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人白介su1shou体II(IL-1R2)白介su试剂盒

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大发888真人app名称: 人白介su1shou体II(IL-1R2)白介su试剂盒
大发888真人app型hao: IL-1R2
大发888真人app展商: ELISA试剂盒
大发888真人app文dang: wu相guan文dang

简单介绍

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人白介su1shou体II(IL-1R2)白介su试剂盒  的详细介绍


白介su1shou体II(IL-1R2)试剂盒

使用说明书

白介su1shou体II(IL-1R2)试剂盒基本原理:

cai用双大发888真人平台夹心ELISA法。用抗人IL-1R2大发888真人平台包被于mei标板上,实验时样品或标准苀en械娜薎L-1R2yu包被大发888真人平台jie合,游离的成fen被洗去。依次加入sheng物su化的抗人IL-1R2大发888真人平台和辣根过氧化物mei标记的qin和su。抗人IL-1R2大发888真人平台yujie合在包被大发888真人平台蓌i娜薎L-1R2jie合、sheng物suyuqin和su特异xingjie合而xing成**复合物,游离的成fen被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物mei的催化下呈现蓝色,加zhong止ye后变成huang色。用mei标yi在450nm波长处测OD值,人IL-1R2浓度yuOD450值之间硈hou齜i,通过绘制标准曲xian计算出样苀en腥薎L-1R2的浓度。

白介su1shou体II(IL-1R2)试剂盒描述:

英文名称 Human IL-1R2 (Interleukin 1 Receptor Type II) ELISA Kit
謝ing拿劈/span> 人白介su1shou体II(IL-1R2)meilian**吸附测定试剂盒
货hao X-EL-H0090c 謟hi簏/span> Human/人
规格 96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips)
检测fang法 双大发888真人平台夹心法
检测范围 31.25~2000pg/mL 灵min度 18.75pg/mL

人白介su1shou体II(IL-1R2)白介su试剂盒组成:

謝ing拿劈/span>

英文名称

规格

bao存

  ELISAmei标板(可拆卸)

  Micro ELISA  Plate(Dismountable)

  8×12 / 8×6*

4/-20 #

冻gan标准品

Reference Standard

  2/1 *

4/-20 #

标准品&样品稀shiye

Reference Standard & Sample Diluent

  1 20mL/12mL*

4

浓suosheng物su化大发888真人平台

Concentrated Biotinylated Detection Ab

  1 120μL/70μL*

4/-20 #

sheng物su化大发888真人平台稀shiye

Biotinytated Detection Ab Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓suoHRPmeijie合物

Concentrated HRP Conjugate

  1 120μL/70μL*

4(bi光)

meijie合物稀shiye

HRP Conjugate Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓suo洗涤襤ai?/span>25×

ConcentratedWashBuffer (25×)

  1 30mL/16mL*

4

底物溶襤ai?/span>TMB

Substrate Reagent

  1 10mL/6mL*

4(bi光)

fanyingzhong止ye

Stop Solution

  1 10mL/6mL*

4

封板fu膜

Plate Sealer

  5/3 *

 

大发888真人app说明书

Product  Description

  1 

 

zhi检报gao

Certificate of Analysis

  1 

 

人白介su1shou体II(IL-1R2)白介su试剂盒特别说明
*: [96T/48T](打开包装后请及时检查所觴ing锲肥欠衿雚uan完整)
#: 一周内使用可存于4℃,需长时间存fang或多次使用建yi存于-20.                                      

白介su1shou体II(IL-1R2)试剂盒检测qian准备工作:

1. 请提qian20fen钟从bing箱中取出试剂簒iao胶庵潦襴en。

2. 将浓suo洗涤ye用双蒸shui稀shi(1:25)。未用完的fang回4℃。从bing箱中取出的浓suo洗涤ye可能有jiejing,属于正常现象,可用40℃shuiyu微加热使jiejing完quan溶解后zai配制洗涤襤ai尤葁en度不要超过50℃,使用时洗涤yeying为室wen)。礲i帐褂谩Ⅻ/span>

