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renzhong瘤坏si因子配体超家zu成员14(TNFSF14)试剂盒

ru果您duigai大fa888zhenrenappganxing趣的话,ke以
大fa888zhenrenapp名称: renzhong瘤坏si因子配体超家zu成员14(TNFSF14)试剂盒
大fa888zhenrenapp型号: TNFSF14
大fa888zhenrenapp展商: ELISA试剂盒
大fa888zhenrenapp文dang: 无xiang关文dang

简单jie绍

真钱21点


renzhong瘤坏si因子配体超家zu成员14(TNFSF14)试剂盒  的详蟜u樯埸/font>


renzhong瘤坏si因子配体超家zu成员14(TNFSF14)试剂盒

使用说明书

renzhong瘤坏si因子配体超家zu成员14(TNFSF14)试剂盒基本原理:

本试剂盒采用双大fa888zhenren平台夹心ELISA法。用kangrenTNFSF14大fa888zhenren平台包beiyumei标板上,实yan时样品或标准品zhong的renTNFSF14与包bei大fa888zhenren平台结合,游离的成分beixi去。yi次加入sheng物suhua的kangrenTNFSF14大fa888zhenren平台he辣根过氧hua物mei标记的亲hesu。kangrenTNFSF14大fa888zhenren平台与结合在包bei大fa888zhenren平台上的renTNFSF14结合、sheng物su与亲hesu特异性结合er形成**复合物,游离的成分beixi去。加入显se底物(TMB),TMB在辣根过氧hua物mei的催huaxia呈现蓝se,加zhong止液后变成黄se。用mei标仪在450nm波长处测OD值,renTNFSF14nong度与OD450值之jian呈正比,tong过hui制标准曲xian计suanchu样品zhongrenTNFSF14的nong秖uⅫ/span>

renzhong瘤坏si因子配体超家zu成员14(TNFSF14)试剂盒描述:

ying文名称 Human TNFSF14 (Tumor Necrosis Factor Ligand Superfamily, Member 14)ELISA Kit
zhong文名称 renzhong瘤坏si因子配体超家zu成员14(TNFSF14)mei联**吸fu测定试剂盒
货号 X-EL-H0095c zhongshu Human/ren
gui格 96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips)
检测方法 双大fa888zhenren平台夹心法
检测范围 31.25~2000pg/mL 灵敏度 18.75pg/mL

试剂盒组成:

zhong文名称

ying文名称

gui格

保存

  ELISAmei标板(ke拆xie)

  Micro ELISA  Plate(Dismountable)

  8×12 / 8×6*

4/-20 #

冻干标准品

Reference Standard

  2/1 *

4/-20 #

标准品&样品稀shi液

Reference Standard & Sample Diluent

  1 20mL/12mL*

4

nong缩sheng物suhua大fa888zhenren平台

Concentrated Biotinylated Detection Ab

  1 120μL/70μL*

4/-20 #

sheng物suhua大fa888zhenren平台稀shi液

Biotinytated Detection Ab Diluent

  1 10mL/6mL*

4

nong缩HRP胒u岷衔铧/span>

Concentrated HRP Conjugate

  1 120μL/70μL*

4(避guang)

胒u岷衔锵hi液

HRP Conjugate Diluent

  1 10mL/6mL*

4

nong缩xidi液(25×

ConcentratedWashBuffer (25×)

  1 30mL/16mL*

4

底物溶液(TMB

Substrate Reagent

  1 10mL/6mL*

4(避guang)

穋onghong止液

Stop Solution

  1 10mL/6mL*

4

封板覆膜

Plate Sealer

  5/3 zhang*

 

大fa888zhenrenapp说明书

Product  Description

  1 fen

 

质检报告

Certificate of Analysis

  1 fen

 

特别说明
*: [96T/48T](打开包装后请及时检查所有物品是否齐全完zheng)
#: 一zhou内使用ke存yu4℃,需长时jian存放或多次使用建yi存yu-20.                                      

renzhong瘤坏si因子配体超家zu成员14(TNFSF14)试剂盒检测前准备工作:

1. 请提前20穤hong觕ong冰箱zhongquchu试剂盒,平衡至室温。

2. 将nong缩xidi液用双蒸shui稀shi(1:25)。蝐ong猛甑姆舎ui4℃。cong冰箱zhongquchu的nong缩xidi液ke能有结晶,shuyu正常现象,ke用40℃shui浴微加re使结晶完全溶解后再配制xidi液(加re温度不yao超过50℃,使用时xidi液应为室温)。当日使用。

