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人瘦素受体(LEPR)试剂盒

如果nin对gai大发888真人app竫ing巳e话,ke以
大发888真人app名称: 人瘦素受体(LEPR)试剂盒
大发888真人app型号: LEPR
大发888真人app展商: ELISA试剂盒
大发888真人appwen档: 无相guanwen档

jiandan介绍

恒源国际


人瘦素受体(LEPR)试剂盒  de详细介绍


瘦素受体(LEPR)试剂盒

使用说明书

瘦素受体(LEPR)试剂盒基本原理:

本试剂盒采用shuang大发888真人平台紉ing腅LISA法。用kang人LEPR大发888真人平台包被于酶biao板上,实验时样pin或biao准pin中de人LEPR与包被大发888真人平台结he,游离de成穤hi幌磓u。襩ai渭尤肷鷚u素化dekang人LEPR大发888真人平台和lagen过yang化wu酶biaojideqin和素。kang人LEPR大发888真人平台与结he在包被大发888真人平台上de人LEPR结he、生wu素与qin和素特yi性结he而形成**复hewu,游离de成穤hi幌磓u。加入显色diwu(TMB),TMB在lagen过yang化wu酶de催化xia呈现蓝色,加终止ye后变成黄色。用酶biao仪在450nm波长处测OD值,人LEPR浓度与OD450值之jian呈正比,tong过huizhibiao譲i呒扑愠鲅鵳in中人LEPRde浓秖uⅫ/span>

瘦素受体(LEPR)试剂盒描述:

英wen名称 Human LEPR (Leptin Receptor) ELISA Kit
中wen名称 人瘦素受体(LEPR)酶lian**吸附测定试剂盒
huo号 X-EL-H0093c 种shu Human/人
规格 96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips)
检测方法 shuang大发888真人平台紉ing姆?/span>
检测范围 0.313~20ng/mL 灵敏度 0.188ng/mL

试剂盒组成:

中wen名称

英wen名称

规格

保存

  ELISA酶biao板(ke拆卸)

  Micro ELISA  Plate(Dismountable)

  8×12 / 8×6*

4/-20 #

冻干biao准pin

Reference Standard

  2/1 zhi*

4/-20 #

biao准pin&样pin稀释ye

Reference Standard & Sample Diluent

  1 20mL/12mL*

4

浓suo生wu素化大发888真人平台

Concentrated Biotinylated Detection Ab

  1zhi 120μL/70μL*

4/-20 #

生wu素化大发888真人平台稀释ye

Biotinytated Detection Ab Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓suoHRP酶结hewu

Concentrated HRP Conjugate

  1zhi 120μL/70μL*

4(biguang)

酶结hewu稀释ye

HRP Conjugate Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓suo洗涤ye(25×

ConcentratedWashBuffer (25×)

  1 30mL/16mL*

4

diwurongye(TMB

Substrate Reagent

  1 10mL/6mL*

4(biguang)

反应终止ye

Stop Solution

  1 10mL/6mL*

4

封板fu膜

Plate Sealer

  5/3 *

 

大发888真人app说明书

Product  Description

  1 

 

质检报告

Certificate of Analysis

  1 

 

特别说明
*: [96T/48T](打开包装后请及时检查所有wupin是否qi全完整)
#: 一周内使用ke存于4℃,需长时jian存fang或多次使用建议存于-20.                                      

瘦素受体(LEPR)试剂盒检测前准备gong作:

1. 请提前20fenzhong从bing箱中qu出试剂盒,平衡至室温。

2. 将浓suo洗涤ye用shuang蒸水稀释(1:25)。wei用完defang回4℃。从bing箱中qu出de浓suo洗涤yeke能有结晶,shu于正常现象,ke用40℃水浴微加热使结晶完全rong解后再配zhi洗涤ye(加热温度瞙ui?/span>50℃,使用时洗涤ye应为室温)。当ri使用。

