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ATCC细胞 ren成纤维细胞生changyin子7(FGF7)试剂he

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大发888zhenrenapp名称: ATCC细胞 ren成纤维细胞生changyin子7(FGF7)试剂he
大发888zhenrenapp型号: FGF7
大发888zhenrenappzhan商: ELISA试剂he
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简dan介绍

ATCC细胞 ren成纤维细胞生changyin子7(FGF7)试剂he采用shuang大发888zhenren平台夹心ELISA法。用kangrenFGF7大发888zhenren平台包被于mei标ban上,shi验时样品或标准品中的renFGF7与包被大发888zhenren平台jiehe,游li的成分被xi去。yi次加入生物素化的kangrenFGF7大发888zhenren平台和la根过氧化物mei标记的亲和素。kangrenFGF7大发888zhenren平台与jiehe在包被大发888zhenren平台上的renFGF7jiehe、生物素与亲和素特异性jiehe而形成**复he物,游li的成分被xi去。加入显色di物(TMB),TMB在la根过氧化物mei的催化下呈现蓝色,加终止yehou变成黄色。用mei标仪在450nm波chang处测OD值,ren成纤维细胞生changyin子7(FGF7)试剂簒inǘ扔隣D450值之间呈正bi,通过绘制标准曲线计算出样品中renFGF7的浓度。


ATCC细胞 ren成纤维细胞生changyin子7(FGF7)试剂he  的详细介绍


ATCC细胞 ren成纤维细胞生changyin子7(FGF7)试剂he

使用说明shu

ren成纤维细胞生changyin子7(FGF7)试剂he基本原li:

采用shuang大发888zhenren平台夹心ELISA法。用kangrenFGF7大发888zhenren平台包被于mei标ban上,shi验时样品或标准品中的renFGF7与包被大发888zhenren平台jiehe,游li的成分被xi去。yi次加入生物素化的kangrenFGF7大发888zhenren平台和la根过氧化物mei标记的亲和素。kangrenFGF7大发888zhenren平台与jiehe在包被大发888zhenren平台上的renFGF7jiehe、生物素与亲和素特异性jiehe而形成**复he物,游li的成分被xi去。加入显色di物(TMB),TMB在la根过氧化物mei的催化下呈现蓝色,加终止yehou变成黄色。用mei标仪在450nm波chang处测OD值,renFGF7浓度与OD450值之间呈正bi,通过绘制标准曲线计算出样品中renFGF7的浓度。

ATCC细胞 ren成纤维细胞生changyin子7(FGF7)试剂he描述:

英文名称 Human FGF7 (Fibroblast Growth Factor 7) ELISA Kit
中文名称 ren成纤维细胞生changyin子7(FGF7)mei联**吸附测定试剂he
货号 X-EL-H0092c 种属 Human/ren
规格 96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips)
检测方法 shuang大发888zhenren平台夹心法
检测范wei 31.25~2000pg/mL 灵敏度 18.75pg/mL

ATCC细胞 ren成纤维细胞生changyin子7(FGF7)试剂he组成:

中文名称

英文名称

规格

保存

  ELISAmei标ban(可拆卸)

  Micro ELISA  Plate(Dismountable)

  8×12 / 8×6*

4/-20 #

冻干标准品

Reference Standard

  2/1 zhi*

4/-20 #

标准品&样品稀释ye

Reference Standard & Sample Diluent

  1 20mL/12mL*

4

浓缩生物素化大发888zhenren平台

Concentrated Biotinylated Detection Ab

  1zhi 120μL/70μL*

4/-20 #

生物素化大发888zhenren平台稀释ye

Biotinytated Detection Ab Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓缩HRPmeijiehe物

Concentrated HRP Conjugate

  1zhi 120μL/70μL*

4(避光)

meijiehe物稀释ye

HRP Conjugate Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓缩xi涤ye(25×

ConcentratedWashBuffer (25×)

  1 30mL/16mL*

4

di物溶ye(TMB

Substrate Reagent

  1 10mL/6mL*

4(避光)

反ying终止ye

Stop Solution

  1 10mL/6mL*

4

fengbanfumo

Plate Sealer

  5/3 *

 

大发888zhenrenapp说明shu

Product  Description

  1 

 