3. 标准品yu10000×g离心1穤hong樱尤氡曜计饵/span>&样品稀shi液1.0mL至冻干标准品zhong,旋紧管盖,静置10穤hong樱蟲ia颠倒数次,daiqi充分溶解后,用移液器将qi轻轻混匀(nong度为8000pg/mL)。然后根据需yao进行倍比稀shi(注:不yao直接在穋ong讂hong进行倍比稀shi)。建yi配制成以xianong度:按照稀shi方法tu例 标准品&样品稀shi液直接作为空白孔0ng/mL。ru配制5ng/mL标准品:qu0.5mL10ng/mL的上述标准品加入含有0.5mL标准品&样品稀shi液的EP管zhong,混匀即ke,qi余nong度yi磗i嗤啤Ⅻ/span> 

4. sheng物suhua大fa888zhenren平台工作液:实yan前计suan当次实yan所需用量(以100μL/孔计),实际配制时应多配制100-200μL。使用前15穤hong樱詓heng物suhua大fa888zhenren平台稀shi液稀shinong缩sheng物suhua大fa888zhenren平台(1:100)成工作nong秖u5比帐褂谩Ⅻ/span>

5. 胒u岷衔锕ぷ饕海菏祔an前计suan当次实yan所需用量(以100μL/孔计),实际配制时应多配制100-200μL。使用前15穤hong樱悦fu岷衔锵hi液稀shinong缩HRP胒u岷衔铧/span>(1:100)成工作nong秖uⅫ/span>

当日使用。

renzhong瘤坏si因子配体超家zu成员14(TNFSF14)试剂盒标准品稀shi方法tu例:(以500μL/管为例,yeke根据实际用量来稀shi,ru200μL/管)

            

1. 在ge孔zhong加入标准品或样品ge100μL 37℃fu育90穤hong尹/span>

2. 加入100μsheng物suhua大fa888zhenren平台工作液,37℃fu育60穤hong尹/span>

3. xidi3

4. 加入100μL胒u岷衔锕ぷ饕海?/span> 37℃fu育30穤hong尹/span>

5. xidi5

6. 加入90μL底物溶液, 37℃fu育15穤hong觶uo右

7. 加入50μLzhong止液,立即在450nm波长处测量OD

8. 结果计suan

一、操作因suduiELISA结果的影响ELISA操作buzhou复杂,操作不当将yin起絰i蟮奈骳ha。以xia叙述ge个buzhouzhong的影响因su。

1.加样

2.温育

3.xidi

4.显se

5.比se

二、灰区的she置tong常情kuangxia,ELISA定性实yan以“阳性”he“阴性”来报告结果,两zhejian有一条分jiexianbei称为“阳性pan断值”(cut-off valueCO值),这是定性**测定结果报告的yi据。

三、标本复查ELISAshou工检测过程复杂,影响因su较多,即使室内质控在控,yeke能因孔jiancha异er造成结果的cha异,因此加大复查力度是保证结果准确性的kekao方法,比ruduiHBsAgHBeAgHCV-AbHIV-AbTP-Ab等项目的ke疑、ruo阳性标本及shao见模shi的检测结果进行复查。

四、结果pan断he报告常用xia列几zhong方法表示结果:

1.定性测定

2.半定量测定 结果一般以滴度表示。

3.定量测定 糲ong脃izhi量的标准品作一系列稀shi后进行ELISA测定,hui制标准曲xian,结果以优良量或单位表示。在ELISA定量检测zhong每一块穋ongΠ宥急豿uhui制xiang应的标准曲xian。

注意事项:

仔细阅du说明书。

检查试剂盒标签上的有效期。ru果超过有效期,请wu使用。

按说明书确定所有试剂齐全(数量、体ji)。

标本制备yaogui范,每fen标本体jiyao按2-3个复孔以上的量制备(贮存),尽量穤hong皕uo备fen。短期内无法实yanzhe,注意低温保存。

准备好所有实yan额外所需物品,(比ru移液器,试管,清xi器,mei标仪)。

按说明书将所用试剂平衡至室温,根据检测标本数量确定所需试剂的量。

检查试剂盒内每zhong试剂的贮存条件,保证所有试剂均按照试剂盒内说明书推荐的条件存chu。

检查不wen定或zhe变质的试剂溶液(比ru沉dian或变se)。有些试糽i萺u标准品稀shi液或zhe检测稀shi液,ke能在she计时就含有沉dian物。所有试剂在祑en雖ei标板之前,必需充分混詑ur由yu沉dian物的特性,在加入mei标板之前,必需不停搅拌。

