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人V-Fos-FBJ骨肉瘤病du癌基因同yuanwu(FOS)试剂盒 da发888真人平台制备liu程

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da发888真人app名chen: 人V-Fos-FBJ骨肉瘤病du癌基因同yuanwu(FOS)试剂盒 da发888真人平台制备liu程
da发888真人app型号: FOS
da发888真人app展shang: ELISA试剂盒
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简单jie绍

人V-Fos-FBJ骨肉瘤病du癌基因同yuanwu(FOS)试剂盒 da发888真人平台制备liu程cai用双da发888真人平台紉ing腅LISAfa。用抗人FOSda发888真人平台baobei于酶标ban上,实验时样品或标准品中的人FOS与baobeida发888真人平台结合,you离的cheng分bei洗去。yi次jia入生wu素化的抗人FOSda发888真人平台和辣根过氧化wu酶标记的亲和素。抗人FOSda发888真人平台与结合zaibaobeida发888真人平台上的人FOS结合、生wu素与亲和素teyixing结合而形cheng**复合wu,you离的cheng分bei洗去。jia入显色底wu(TMB),TMBzai辣根过氧化wu酶的催化下呈现蓝色,jia终zhi液后变cheng黄色。用酶标仪zai450nm波长chuceOD值,人V-Fos-FBJ骨肉瘤病du癌基因同yuanwu(FOS)试剂盒浓du与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲xian计算出样品中人FOS的浓du。


人V-Fos-FBJ骨肉瘤病du癌基因同yuanwu(FOS)试剂盒 da发888真人平台制备liu程  的详蟜u樯埸/font>


人V-Fos-FBJ骨肉瘤病du癌基因同yuanwu(FOS)试剂盒 da发888真人平台制备liu程

shi用shuo明书

V-Fos-FBJ骨肉瘤病du癌基因同yuanwu(FOS)试剂盒基ben原li:

ben试剂盒cai用双da发888真人平台紉ing腅LISAfa。用抗人FOSda发888真人平台baobei于酶标ban上,实验时样品或标准品中的人FOS与baobeida发888真人平台结合,you离的cheng分bei洗去。yi次jia入生wu素化的抗人FOSda发888真人平台和辣根过氧化wu酶标记的亲和素。抗人FOSda发888真人平台与结合zaibaobeida发888真人平台上的人FOS结合、生wu素与亲和素teyixing结合而形cheng**复合wu,you离的cheng分bei洗去。jia入显色底wu(TMB),TMBzai辣根过氧化wu酶的催化下呈现蓝色,jia终zhi液后变cheng黄色。用酶标仪zai450nm波长chuceOD值,人FOS浓du与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲xian计算出样品中人FOS的浓du。

V-Fos-FBJ骨肉瘤病du癌基因同yuanwu(FOS)试剂盒描述:

英文名chen Human V-Fos FBJ Murine Osteosarcoma Viral Oncogene Homolog (FOS) ELISA Kit
中文名chen 人V-Fos-FBJ骨肉瘤病du癌基因同yuanwu(FOS)酶联**吸fuce定试剂盒
货号 E-EL-H0695c 种属 Human/人
规格 96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips)
检ce方fa 双da发888真人平台紉ing膄a
检cefan围 0.156~10ng/mL 灵mindu 0.094ng/mL

人V-Fos-FBJ骨肉瘤病du癌基因同yuanwu(FOS)试剂盒 da发888真人平台制备liu程组cheng:

中文名chen

英文名chen

规格

保存

  ELISA酶标ban(可拆卸)

  Micro ELISA  Plate(Dismountable)

  8×12 / 8×6*

4/-20 #

冻干标准品

Reference Standard

  2/1 *

4/-20 #

标准品&样品稀释液

Reference Standard & Sample Diluent

  1ping 20mL/12mL*

4

浓缩生wu素化da发888真人平台

Concentrated Biotinylated Detection Ab

  1 120μL/70μL*

4/-20 #

生wu素化da发888真人平台稀释液

Biotinytated Detection Ab Diluent

  1ping 10mL/6mL*

4

浓缩HRP胒u岷蟱u

Concentrated HRP Conjugate

  1 120μL/70μL*

4(biguang)

胒u岷蟱u稀释液

HRP Conjugate Diluent

  1ping 10mL/6mL*

4

浓缩洗涤液(25×

ConcentratedWashBuffer (25×)

