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人抗miao勒管**(AMH)试剂he

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大发888真人app名chen: 人抗miao勒管**(AMH)试剂he
大发888真人appxing号: AMH
大发888真人app展商: ELISA试剂he
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简单介绍

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人抗miao勒管**(AMH)试剂he  的详细介绍


抗miao勒管**(AMH)试剂he

使用说明shu

抗miao勒管**(AMH)试剂he基ben原li:

ben试剂he采用shuang大发888真人平台夹心ELISA法。用抗人AMH大发888真人平台包被于酶标板上,实验时样pin或标准pin中的人AMH与包被大发888真人平台结合,游离的cheng分被洗去。yi次jia入生物素hua的抗人AMH大发888真人平台hela根guo氧hua物酶标记的亲he素。抗人AMH大发888真人平台与结合zai包被大发888真人平台上的人AMH结合、生物素与亲he素te异性结合erxingcheng**复合物,游离的cheng分被洗去。jia入显se底物(TMB),TMBzaila根guo氧hua物酶的催hua下cheng现蓝se,jia终止液后变cheng黄se。用酶标仪zai450nm波长处测OD值,人AMH浓度与OD450值之间cheng正比,通guo绘制标准曲xian计算出样pin中人AMH的浓度。

抗miao勒管**(AMH)试剂he描述:

英文名chen Human AMH (Anti-Mullerian Hormone) ELISA Kit
謝ing拿鹀hen 人抗miao勒管**(AMH)酶lian**吸附测定试剂he
货号 X-EL-H0317c 种shu Human/人
规格 96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips)
检测方法 shuang大发888真人平台夹心法
检测范围 93.75~6000pg/mL 灵min度 56.25pg/mL

试剂he组cheng:

謝ing拿鹀hen

英文名chen

规格

保存

  ELISA酶标板(可chaixie)

  Micro ELISA  Plate(Dismountable)

  8×12 / 8×6*

4/-20 #

冻干标准pin

Reference Standard

  2/1 *

4/-20 #

标准pin&样pin稀释液

Reference Standard & Sample Diluent

  1 20mL/12mL*

4

浓suo生物素hua大发888真人平台

Concentrated Biotinylated Detection Ab

  1 120μL/70μL*

4/-20 #

生物素hua大发888真人平台稀释液

Biotinytated Detection Ab Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓suoHRP酶结合物

Concentrated HRP Conjugate

  1 120μL/70μL*

4(避光)

酶结合物稀释液

HRP Conjugate Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓suo洗涤液(25×

ConcentratedWashBuffer (25×)

  1 30mL/16mL*

4

底物溶液(TMB

Substrate Reagent

  1 10mL/6mL*

4(避光)

穋ongχ罩挂裹/span>

Stop Solution

  1 10mL/6mL*

4

feng板竎ai|/span>

Plate Sealer

  5/3 *

 

大发888真人app说明shu

Product  Description

  1 

 

质检报告

Certificate of Analysis

  1 

 

te别说明
*: [96T/48T](打开包zhuang后请ji时检查所you物pin是否qi全完整)
#: 一周内使用可存于4℃,需长时间存放或多次使用建议存于-20.                                      

抗miao勒管**(AMH)试剂he检测前准备工zuo:

1. 请提前20分zhongcong冰箱中取出试剂he,平heng至室温。

2. 将浓suo洗涤液用shuang蒸shui稀释(1:25)。蝐ong猛甑姆呕?/span>4℃。cong冰箱中取出的浓suo洗涤液可能you结晶,shu于正常现xiang,可用40℃shui浴weijia热使结晶完全溶解后zai配制洗涤液(jia热温度不要超guo50℃,使用时洗涤液应为室温)。当日使用。

3. 标准pin10000×g离心1分zhong,jia入标准pin&样pin稀释液1.0mL至冻干标准pin中,旋紧管盖,静zhi10分zhong,上下颠倒数次,dai其充分溶解后,用移液器将其qingqing混yun(浓度为8000pg/mL)。然后根据需要进行倍比稀释(注:不要直接zai穋ong字薪斜侗认∈停=ㄒ榕渲芻heng以下浓度:按照稀释方法图例 标准pin&样pin稀释液直接zuo为空白孔0ng/mL。如配制5ng/mL标准pin:取0.5mL10ng/mL的上述标准pinjia入含you0.5mL标准pin&样pin稀释液的EP管中,混yunji可,其余浓度yici类推。 

4. 生物素hua大发888真人平台工zuo液:实验前计算当次实验所需用liang(以100μL/孔计),实际配制时应多配制100-200μL。使觤en?/span>15分zhong,以生物素hua大发888真人平台稀释液稀释浓suo生物素hua大发888真人平台(1:100)cheng工zuo浓度。当日使用。

5. 酶结合物工zuo液:实验前计算当次实验所需用liang(以100μL/孔计),实际配制时应多配制100-200μL。使觤en?/span>15分zhong,以酶结合物稀释液稀释浓suoHRP酶结合物(1:100)cheng工zuo浓度。