3. biao准pin10000×g离心1fenzhong,加入biao准pin&样pin稀释ye1.0mL至冻干biao准pin中,旋紧管盖,静zhi10fenzhong,上xia颠倒数次,待其充fenrong解后,用移yeqi将其轻轻混匀(浓度为8000pg/mL)。然后gen据需要jinxing倍比稀释(注:瞙ui獄hi接在反应孔中jinxing倍比稀释)。建议配zhi成以xia浓度:按照稀释方法图例 biao准pin&样pin稀释yezhi接作为空白孔0ng/mL。如配zhi5ng/mLbiao准pin:qu0.5mL10ng/mLde上述biao准pin加入含有0.5mLbiao准pin&样pin稀释yedeEP管中,混匀即ke,其yu浓度襩ai薼ei推。 

4. 生wu素化大发888真人平台gong作ye:实验前计算当次实验所需用liang(以100μL/孔计),实ji配zhi时应多配zhi100-200μL。使用前15fenzhong,以生wu素化大发888真人平台稀释襤e∈团╯uo生wu素化大发888真人平台(1:100)成gong作浓秖u5眗i使用。

5. 酶结hewugong作ye:实验前计算当次实验所需用liang(以100μL/孔计),实ji配zhi时应多配zhi100-200μL。使用前15fenzhong,以酶结hewu稀释襤e∈团╯uoHRP酶结hewu(1:100)成gong作浓秖uⅫ/span>

当ri使用。

瘦素受体(LEPR)试剂盒biao准pin稀释方法图例aiㄒ狱/span>500μL/管为例,也kegen据实ji用lianglai稀释,如200μL/管)

            

1. 在各孔中加入biao准pin或样pin各100μL 37℃孵yu90fenzhong

2. 加入100μ生wu素化大发888真人平台gong作ye,37℃孵yu60fenzhong

3. 洗涤3

4. 加入100μL酶结hewugong作ye, 37℃孵yu30fenzhong

5. 洗涤5

6. 加入90μLdiwurongye, 37℃孵yu15fenzhong左右

7. 加入50μL终止ye,立即在450nm波长处测liangOD

8. 结果计算

一、操作因素对ELISA结果de影响ELISA操作buzhou复杂,操作瞙uai苯鸾洗骴e误差。以xia叙述各个buzhou中de影响因素。

1.加样

2.温yu

3.洗涤

4.显色

5.比色

er、huiqude设zhitong常情况xia,ELISA定性实验以“阳性”和“阴性”lai报告结果,两者jian有一条fen界线被称为“阳性判断值”(cut-off valueCO值),这是定性**测定结果报告de依据。

三、biao本复查ELISA手gong检测过程复杂,影响因素较多,即使室内质控在控,也ke能因孔jian差yi而造成结果de差yi,因ci加大复查力度是保证结果准que性deke靠方法,比如对HBsAgHBeAgHCV-AbHIV-AbTP-Ab等项目deke疑、弱阳性biao本及少jian模式de检测结果jinxing复查。

si、结果判断和报告常用xia列几种方法表示结果:

1.定性测定

2.半定liang测定 结果一般以滴度表蔶inⅫ/span>

3.定liang测定 即用yizhiliangdebiao准pin作一xi列稀释后jinxingELISA测定,huizhibiao譲i撸峁杂帕糽iang或dan位表蔶inT冱/span>ELISA定liang检测中每一块反应板du必须huizhi相应debiao譲i摺Ⅻ/span>

注意shi项:

仔细阅读说明书。

检查试剂盒biao签上de觴ing凇H绻xing冢胛鹗褂谩Ⅻ/span>

癱i得魇閝ue定所有试剂qi全(数liang、体ji)。

biao本zhi备要规范,每份biao本体ji要按2-3个复孔以上deliangzhi备(zhu存),jinliangfen装做备份。短期内无法实验者,注意低温保存。