  1ping 30mL/16mL*

4

底wu溶液(TMB

Substrate Reagent

  1ping 10mL/6mL*

4(biguang)

fan应终zhi液

Stop Solution

  1ping 10mL/6mL*

4

fengban覆膜

Plate Sealer

  5/3 *

 

da发888真人appshuo明书

Product  Description

  1 

 

质检报gao

Certificate of Analysis

  1 

 

te别shuo明
*: [96T/48T](打开baozhuang后qing及时检查所有wu品是否qiquan完整)
#: yi周内shi用可存于4℃,需长时间存放或多次shi用建yi存于-20.                                      

V-Fos-FBJ骨肉瘤病du癌基因同yuanwu(FOS)试剂盒检ceqian准备工zuo:

1. qing提qian20分钟从冰箱中取出试剂盒,平衡至室温。

2. 将浓缩洗涤液用双蒸水稀释(1:25)。未用完的放回4℃。从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶,属于正常现象,可用40℃水浴微jia热shi结晶完quan溶jie后再配制洗涤液(jia热温dubu要超过50℃,shi用时洗涤液应为室温)。dangrishi用。

3. 标准品10000×g离心1分钟,jia入标准品&样品稀释液1.0mL至冻干标准品中,旋jinguan盖,静置10分钟,上下颠倒数次,待qichong分溶jie后,用移液器将qi轻轻混匀(浓du为8000pg/mL)。然后根据需要进xing倍比稀释(zhu:bu要直接zaifan应孔中进xing倍比稀释)。建yi配制cheng以下浓du:an照稀释方fa图li 标准品&样品稀释液直接zuo为kong白孔0ng/mL。如配制5ng/mL标准品:取0.5mL10ng/mL的上述标准品jia入含有0.5mL标准品&样品稀释液的EPguan中,混匀即可,qi余浓duyi此类推。 

4. 生wu素化da发888真人平台工zuo液:实验qian计算dang次实验所需用量(以100μL/孔计),实际配制时应多配制100-200μL。shi用qian15分钟,以生wu素化da发888真人平台稀释液稀释浓缩生wu素化da发888真人平台(1:100)cheng工zuo浓du。dangrishi用。

5. 胒u岷蟱u工zuo液:实验qian计算dang次实验所需用量(以100μL/孔计),实际配制时应多配制100-200μL。shi用qian15分钟,以胒u岷蟱u稀释液稀释浓缩HRP胒u岷蟱u(1:100)cheng工zuo浓du。

dangrishi用。

V-Fos-FBJ骨肉瘤病du癌基因同yuanwu(FOS)试剂盒标准品稀释方fa图li:(以500μL/guan为li,ye可根据实际用量来稀释,如200μL/guan)

            

1. zai各孔中jia入标准品或样品各100μL 37℃孵育90分钟

2. jia入100μ生wu素化da发888真人平台工zuo液,37℃孵育60分钟

3. 洗涤3

4. jia入100μL胒u岷蟱u工zuo液, 37℃孵育30分钟

5. 洗涤5

6. jia入90μL底wu溶液, 37℃孵育15分钟左右

7. jia入50μL终zhi液,立即zai450nm波长chuce量OD

8. 结guo计算

yi、操zuo因素对ELISA结guo的ying响ELISA操zuobu骤复杂,操zuobudang将引起较da的wu差。以下叙述各个bu骤中的ying响因素。

1.jia样

2.温育

3.洗涤

4.显色

5.比色

二、灰区的she置通常情况下,ELISA定xing实验以“阳xing”和“阴xing”来报gao结guo,liangzhe间有yi条分界xianbeichen为“阳xingpan断值”(cut-off valueCO值),这是定xing**ce定结guo报gao的yi据。

三、标ben复查ELISA蕑hiぜ靋e过程复杂,ying响因素较多,即shi室内质控zai控,ye可能因孔间差yi而造cheng结guo的差yi,因此jiada复查力du是保证结guo准quexing的可靠方fa,比如对HBsAgHBeAgHCV-AbHIV-AbTP-Ab等xiang目的可疑、弱阳xing标ben及少见mo蔶iang募靋e结guo进xing复查。

四、结guopan断和报gao常用下列几种方fa表示结guo:

1.定xingce定

2.半定量ce定 结guoyiban以滴du表蔶inⅫ/span>

3.定量ce定 即用yi知量的标准品zuoyi系列稀释后进xingELISAce定,绘制标准曲xian,结guo以you良量或单wei表蔶inaiELISA定量检ce中每yi块fan应ban都必须绘制相应的标准曲xian。

zhu意事xiang:

仔细阅读shuo明书。

检查试剂盒标签上的觴ing凇H鏶uo超过觴ing冢琿ing勿shi用。

anshuo明书萬anㄋ惺约羜iquan(数量、体积)。

标ben制备要规fan,每份标ben体积要an2-3个复孔以上的量制备(贮存),jin量分zhuangzuo备份。duan期内无fa实验zhe,zhu意低温保存。

准备好所有实验e外所需wu品,(比如移液器,试guan,清洗器,酶标仪)。

anshuo明书将所用试剂平衡至室温,根据检ce标ben数量萬anㄋ枋约恋牧俊Ⅻ/span>

检查试剂盒内每种试剂的贮存条jian,保证所有试剂junan照试剂盒内shuo明书推荐的条jian存chu。

检查buwen定或zhe变质的试剂溶液(比如沉淀或变色)。觴ing┦约粒热绫曜计废∈鸵夯騴he检ce稀释液,可能zaishe计蔮en秃谐恋韜u。所有试剂zai祑en朊副阞an之qian,必需chong分混匀。而由于沉淀wu的texing,zaijia入酶标ban之qian,必需bu停搅ban。

保证chong分的孵育时间和温du。

切勿shi用bu同生产批号的试剂取代现有试剂或混合现有试剂。

zai混合或溶jie蛋白溶液时,bi免泡沫产生。

zai实验开始之qian,安排好实验liu程。

zai实验开始之qian,清洁工zuo台。

ruo有问题,应与我公司或代lishang的技术支持联系

V-Fos-FBJ骨肉瘤病du癌基因同yuanwu(FOS)试剂盒结guopan断:

1. 每个标准品的OD值减去kong白孔的OD值后zuo图,如she置复孔,则应取qi平jun值计算。以标准品的浓du为heng坐标,OD值为纵坐标,绘出标准曲xian。亦可以OD值为heng坐标,标准品的浓du为纵坐标,绘出标准曲xian。

2. 推荐shi用专业的曲xian制zuoruanjian,如curve expert 1.31.4,zairuanjian界mian既可根据样品OD值,由标准曲xian查出相应的浓du,乘以稀释倍数;亦可将样品的OD值代入标准曲xian的拟合方程式,计算出样品浓du,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓du。

3. ruo样品OD值高于标准曲xian上限,应shidang稀释后重ce,计算浓du时应乘以稀释倍数。 

V-Fos-FBJ骨肉瘤病du癌基因同yuanwu(FOS)试剂盒觴ing趙en定xing考察

ben试验以V-Fos-FBJ骨肉瘤病du癌基因同yuanwu(FOS)为li

1.  OD值:

正常保存条jian下觴ing谀诤统xing冱span>2个月所ceOD謉ang冉吸/span>

正常觴ing谀冱span>OD值: 3.2512.8452.126, 1.859, 1.463, 1.022, 0.710, 0.08

超过2个月觴ing冱/span>OD值:3.1.7, 2.643, 2.125, 1.796, 1.453, 0.876, 0.432, 0.07

2.回收率:分别于定值血清及血浆中jia入yi定量的V-Fos-FBJ骨肉瘤病du癌基因同yuanwu(FOS)标准品,重复ce定bing计算qi品jun值,回收率为ce定值与li论值的比率。

        正常保存条jian下觴ing谀诤凸xing冱span>2个月elisa 试剂盒回收率检ce结guo

Sample

Conditions

Recovery range(%)

Average(%)

Serum(n=6)

normal

88-106

95

After 12 month

80-100

87

EDTA plasma(n=6)

normal

88-106

97

After 12 month

78-98

87

3. xianxing:分别于定值血清及血浆中jia入yi定量的V-Fos-FBJ骨肉瘤病du癌基因同yuanwu(FOS)标准品,bing将标benan1:2,1:4,1:8稀释,xianxingfan围即为稀释后样ben中V-Fos-FBJ骨肉瘤病du癌基因同yuanwu(FOS)含量的ce定值与li论值的比率。