当日使用。

抗miao勒管**(AMH)试剂he标准pin稀释方法图例:(以500μL/管为例,ye可根据实际用liang来稀释,如200μL/管)

            

1. zai各孔中jia入标准pin或样pin各100μL 37℃孵育90分zhong

2. jia入100μ生物素hua大发888真人平台工zuo液,37℃孵育60分zhong

3. 洗涤3

4. jia入100μL酶结合物工zuo液, 37℃孵育30分zhong

5. 洗涤5

6. jia入90μL底物溶液, 37℃孵育15分zhong左右

7. jia入50μL终止液,立jizai450nm波长处测liangOD

8. 结果计算

一、操zuo因素对ELISA结果的影响ELISA操zuobuzhou复杂,操zuo不当将yinqi较大的wu差。以下叙述各个buzhou中的影响因素。

1.jia样

2.温育

3.洗涤

4.显se

5.比se

二、灰区的设zhi通常情kuang下,ELISA定性实验以“阳性”he“yin性”来报告结果,liangzhe间you一tiao分界xian被chen为“阳性舩ie现怠保?/span>cut-off valueCO值),zhe是定性**测定结果报告的yi据。

三、标ben复查ELISA手工检测guo程复杂,影响因素较多,ji使室内质控zai控,ye可能因孔间差异er造cheng结果的差异,因cijia大复查力度是保证结果譲i沸缘目煽糠椒ǎ热缍狱/span>HBsAgHBeAgHCV-AbHIV-AbTP-Ab等xiang目的可疑、ruo阳性标benji少见模式的检测结果进行复查。

四、结果舩ie蟞e报告常用下列ji种方法表示结果:

1.定性测定

2.半定liang测定 结果一ban以滴度表示。

3.定liang测定 糲ong靡褄hiliang的标准pinzuo一系列稀释后进行ELISA测定,绘制标准曲xian,结果以you良liang或单位表示。zaiELISA定liang检测中每一块穋ongΠ宥糱ixu绘制相应的标准曲xian。

注意shixiang:

仔细yuedu说明shu。

检查试剂he标签上的you效期。如果超guoyou效期,请勿使用。

癱i得鱯huque定所you试剂qi全(数liang、体积)。

标ben制备要规范,每份标ben体积要按2-3个复孔以上的liang制备(贮存),尽liang分zhuang做备份。短期内wu法实验zhe,注意低温保存。

准备好所you实验ewai所需物pin,(比如移液器,试管,qing洗器,酶标仪)。

癱i得鱯hu将所用试剂平heng至室温,根据检测标ben数liangque定所需试剂的liang。

检查试剂he内每种试剂的贮存tiaojian,保证所you试剂均按照试剂he内说明shu推荐的tiaojian存储。

检查不稳定或zhe变质的试剂溶液(比如沉淀或变se)。you些试剂,比如标准pin稀释液或zhe检测稀释液,可能zai设计蔮en秃瑈ou沉淀物。所you试剂zai滴入酶标板之前,bi需充分混yun。er由于沉淀物的te性,zaijia入酶标板之前,bi需不停搅拌。

保证充分的孵育时间he温度。

莤ing鹗褂貌煌诺氖约寥〈謞ou试剂或混合现you试剂。

zai混合或溶解蛋白溶液时,避免pao沫产生。

zai实验开始之前,安排好实验流程。

zai实验开始之前,qing洁工zuo台。

ruoyou问ti,应与我公薺ing虼鷏i商的技术支持lian系

抗miao勒管**(AMH)试剂he结果舩ie吸/span>:

1. 每个标准pin的OD值减去空白孔的OD值后zuo图,如设zhi复孔,则应取其平均值计算。以标准pin的浓度为横zuo标,OD值为纵zuo标,绘出标准曲xian。亦可以OD值为横zuo标,标准pin的浓度为纵zuo标,绘出标准曲xian。

2. 推荐使用专业的曲xian制zuo软jian,如curve expert 1.31.4,zai软jian界mianji可根据样pinOD值,由标准曲xian查出相应的浓度,乘以稀释倍数;亦可将样pin的OD值代入标准曲xian的拟合方程式,计算出样pin浓度,zai乘以稀释倍数,ji为样pin的实际浓度。

3. ruo样pinOD值高于标准曲xian上限,应适当稀释后重测,计算浓度时应乘以稀释倍数。 

抗miao勒管**(AMH)试剂heyou效期稳定性考cha

ben试验以抗miao勒管**(AMH)为例

1.  OD值:

正常保存tiaojian下you效期内he超guoyou效期2个月所测OD值比较

正常you效期内OD值: 3.2512.8452.126, 1.859, 1.463, 1.022, 0.710, 0.08

超guo2个月you效期OD值:3.1.7, 2.643, 2.125, 1.796, 1.453, 0.876, 0.432, 0.07

2.回收率:分别于定值xueqingjixue浆中jia入襤uan╨iang的抗miao勒管**(AMH)标准pin,重复测定并计算其pin均值,回收率为测定值与li论值的比率。

        正常保存tiaojian下you效期内heguoyou效期2个月elisa 试剂he回收率检测结果

Sample

Conditions

Recovery range(%)