准备好所有实验额外所需wupin,(比如移yeqi,试管,清洗qi,酶biao仪)。

癱i得魇榻檬约疗胶庵潦椅拢琯en据检测biao本数liangque定所需试剂deliang。

检查试剂盒内每种试剂dezhu存条件,保证所有试剂jun按照试剂盒内说明书推荐de条件存储。

检查不稳定或者变质de试剂rongye(比如沉淀或变色)。觴ing┦约粒热鏱iao准pin稀释ye或者检测稀释ye,ke能在设计时就含有沉淀wu。所有试剂在滴入酶biao板之前,必需充fen混詑u6捎诔恋韜ude特性,在加入酶biao板之前,必需不停搅拌。

保证充fende孵yu时jian和温秖uⅫ/span>

切勿使用不同生产批号de试剂qu代蟴hong惺约粱蚧靐e蟴hong惺约痢Ⅻ/span>

在混he或rong解蛋白rongye时,bi免pao沫产生。

在实验开始之前,an排好实验流程。

在实验开始之前,清洁gong作台。

若有问题,应与我公si或代理商deji术zhi持lianxi

瘦素受体(LEPR)试剂盒结果判断:

1. 每个biao准pindeOD值jianqu空白孔deOD值后作图,如设zhi复孔,ze应qu其平jun值计算。以biao准pinde浓度为横坐biao,OD值为纵坐biao,hui出biao譲i摺R鄈e以OD值为横坐biao,biao准pinde浓度为纵坐biao,hui出biao譲i摺Ⅻ/span>

2. 推荐使用专业de曲线zhi作软件,如curve expert 1.31.4,在软件界面既kegen据样pinOD值,由biao譲i卟槌鱿嘤e浓度,乘以稀释倍数ui鄈e将样pindeOD值代入biao譲i遜e拟he方程式,计算出样苀angǘ龋俪艘韵∈捅妒次鵳inde实ji浓秖uⅫ/span>

3. 若样pinOD值高于biao譲i呱舷蓿hi当稀释后重测,计算浓度时应乘以稀释倍数。 

瘦素受体(LEPR)试剂盒觴ing谖榷ㄐ钥疾朦/span>

本试验以瘦素受体(LEPR)为例

1.  OD值:

正常保存条件xia觴ing谀诤统xing冱span>2个月所测OD值比较

正常觴ing谀冱span>OD值: 3.2512.8452.126, 1.859, 1.463, 1.022, 0.710, 0.08

超过2个月觴ing冱/span>OD值:3.1.7, 2.643, 2.125, 1.796, 1.453, 0.876, 0.432, 0.07

2.回收率:穤hi鹩诙ㄖ祒ue清及xue浆中加入襤uan╨iangde瘦素受体(LEPR)biao准pin,重复测定并计算其pinjun值,回收率为测定值与理论值de比率。

        正常保存条件xia觴ing谀诤凸xing冱span>2个月elisa 试剂盒回收率检测结果

Sample

Conditions

Recovery range(%)

Average(%)

Serum(n=6)

normal

88-106

95

After 12 month

80-100

87

EDTA plasma(n=6)

normal

88-106

97

After 12 month

78-98

87

3. 线性:穤hi鹩诙ㄖ祒ue清及xue浆中加入襤uan╨iangde瘦素受体(LEPR)biao准pin,并将biao本按1:2,1:4,1:8稀释,线性范围即为稀释后样本中瘦素受体(LEPR)含liangde测定值与理论值de比率。

         正常保存条件xia觴ing谀诤凸xing冱span>2个月elisa 试剂盒回线性检测结果

Sample

Conditions

1:2

1:4

1:8

Serum(n=6)

normal

81-92%

85-90%

89-105%

After 12month

80-88%

82-87%

87-101%

EDTA plasma(n=6)

normal

93-104%

81-97%

91-96%

After 12month

82-95%

75-82%

74-90%

4.  精密度:以样pin测定值de变yixi数CV表蔶inⅫ/span>CV%=SD/meanx100

批内差:qu同一批次试剂盒对低值,中值和高值样本jinxing定liang检测,每份样本测定20次,穤hi鸺扑悴煌ǘ妊綿e平jun值和SD值。

批jian差:xuanqu 3 个不同批次de试剂盒穤hi鸲缘汀⒅小⒏咧刀ㄖ笛緅inxing定liang测定, 每个样本使用同一试剂盒重复测定 8 次,穤hi鸺扑悴煌ǘ妊綿e平jun值及 SD 值。(批内差: CV<10%;批jian差: CV<11%)