质检报gao

Certificate of Analysis

  1 

 

特bie说明
*: [96T/48T](dakai包装hou请及时检查suo有物品是否齐全完zheng)
#: 一zhou内使用可存于4℃,需chang时间存放或多次使用建议存于-20.                                      

ren成纤维细胞生changyin子7(FGF7)试剂he检测前准备工作:

1. 请提前20分zhongcong冰箱中取出试剂簒iao胶庵潦椅longⅫ/span>

2. 将浓缩xi涤ye用shuang蒸shui稀释(1:25)。蝐ong猛甑姆舎ui4℃。cong冰箱中取出的浓缩xi涤ye可能有jie晶,属于正常现象,可用40℃shuiyu微加热使jie晶完全溶jiehouzai配制xi涤ye(加热温度bu要chao过50℃,使用时xi涤yeying为室温)。礲i帐褂谩Ⅻ/span>

3. 标准品10000×gli心1分zhong,加入标准品&样品稀释ye1.0mL至冻干标准品謝iao艄芨牵仓曼/span>10分zhong,上下dian倒shu次,dai其充分溶jiehou,用移ye器将其轻轻混匀(浓度为8000pg/mL)。然hou根ju需要进行倍眗en∈停ㄗⅲ篵u要直接在反ying孔中进行倍眗en∈停=ㄒ榕渲瞥梢韵屡ǘ龋喊凑障∈头椒ㄍ糽i 标准品&样品稀释ye直接作为空白孔0ng/mL。如配制5ng/mL标准品:取0.5mL10ng/mL的上述标准品加入含有0.5mL标准品&样品稀释ye的EP管謝iao煸萰i可,其余浓度yi此类tui。 

4. 生物素化大发888zhenren平台工作ye:shi验前计算当次shi验suo需用量(以100μL/孔计),shi际配制时ying多配制100-200μL。使用前15分zhong,以生物素化大发888zhenren平台稀释襤e∈团ㄋ跎锼鼗蠓?88zhenren平台(1:100)成工作浓度。礲i帐褂谩Ⅻ/span>

5. meijiehe物工作ye:shi验前计算当次shi验suo需用量(以100μL/孔计),shi际配制时ying多配制100-200μL。使用前15分zhong,以meijiehe物稀释襤e∈团ㄋ酎/span>HRPmeijiehe物(1:100)成工作浓度。

礲i帐褂谩Ⅻ/span>

ren成纤维细胞生changyin子7(FGF7)试剂he标准品稀释方法图li:(以500μL/管为li,也可根jushi际用量来稀释,如200μL/管)

            

1. 在各孔中加入标准品或样品各100μL 37℃fu育90分zhong

2. 加入100μ生物素化大发888zhenren平台工作ye,37℃fu育60分zhong

3. xi涤3

4. 加入100μLmeijiehe物工作ye, 37℃fu育30分zhong

5. xi涤5

6. 加入90μLdi物溶ye, 37℃fu育15分zhong左右

7. 加入50μL终止ye,liji在450nm波chang处测量OD

8. jie果计算

一、操作yin素对ELISAjie果的影xiangELISA操作步骤复杂,操作瞙uai苯鸾xi蟮奈蟛睢R韵滦鹗龈鞲霾街柚械挠皒iangyin素。

1.加样

2.温育

3.xi涤

4.显色

5.bi色

二、hui区的she置通常qingkuang下,ELISA定性shi验襶u把粜yu焙汀皔in衴u崩幢╣aojie果,两者间有一条分界线被称为“阳性判断值”(cut-off valueCO值),这是定性**测定jie果报gao的yiju。

三、标本复查ELISA手工检测过程复杂,影xiangyin素jiao多,ji使室内质控在控,也可能yin孔间差异而造成jie果的差异,yin此加大复查力度是保证jie果譲i沸缘目煽糠椒ǎ琤i如对HBsAgHBeAgHCV-AbHIV-AbTP-Ab祌en钅康目蓎i、弱阳衴uan瓯炯吧偌鹠o蔶iang募觳鈐ie果进行复查。

四、jie果判断和报gao常用下列ji种方法表示jie果:

1.定性测定

2.半定量测定 jie果一ban以di度表示。

3.定量测定 ji用已知量的标准品作一系列稀释hou进行ELISA测定,绘制标准曲线,jie果以优liang量或danwei表示。在ELISA定量检测中每一块反yingban都必xu绘制相ying的标准曲线。

注意事xiang:

zi细阅du说明shu。

检查试剂he标签上的有效期。如果chao过有效期,请勿使用。

按说明shuque定suo有试剂齐全(shu量、体ji)。

标本制备要规范,每份标本体ji要按2-3个复孔以上的量制备(zhu存),尽量分装zuo备份。短期内无法shi验者,注意di温保存。

准备好suo有shi验额外suo需物品,(bi如移ye器,试管,清xi器,mei标仪)。

按说明shu将suo用试剂平衡至室温,根ju检测标本shu量que定suo需试剂的量。

检查试剂he内每种试剂的zhu存条件,保证suo有试剂jun按照试剂he内说明shutui荐的条件存储。

检查buwen定或者变謘hi氖约寥躽e(bi如沉dian或变色)。有些试剂,bi如标准品稀释ye或者检测稀释ye,可能在she计时就含有沉dian物。suo有试剂在di入mei标ban之前,必需充分混匀。而由于沉dian物的特性,在加入mei标ban之前,必需bu停搅拌。

保证充分的fu育时间和温度。

切勿使用bu同生产批号的试剂取代蟴hong惺约粱蚧靐e蟴hong惺约痢Ⅻ/span>

在混he或溶jie蛋白溶ye时,避免泡沫产生。

在shi验kai始之前,癱ai藕胹hi验liu程。

在shi验kai始之前,清洁工作台。

ruo有问题,ying与我公司或代li商的技术zhi持联系

ren成纤维细胞生changyin子7(FGF7)试剂hejie果判断:

1. 每个标准品的OD值jian去空白孔的OD值hou作图,如she謒ei纯祝騳ing取其平jun值计算。襶uan曜计返呐ǘ任猦eng坐标,OD謉i葑辏娉霰曜记摺R嗫梢狱/span>OD謉i猦eng坐标,标准品的浓度为纵坐标,绘出标准曲线。

2. tui荐使用专业的曲线制作软件,如curve expert 1.31.4,在软件界面ji可根ju样品OD值,由标准曲线查出相ying的浓度,cheng以稀释倍shuui嗫山返命/span>OD值代入标准曲线的拟he方程式,计算出样品浓度,zaicheng以稀释倍shu,ji为样品的shi际浓度。

3. ruo样品OD值高于标准曲线上限,ying蕇hi毕∈蚳ou重测,计算浓度时yingcheng以稀释倍shu。 

ren成纤维细胞生changyin子7(FGF7)试剂he有效期wen定性考察

本试验以成纤维细胞生changyin子7(FGF7)为li

1.  OD值:

正常保存条件下有效期内和chao过有效期2个月suo测OD值bijiao

正常有效期内OD值: 3.2512.8452.126, 1.859, 1.463, 1.022, 0.710, 0.08

chao过2个月有效期OD值:3.1.7, 2.643, 2.125, 1.796, 1.453, 0.876, 0.432, 0.07

2.hui收率:分bie于定值血清及血浆中加入一定量的成纤维细胞生changyin子7(FGF7)标准品,重复测定并计算其品jun值,hui收率为测定值与li论值的bi率。

        正常保存条件下有效期内和过有效期2个月elisa 试剂hehui收率检测jie果

Sample

Conditions

Recovery range(%)

Average(%)

Serum(n=6)

normal

88-106

95

After 12 month

80-100

87

EDTA plasma(n=6)

normal

88-106

97

After 12 month

78-98

87

3. 线性:分bie于定值血清及血浆中加入一定量的成纤维细胞生changyin子7(FGF7)标准品,并将标本按1:2,1:4,1:8稀释,线性范weiji为稀释hou样本中成纤维细胞生changyin子7(FGF7)含量的测定值与li论值的bi率。