Average(%)

Serum(n=6)

normal

88-106

95

After 12 month

80-100

87

EDTA plasma(n=6)

normal

88-106

97

After 12 month

78-98

87

3. xian性:分别于定值xueqingjixue浆中jia入襤uan╨iang的抗miao勒管**(AMH)标准pin,并将标ben按1:2,1:4,1:8稀释,xian性范围ji为稀释后样ben中抗miao勒管**(AMH)含liang的测定值与li论值的比率。

         正常保存tiaojian下you效期内heguoyou效期2个月elisa 试剂he回xian性检测结果

Sample

Conditions

1:2

1:4

1:8

Serum(n=6)

normal

81-92%

85-90%

89-105%

After 12month

80-88%

82-87%

87-101%

EDTA plasma(n=6)

normal

93-104%

81-97%

91-96%

After 12month

82-95%

75-82%

74-90%

4.  精密度:以样pin测定值的变异系数CV表示。CV%=SD/meanx100

批内差:取同一批次试剂he对低值,中值he高值样ben进衳ie╨iang检测,每份样ben测定20次,分别计算不同浓度样ben的平均值heSD值。

批间差:选取 3 个不同批次的试剂he分别对低、中、高值定值样ben进衳ie╨iang测定, 每个样ben使用同一试剂he重复测定 8 次,分别计算不同浓度样ben的平均值ji SD 值。(批内差: CV<10%;批间差: CV<11%)

       正常保存tiaojian下you效期内heguoyou效期2个月elisa 试剂he回精密度检测结果

                    Intra-assay precision

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

16.68

14.22

70.25

62.36

369.75

327.88

SD

1.08

1.25

4.21

5.31

24.69

32.87

CV(%)

6.5

8.8

6.0

8.5

6.6

10

  

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

Sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

18.72

13.68

65.98

61.25

387.22

425.26

SD

1.45

1.52

4.83

5.18

28.49

36.87

CV%

7.7

11.1

7.3

8.5

7.3

8.7

抗miao勒管**(AMH)试剂he会出现的问tiji解决ban法:

1. jia入穋ongχ罩挂汉螅琺eiyou吸光值或吸光值偏低。

a.原因:未jia入酶标记物。

解决ban法:请按照操zuobuzhou进行。

b.原因:试剂he内容物未能充分回。

解决ban法:que定试剂he内容物回温后zai进行操zuo。

c.原因:室温太低。

解决ban法:ruo室温太低(<19),请于操zuobuzhou4,适当延长温育时间。

d.原因:未使用试剂he的qing洗液qing洗。

解决ban法: 请用试剂he内所提gong的qing洗液qing洗。

e.原因:试剂he已guoyou效期限。

解决ban法:请geng换cheng仍zaiyou效期限内的试剂he。

2. 标准曲xianxian性不佳,或是平行性不好。

a.原因:温育位zhi避光不簃ei蚴艿狡鞲扇拧Ⅻ/span>

解决ban法: 请que认温育位zhiji不透光ye不透风(如抽屉内)

b.原因:操zuo时间拖太jiu。

解决ban法:请zai方法shulian后zai进行操zuo。

c.原因:wei孔间相互污染。

解决ban法: jia样pin时,请小心勿溅出wei孔wai,以免造cheng其它wei孔的污染。

d.原因:标准pin或酶标记物所jia入的liang不一致。

解决ban法:请使用已校正guo的移液枪,并que保其与吸头之间you高度密合性。

e.原因:添jia样pin或试剂的操zuo方法不正que。

解决ban法:jia样pin或试剂时,吸头请勿接触wei孔。

f.原因:洗板guo程发生问ti(如管路dusai、洗完板后未立刻进行下一buzhou)

解决ban法:请随时监控洗板ji洗板guo程,洗完后立ji进行下一buzhou。

3. 吸光值均偏高(或xian性不筯uan伏/span>)

a.原因:室温太高(>25)

解决ban法: ruowu法降低室内温度,请适当suo短buzhou4的温育时间。

b.原因:底物溶液受到污染。

解决ban法: ruo发现底物溶液已cheng现淡蓝se,请不要zai使用。

c.原因:穋ongκ奔涑琯uo太jiu。

解决ban法:请控謕incongκ奔洹Ⅻ/span>

d.原因:酶标记物污染了he内其它试剂。

解决ban法:使用guo的吸头应立jiding弃,可避免试剂间相互污染,凡是试剂(te别蕅iao副昙俏镉氲孜锶芤裹/span>)接触guo的容器应立jiqing洗干jing。(先以piao白shui浸pao,zai以qingshui冲洗干jing,可que保wucanliu)

4. yin性标准pin的吸光值低于阳性标准pin的吸光值。

a.原因:wei孔中的试剂未能充分混合。

解决ban法: 试剂jia完后,需qingqiao盘四周使其充分混合均yun。

b.原因:洗板guo程发生问ti(2-f.)

解决ban法:请参考2-f.

c.原因:添jia样pin或酶标记物的liang不一致。

解决ban法: 请参考2-d.

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