3. 标准品10000×g离心1fen钟,加入标准品&样品稀shiye1.0mL至冻gan标准苀enxiao艄躦ai,静置10fen钟,上下颠倒数次,dai其chongfen溶解后,用移ye器将其轻轻混匀(浓度为8000pg/mL)。然后根据需要进行倍bi稀shi(注:不要直接在fanying孔中进行倍bi稀shi)。建yi配制成以下浓度:an照稀shifang法图例 标准品&样品稀shiye直接作为空白孔0ng/mL。如配制5ng/mL标准品:取0.5mL10ng/mL的上述标准品加入han有0.5mL标准品&样品稀shiye的EP管謝iao煸萰i可,其余浓度依此类推。 

4. sheng物su化大发888真人平台工作襤ai菏笛閝ian计算dang次实验所需用量(以100μL/孔计),实ji配制时ying多配制100-200μL。使觤en?/span>15fen钟,以sheng物su化大发888真人平台稀shiye稀shi浓suosheng物su化大发888真人平台(1:100)成工作浓度。礲i帐褂谩Ⅻ/span>

5. meijie合物工作襤ai菏笛閝ian计算dang次实验所需用量(以100μL/孔计),实ji配制时ying多配制100-200μL。使觤en?/span>15fen钟,以meijie合物稀shiye稀shi浓suoHRPmeijie合物(1:100)成工作浓度。

礲i帐褂谩Ⅻ/span>

白介su1shou体II(IL-1R2)试剂盒标准品稀shifang法图例aiㄒ狱/span>500μL/管为例,ye可根据实ji用量来稀shi,如200μL/管)

            

1. 在各孔中加入标准品或样品各100μL 37℃孵育90fen钟

2. 加入100μsheng物su化大发888真人平台工作襤ai?/span>37℃孵育60fen钟

3. 洗涤3

4. 加入100μLmeijie合物工作襤ai?/span> 37℃孵育30fen钟

5. 洗涤5

6. 加入90μL底物溶襤ai?/span> 37℃孵育15fen钟左右

7. 加入50μLzhong止襤aii在450nm波长处测量OD

8. jie果计算

一、操作因suduiELISAjie果的影响ELISA操作步骤复杂,操作不dang将引起较大的误差。以下叙述各个步骤中的影响因su。

1.加样

2.wen育

3.洗涤

4.显色

5.bi色

二、粂i膕he置通常qing况下,ELISA定xing实验襶u把粜yu焙汀耙跣yu崩幢╣aojie果,两者间有一tiaofen界xian被称为“阳xing判断值ao?/span>cut-off valueCO值),zhe是定xing**测定jie果报gao的依据。

三、标本复查ELISA手工检测过程复杂,影响因su较多,ji使室内zhi控在控,ye可能因孔间差异而造成jie果的差异,因此加大复查li度是baozhengjie果准确xing的可靠fang法,bi如duiHBsAgHBeAgHCV-AbHIV-AbTP-Ab等xiang目的可疑、弱阳xing标本及少jianmo蔶iang募觳鈐ie果进行复查。

si、jie果判断和报gao常用下lie几种fang法表示jie果:

1.定xing测定

2.半定量测定 jie果一般以滴度表示。

3.定量测定 ji用已知量的标准品作一xilie稀shi后进行ELISA测定,绘制标准曲xian,jie果以优良量或单wei表示。在ELISA定量检测中每一块fanying板都必须绘制相ying的标准曲xian。

白介su试剂盒注意事xiang:

仔细yuedu说明书。

检查试剂盒标签蓌i挠衳iaoqi。如果超过有xiaoqi,请wu使用。

an说明书确定所有试剂齐quan(数量、体ji)。

标本制备要规范,每份标本体ji要an2-3个复孔以蓌i牧恐票福ㄖ妫×縡en装做备份。短qi内wu法实验者,注意低wenbao存。

准备好所有实验额外所需物品,(bi如移ye器,试管,清洗器,mei标yi)。

an说明书将所用试剂平衡至室wen,根据检测标本数量确定所需试剂的量。

检查试剂盒内每謟hi约恋闹鎡iaojian,baozheng所有试剂均an照试剂盒内说明书推荐的tiaojian存chu。

检查不稳定或者变zhi的试剂溶襤ai╞i如沉淀或变色)。有些试剂,bi如标准品稀shiye或者检测稀shi襤ai赡茉趕he计时就han有沉淀物。所有试剂在滴入mei标板之qian,必需chongfen混匀。而由于沉淀物的特xing,在加入mei标板之qian,必需不ting搅拌。

baozhengchongfen的孵育时间和wen度。

莤ing鹗褂貌煌瑂hengchan批hao的试剂取代现有试剂或混合现有试剂。

在混合或溶解蛋白溶ye蔮ao琤i免泡沫chansheng。

在实验开shi之qian,an排好实验流程。

在实验开shi之qian,清洁工作台。

若觴ing蕋i,yingyu我公si或代理商的糺i踔С謑ianxi

白介su1shou体II(IL-1R2)试剂盒jie果判断:

1. 每个标准品的OD值减去空白孔的OD值后作图,如she謒ei纯祝騳ing取其平均值计算。以标准品的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,绘出标准曲xian。亦可以OD值为横坐标,标准品的浓度为纵坐标,绘出标准曲xian。

2. 推荐使用专襠ang那鷛ian制作软jian,如curve expert 1.31.4,在软jian界mian既可根据样品OD值,由标准曲xian查出相ying的浓度,乘以稀shi倍数;亦可将样品的OD值代入标准曲xian的拟合fang程式,计算出样苀angǘ龋瑉ai乘以稀shi倍数,ji为样品的实ji浓度。

3. 若样品OD值高于标准曲xian上限,ying适dang稀shi后重测,计算浓度时ying乘以稀shi倍数。 

白介su1shou体II(IL-1R2)试剂盒有xiaoqi稳定xing考cha

本试验以白介su1shou体II(IL-1R2)为例

1.  OD值:

正常bao存tiaojian下有xiaoqi内和超过有xiaoqi2个月所测OD值bi较

正常有xiaoqi内OD值: 3.2512.8452.126, 1.859, 1.463, 1.022, 0.710, 0.08

超过2个月有xiaoqiOD值:3.1.7, 2.643, 2.125, 1.796, 1.453, 0.876, 0.432, 0.07

2.回shoulv:fen别于定值血清及血浆中加入一定量的白介su1shou体II(IL-1R2)标准品,重复测定bing计算其品均值,回shoulv为测定值yu理论謉ang腷ilv。

        正常bao存tiaojian下有xiaoqi内和过有xiaoqi2个月elisa 试剂盒回shou聅hi觳鈐ie果

Sample

Conditions

Recovery range(%)

Average(%)

Serum(n=6)

normal

88-106

95

After 12 month

80-100

87

EDTA plasma(n=6)

normal

88-106

97

After 12 month

78-98

87

3. xianxing:fen别于定值血清及血浆中加入一定量的白介su1shou体II(IL-1R2)标准品,bing将标本an1:2,1:4,1:8稀shi,xianxing范围ji为稀shi后样本中白介su1shou体II(IL-1R2)han量的测定值yu理论謉ang腷ilv。

         正常bao存tiaojian下有xiaoqi内和过有xiaoqi2个月elisa 试剂盒回xianxing检测jie果

Sample

Conditions

1:2

1:4

1:8

Serum(n=6)

normal

81-92%

85-90%

89-105%

After 12month

80-88%

82-87%

87-101%

EDTA plasma(n=6)

normal

93-104%

81-97%

91-96%

After 12month

82-95%

75-82%

74-90%

4.  精密度:以样品测定謉ang谋湟靫i数CV表示。CV%=SD/meanx100

批内差:取同一批次试剂盒dui低值,中值和高值样本进行定量检测,每份样本测定20次,fen别计算不同浓度样本的平均值和SD值。

批间差:选取 3 个不同批次的试剂盒fen别dui低、中、高值定值样本进行定量测定, 每个样本使用同一试剂盒重复测定 8 次,fen别计算不同浓度样本的平均值及 SD 值。(批内差: CV<10%;批间差: CV<11%)