       正常保存条件xia觴ing谀诤凸xing冱span>2个月elisa 试剂盒回精密度检测结果

                    Intra-assay precision

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

16.68

14.22

70.25

62.36

369.75

327.88

SD

1.08

1.25

4.21

5.31

24.69

32.87

CV(%)

6.5

8.8

6.0

8.5

6.6

10

  

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

Sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

18.72

13.68

65.98

61.25

387.22

425.26

SD

1.45

1.52

4.83

5.18

28.49

36.87

CV%

7.7

11.1

7.3

8.5

7.3

8.7

瘦素受体(LEPR)试剂盒会出现de问题及解决ban法:

1. 加入反应终止ye后,mei有吸guang值或吸guang值偏低。

a.原因:wei加入酶biaojiwu。

解决ban法:请按照操作buzhoujinxing。

b.原因:试剂盒内容wuwei能充fen回。

解决ban法:que定试剂盒内容wu回温后再jinxing操作。

c.原因:室温太低。

解决ban法:若室温太低(<19),请于操作buzhou4,shi当延长温yu时jian。

d.原因:wei使用试剂盒de清洗ye清洗。

解决ban法: 请用试剂盒内所提gongde清洗ye清洗。

e.原因:试剂盒yi过觴ing谙蕖Ⅻ/span>

解决ban法:请geng换成仍在觴ing谙弈赿e试剂盒。

2. biao譲i呦咝圆患眩蚴瞧絰ing性不好。

a.原因:温yu位zhibiguang不簃ei蚴艿狡鞲蓃ao。

解决ban法: 请que认温yu位zhi既不透guang也不透feng(如抽屉内)

b.原因:操作时jian拖太久。

解决ban法:请在方法熟练后再jinxing操作。

c.原因:微孔jian相互污萰inⅫ/span>

解决ban法: 加样pin时,请小心勿溅出微孔外,以免造成其它微孔de污萰inⅫ/span>

d.原因:biao准pin或酶biaojiwu所加入deliang瞙ui粃hi。

解决ban法:请使用yi校正过de移ye枪,并que保其与吸蚮en甹ian有高度密he性。

e.原因:添加样pin或试剂de操作方法不正que。

解决ban法:加样pin或试剂时,吸头请勿接触微孔。

f.原因e窗骞谭⑸侍狳/span>(如管lu堵塞、洗完板后wei立刻jinxingxia一buzhou)

解决ban法:请随时监控洗板机洗板过程,洗完后立即jinxingxia一buzhou。

3. 吸guang值jun偏高(或线性不筯uan伏/span>)

a.原因:室温太高(>25)

解决ban法: 若无法降低室内温度,请shi当suo短buzhou4de温yu时jian。

b.原因:diwurongye受到污萰inⅫ/span>

解决ban法: 若发现diwurongyeyi呈现淡蓝色,请瞙ui偈褂谩Ⅻ/span>

c.原因:反应时jian超过太久。

解决ban法:请控zhi反应时jian。

d.原因:酶biaojiwu污染了盒内其它试剂。

解决ban法:使用过de吸头应立即丢弃,kebi免试剂jian相互污染,凡是试剂(特别是酶biaojiwu与diwurongye)接触过de容qi应立即清洗干净。(先以漂白水浸pao,再以清水冲洗干净,keque保无残留)

4. 阴性biao准pinde吸guang值低于阳性biao准pinde吸guang值。

a.原因:微孔中de试剂wei能充fen混he。

解决ban法: 试剂加完后,需轻敲pansi周使其充fen混hejun詑uⅫ/span>

b.原因e窗骞谭⑸侍狳/span>(2-f.)

解决ban法:请参考2-f.

c.原因:添加样pin或酶biaojiwudeliang瞙ui粃hi。

解决ban法: 请参考2-d.