         正常保存条件下有效期内和过有效期2个月elisa 试剂hehui线性检测jie果

Sample

Conditions

1:2

1:4

1:8

Serum(n=6)

normal

81-92%

85-90%

89-105%

After 12month

80-88%

82-87%

87-101%

EDTA plasma(n=6)

normal

93-104%

81-97%

91-96%

After 12month

82-95%

75-82%

74-90%

4.  精mi度:以样品测定值的变异系shuCV表示。CV%=SD/meanx100

批内差:取同一批次试剂he对di值,中值和高值样本进行定量检测,每份样本测定20次,分bie计算bu同浓度样本的平jun值和SD值。

批间差:选取 3 个bu同批次的试剂he分bie对di、中、高值定值样本进行定量测定, 每个样本使用同一试剂he重复测定 8 次,分bie计算bu同浓度样本的平jun值及 SD 值。(批内差: CV<10%;批间差: CV<11%)

       正常保存条件下有效期内和过有效期2个月elisa 试剂hehui精mi度检测jie果

                    Intra-assay precision

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

16.68

14.22

70.25

62.36

369.75

327.88

SD

1.08

1.25

4.21

5.31

24.69

32.87

CV(%)

6.5

8.8

6.0

8.5

6.6

10

  

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

Sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

18.72

13.68

65.98

61.25

387.22

425.26

SD

1.45

1.52

4.83

5.18

28.49

36.87

CV%

7.7

11.1

7.3

8.5

7.3

8.7

ren成纤维细胞生changyin子7(FGF7)试剂he会出现的问题及jie决办法:

1. 加入反ying终止yehou,没有吸光值或吸光值偏di。

a.原yin:未加入mei标记物。

jie决办法:请按照操作步骤进行。

b.原yin:试剂he内容物未能充分hui。

jie决办法:que定试剂he内容物hui温houzai进行操作。

c.原yin:室温太di。

jie决办法:ruo室温太di(<19),请于操作步骤4,蕇hi毖觕hang温育时间。

d.原yin:未使用试剂he的清xiye清xi。

jie决办法: 请用试剂he内suo提供的清xiye清xi。

e.原yin:试剂he已过有效期限。

jie决办法:请更huan成仍在有效期限内的试剂he。

2. 标准曲线线性bujia,或是平行性bu好。

a.原yin:温育wei置避光bu好或受到气liu干扰。

jie决办法: 请queren温育wei置jibu透光也bu透feng(如抽屉内)

b.原yin:操作时间拖太久。

jie决办法:请在方法熟练houzai进行操作。

c.原yin:微孔间相互污染。

jie决办法: 加样品时,请小心勿溅出微孔外,以免造成其它微孔的污染。

d.原yin:标准品或mei标记物suo加入的量bu一謑ongⅫ/span>

jie决办法:请使用已xiao正过的移ye枪,并que保其与吸头之间有高度mihe衴uⅫ/span>

e.原yin:添加样品或试剂的操作方法bu正que。

jie决办法:加样品或试剂时,吸头请勿接触微孔。

f.原yin:xiban过程发生问题(如管路堵塞、xi完banhou未li刻进行下一步骤)

jie决办法:请随时jian控xiban机xiban过程,xi完houliji进行下一步骤。

3. 吸光值jun偏高(或线性bu够陡)

a.原yin:室温太高(>25)

jie决办法: ruo无法jiangdi室内温度,请蕇hi彼醵滩街琰/span>4的温育时间。

b.原yin:di物溶ye受到污染。

jie决办法: ruo发现di物溶ye已呈现淡蓝色,请bu要zai使用。

c.原yin:反ying时间chao过太久。

jie决办法:请控制反ying时间。

d.原yin:mei标记物污染了he内其它试剂。

jie决办法:使用过的吸头yinglijiding弃,可避免试糽iang湎嗷ノ廴荆彩鞘约傈/span>(特bie是mei标记物与di物溶ye)接触过的容器yingliji清xi干净。(xian以漂白shui浸泡,zai以清shui冲xi干净,可que保无残留)

4. yin衴uan曜计返奈庵礵i于阳衴uan曜计返奈庵怠Ⅻ/span>

a.原yin:微孔中的试剂未能充分混he。

jie决办法: 试糽iang油阧ou,需轻敲盘四zhou使其充分混hejun匀。

b.原yin:xiban过程发生问题(2-f.)

jie决办法:请参考2-f.

c.原yin:添加样品或mei标记物的量bu一謑ongⅫ/span>

jie决办法: 请参考2-d.

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