准曲线的拟he方程式,计算出样pin浓度,再cheng以xishibei数,即wei样pin的实际浓度。

3. 若样pinOD值高yubiao准曲线上限,ying适当xishi后重测,计算浓度时yingcheng以xishibei数。 

renzhuan铁蛋白(TF)试剂盒you效期稳定性考cha

本试yan以zhuan铁蛋白(TF)weili

1.  OD值:

zheng常保存条件下you效期内和超过you效期2个月所测OD值比较

zheng常you效期内OD值: 3.2512.8452.126, 1.859, 1.463, 1.022, 0.710, 0.08

超过2个月you效期OD值:3.1.7, 2.643, 2.125, 1.796, 1.453, 0.876, 0.432, 0.07

2.回收率:分别yu定值血清ji血浆zhong加入一定liang的zhuan铁蛋白(TF)biao准pin,重复测定并计算其pin均值,回收率wei测定值与li论謉ang谋嚷省Ⅻ/span>

        zheng常保存条件下you效期内和过you效期2个月elisa 试剂盒回收率jian测结果

Sample

Conditions

Recovery range(%)

Average(%)

Serum(n=6)

normal

88-106

95

After 12 month

80-100

87

EDTA plasma(n=6)

normal

88-106

97

After 12 month

78-98

87

3. 线性:分别yu定值血清ji血浆zhong加入一定liang的zhuan铁蛋白(TF)biao准pin,并将biao本按1:2,1:4,1:8xishi,线性fan围即weixishi后样本zhongzhuan铁蛋白(TF)含liang的测定值与li论謉ang谋嚷省Ⅻ/span>

         zheng常保存条件下you效期内和过you效期2个月elisa 试剂盒回线性jian测结果

Sample

Conditions

1:2

1:4

1:8

Serum(n=6)

normal

81-92%

85-90%

89-105%

After 12month

80-88%

82-87%

87-101%

EDTA plasma(n=6)

normal

93-104%

81-97%

91-96%

After 12month

82-95%

75-82%

74-90%

4.  精密度:以样pin测定謉ang腷ian异系数CV表示。CV%=SD/meanx100

批内差:取tong一批次试剂盒对di值,zhong值和高值样本进行定liangjian测,每份样本测定20次,分别计算不tong浓度样本的平均值和SD值。

批间差:选取 3 个不tong批次的试剂盒分别对di、zhong、高值定值样本进行定liang测定, 每个样本使用tong一试剂盒重复测定 8 次,分别计算不tong浓度样本的平均值ji SD 值。(批内差: CV<10%;批间差: CV<11%)

       zheng常保存条件下you效期内和过you效期2个月elisa 试剂盒回精密度jian测结果

                    Intra-assay precision

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

16.68

14.22

70.25

62.36

369.75

327.88

SD

1.08

1.25

4.21

5.31

24.69

32.87

CV(%)

6.5

8.8

6.0

8.5

6.6

10

  

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

Sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

18.72

13.68

65.98

61.25

387.22

425.26

SD

1.45

1.52

4.83

5.18

28.49

36.87

CV%

7.7

11.1

7.3

8.5

7.3

8.7

renzhuan铁蛋白(TF)试剂盒hui出现的问题ji解jue办法:

1. 加入fanying终止液后,meiyouxi光值或xi光值piandi。

a.原yin:wei加入酶biao记wu。

解jue办法:请按zhao操作步骤进行。

b.原yin:试剂盒内容wuwei能充分回。

解jue办法:萬anㄊ约梁心谌輜u回温后再进行操作。

c.原yin:室温taidi。

解jue办法:若室温taidi(<19),请yu操作步骤4,适当延chang温育时间。

d.原yin:wei使用试剂盒的清洗液清洗。

解jue办法: 请用试剂盒内所提供的清洗液清洗。

e.原yin:试剂盒已过you效期限。

解jue办法:请更换成仍在you效期限内的试剂盒。

2. biao准曲线线性不佳,或是平行性不好。

a.原yin:温育位置避光不簃ei蚴躣ao气流干扰。

解jue办法: 请确认温育位置既不透光也不透风(如抽屉内)

b.原yin:操作时间拖tai久。

解jue办法:请在方法熟练后再进行操作。

c.原yin:微kong间相互污染。

解jue办法: 加样pin时,请小心勿溅出微kong外,以免造成其它微kong的污染。

d.原yin:biao准pin或酶biao记wu所加入的liang不一致。

解jue办法:请使用已校zheng过的移液枪,并确保其与xi头之间you高度密he性。

e.原yin:添加样pin或试剂的操作方法不zheng确。

解jue办法:加样pin或试剂时,xi头请勿接触微kong。

f.原yine碽an过程发生问题(如管耭an氯⑾赐阞an后wei立刻进行下一步骤)

解jue办法:请随时监控洗ban机洗ban过程,洗完后立即进行下一步骤。

3. xi光值均pian高(或线性不gou陡)

a.原yin:室温tai高(>25)

解jue办法: 若无法降di室内温度,请适当缩短步骤4的温育时间。

b.原yin:底wurong液受dao污染。

解jue办法: 若发现底wurong液已呈现danlanse,请不要再使用。

c.原yin:fanying时间超过tai久。

解jue办法:请控謕in磞ing时间。

d.原yin:酶biao记wu污染了盒内其它试剂。

解jue办法:使用过的xi头ying立即丢弃,可避免试剂间相互污染,fan是试剂(特别是酶biao记wu与底wurong液)接触过的容器ying立即清洗干净。(先以漂白水浸pao,再以清水冲洗干净,可确保无残留)

4. 阴性biao准pin的xi光值diyuyang性biao准pin的xi光值。

a.原yin:微kongzhong的试剂wei能充分混he。

解jue办法: 试剂加完后,xu轻敲盘四周使其充分混he均匀。

b.原yine碽an过程发生问题(tong2-f.)

解jue办法:请参考2-f.

c.原yin:添加样pin或酶biao记wu的liang不一致。

解jue办法: 请参考2-d.

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