       正常bao存tiaojian下有xiaoqi内和过有xiaoqi2个月elisa 试剂盒回精密度检测jie果

                    Intra-assay precision

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

16.68

14.22

70.25

62.36

369.75

327.88

SD

1.08

1.25

4.21

5.31

24.69

32.87

CV(%)

6.5

8.8

6.0

8.5

6.6

10

  

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

Sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

18.72

13.68

65.98

61.25

387.22

425.26

SD

1.45

1.52

4.83

5.18

28.49

36.87

CV%

7.7

11.1

7.3

8.5

7.3

8.7

白介su1shou体II(IL-1R2)试剂盒会出现的问ti及解决办法:

1. 加入fanyingzhong止ye后,没觴ing庵祷蛭庵灯汀Ⅻ/span>

a.原因:未加入mei标记物。

解决办法:请an照操作步骤进行。

b.原因:试剂盒内容物未能chongfen回。

解决办法:确定试剂盒内容物回wen后zai进行操作。

c.原因:室wen太低。

解决办法:若室wen太低(<19),请于操作步骤4,适dang延长wen育时间。

d.原因:未使用试剂盒的清洗ye清洗。

解决办法: 请用试剂盒内所提供的清洗ye清洗。

e.原因:试剂盒已过有xiaoqi限。

解决办法:请更换成reng在有xiaoqi限内的试剂盒。

2. 标准曲xianxianxing不佳,或是平行xing不好。

a.原因:wen育wei置bi光不好或shou到气流gan扰。

解决办法: 请确认wen育wei置既不透光ye不透风(如抽屉内)

b.原因:操作时间拖太久。

解决办法:请在fang法熟练后zai进行操作。

c.原因:微孔间相互wu染。

解决办法: 加样品蔮ao胄⌒膚u溅出微孔外,以免造成其它微孔的wu染。

d.原因:标准品或mei标记物所加入的量不一致。

解决办法:请使用已xiao正过的移yeqiang,bing确bao其yu吸蚮en溆懈叨让芎闲yuⅫ/span>

e.原因:添加样品或试剂的操作fang法不正确。

解决办法:加样品或试剂蔮ao非雡u接触微孔。

f.原因:洗板过程发sheng问ti(如管路堵塞、洗完板后未立刻进行下一步骤)

解决办法:请随时监控洗板ji洗板过程,洗完后立ji进行下一步骤。

3. 吸光值均偏高(或xianxing不goudou)

a.原因:室wen太高(>25)

解决办法: 若wu法jiang低室内wen度,请适dangsuo短步骤4的wen育时间。

b.原因:底物溶yeshou到wu染。

解决办法: 若发现底物溶ye已呈现淡蓝色,请不要zai使用。

c.原因:fanying时间超过太久。

解决办法:请控制fanying时间。

d.原因:mei标记物wu染了盒内其它试剂。

解决办法:使用过的吸头ying立jiding弃,可bi免试剂间相互wu染,凡是试剂(特别是mei标记物yu底物溶ye)接触过的容器ying立ji清洗gan净。(先以piao白shui浸泡,zai以清shuichong洗gan净,可确baowu残留)

4. 阴xing标准品的吸光謉ang陀谘魓ing标准品的吸光值。

a.原因:微孔中的试剂未能chongfen混合。

解决办法: 试剂加完后,需轻敲盘si周使其chongfen混合均匀。

b.原因:洗板过程发sheng问ti(2-f.)

解决办法:请参考2-f.

c.原因:添加样品或mei标记物的量不一致。

解决办法: 请参考2-d.

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