         正常保存条jian下觴ing谀诤凸xing冱span>2个月elisa 试剂盒回xianxing检ce结guo

Sample

Conditions

1:2

1:4

1:8

Serum(n=6)

normal

81-92%

85-90%

89-105%

After 12month

80-88%

82-87%

87-101%

EDTA plasma(n=6)

normal

93-104%

81-97%

91-96%

After 12month

82-95%

75-82%

74-90%

4.  精密du:以样品ce定值的变yi系数CV表蔶inⅫ/span>CV%=SD/meanx100

批内差:取同yi批次试剂盒对低值,中值和高值样ben进xing定量检ce,每份样bence定20次,分别计算bu同浓du样ben的平jun值和SD值。

批间差:选取 3 个bu同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样ben进xing定量ce定, 每个样benshi用同yi试剂盒重复ce定 8 次,分别计算bu同浓du样ben的平jun值及 SD 值。(批内差: CV<10%;批间差: CV<11%)

       正常保存条jian下觴ing谀诤凸xing冱span>2个月elisa 试剂盒回精密du检ce结guo

                    Intra-assay precision

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

16.68

14.22

70.25

62.36

369.75

327.88

SD

1.08

1.25

4.21

5.31

24.69

32.87

CV(%)

6.5

8.8

6.0

8.5

6.6

10

  

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

Sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

18.72

13.68

65.98

61.25

387.22

425.26

SD

1.45

1.52

4.83

5.18

28.49

36.87

CV%

7.7

11.1

7.3

8.5

7.3

8.7

V-Fos-FBJ骨肉瘤病du癌基因同yuanwu(FOS)试剂盒hui出现的问题及jiejue办fa:

1. jia入fan应终zhi液后,没有吸guang值或吸guang值偏低。

a.原因:未jia入酶标记wu。

jiejue办fa:qingan照操zuobu骤进xing。

b.原因:试剂盒内容wu未能chong分回。

jiejue办fa:萬anㄊ约梁心谌輜u回温后再进xing操zuo。

c.原因:室温太低。

jiejue办fa:ruo室温太低(<19),qing于操zuobu骤4,shidang延长温育时间。

d.原因:未shi用试剂盒的清洗液清洗。

jiejue办fa: qing用试剂盒内所提供的清洗液清洗。

e.原因:试剂盒yi过觴ing谙蕖Ⅻ/span>

jiejue办fa:qing更换cheng仍zai觴ing谙弈诘氖约梁小Ⅻ/span>

2. 标准曲xianxianxingbujia,或是平xingxingbu好。

a.原因:温育wei置biguangbu好或受到气liu干扰。

jiejue办fa: qingque认温育wei置既bu透guangyebu透风(如抽屉内)

b.原因:操zuo时间拖太久。

jiejue办fa:qingzai方fa熟练后再进xing操zuo。

c.原因:微孔间相互污萰inⅫ/span>

jiejue办fa: jia样品时,qing小心勿jian出微孔外,以免造chengqi它微孔的污萰inⅫ/span>

d.原因:标准品或酶标记wu所jia入的量buyi致。

jiejue办fa:qingshi用yi校正过的移液枪,bingque保qi与吸头之间有高du密合xing。

e.原因:添jia样品或试剂的操zuo方fabu正que。

jiejue办fa:jia样品或试剂时,吸头qing勿接触微孔。

f.原因:洗ban过程发生问题(如guan耭an氯⑾赐阞an后未立刻进xing下yibu骤)

jiejue办fa:qingsui时监控洗ban机洗ban过程,洗完后立即进xing下yibu骤。

3. 吸guang值jun偏高(或xianxingbu够陡)

a.原因:室温太高(>25)

jiejue办fa: ruo无fajiang低室内温du,qingshidang缩duanbu骤4的温育时间。

b.原因:底wu溶液受到污萰inⅫ/span>

jiejue办fa: ruo发现底wu溶液yi呈现淡蓝色,qingbu要再shi用。

c.原因:fan应时间超过太久。

jiejue办fa:qing控制fan应时间。

d.原因:酶标记wu污染了盒内qi它试剂。

jiejue办fa:shi用过的吸头应立即ding弃,可bi免试剂间相互污染,凡是试剂(te别是酶标记wu与底wu溶液)接触过的容器应立即清洗干净。(先以piao白水浸泡,再以清水chong洗干净,可que保无残留)

4. 阴xing标准品的吸guang值低于阳xing标准品的吸guang值。

a.原因:微孔中的试剂未能chong分混合。

jiejue办fa: 试剂jia完后,需轻敲盘四周shiqichong分混合jun匀。

b.原因:洗ban过程发生问题(2-f.)

jiejue办fa:qing参考2-f.

c.原因:添jia样品或酶标记wu的量buyi致。

jiejue办fa: qing参考2-d.

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