保证充分的fu育时jianhe温秖uⅫ/span>

切wu使用不tongshengchanpi号的试剂qu代现有试剂或混合现有试剂。

在混合或溶解蛋白溶液时,避免泡沫chansheng。

在实yan开始之前,癱ai藕檬祔an流程。

在实yan开始之前,清洁工作台。

若有问题,应与wo公司或代理商的技术支持联系

renzhong瘤坏si因子配体超家zu成员14(TNFSF14)试剂盒结果pan断:

1. 每个标准品的OD值jian去空白孔的OD值后作tu,rushe謒ei纯祝蛴uqi平均值计suan。以标准品的nong度为hengzuo标,OD值为纵zuo标,huichu标准曲xian。亦ke以OD值为hengzuo标,标准品的nong度为纵zuo标,huichu标准曲xian。

2. 推荐使用zhuan襠ang那鷛ian制作软件,rucurve expert 1.31.4,在软件jiemian既ke根据样品OD值,由标准曲xian查chuxiang应的nong度,乘以稀shi倍数;亦ke将样品的OD值代入标准曲xian的拟合方程shi,计suanchu样品nong度,再乘以稀shi倍数,即为样品的实际nong秖uⅫ/span>

3. 若样品OD值高yu标准曲xian上限,应适当稀shi后重测,计suannong度时应乘以稀shi倍数。 

renzhong瘤坏si因子配体超家zu成员14(TNFSF14)试剂盒有效期wen定性考察

本试yan以zhong瘤坏si因子配体超家zu成员14(TNFSF14)为例

1.  OD值:

正常保存条件xia有效期内he超过有效期2个月所测OD值比较

正常有效期内OD值: 3.2512.8452.126, 1.859, 1.463, 1.022, 0.710, 0.08

超过2个月有效期OD值:3.1.7, 2.643, 2.125, 1.796, 1.453, 0.876, 0.432, 0.07

2.hui收率:分别yu定值血清及血浆zhong加入襤uan康命/span>zhong瘤坏si因子配体超家zu成员14(TNFSF14)标准品,重复测定bing计suanqi品均值,hui收率为测定謉i肜韑un謉ang谋嚷省Ⅻ/span>

        正常保存条件xia有效期内he过有效期2个月elisa 试剂盒hui收率检测结果

Sample

Conditions

Recovery range(%)

Average(%)

Serum(n=6)

normal

88-106

95

After 12 month

80-100

87

EDTA plasma(n=6)

normal

88-106

97

After 12 month

78-98

87

3. xian性:分别yu定值血清及血浆zhong加入襤uan康命/span>zhong瘤坏si因子配体超家zu成员14(TNFSF14)标准品,bing将标本按1:2,1:4,1:8稀shi,xian性范围即为稀shi后样本zhongzhong瘤坏si因子配体超家zu成员14(TNFSF14)含量的测定謉i肜韑un謉ang谋嚷省Ⅻ/span>

         正常保存条件xia有效期内he过有效期2个月elisa 试剂盒huixian性检测结果

Sample

Conditions

1:2

1:4

1:8

Serum(n=6)

normal

81-92%

85-90%

89-105%

After 12month

80-88%

82-87%

87-101%

EDTA plasma(n=6)

normal

93-104%

81-97%

91-96%

After 12month

82-95%

75-82%

74-90%

4.  精密度:以样品测定謉ang谋湟煜凳?span>CV表示。CV%=SD/meanx100

pi内cha:qutong一pi次试剂盒dui低值,zhong值he高值样本进衳ie考觳猓縡en样本测定20次,分别计suan不tongnong度样本的平均值heSD值。

pijiancha:选qu 3 个不tongpi次的试剂盒分别dui低、zhong、高值定值样本进衳ie坎舛ǎ 每个样本使用tong一试剂盒重复测定 8 次,分别计suan不tongnong度样本的平均值及 SD 值。(pi内cha: CV<10%;pijiancha: CV<11%)

       正常保存条件xia有效期内he过有效期2个月elisa 试剂盒hui精密度检测结果

                    Intra-assay precision

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

16.68

14.22

70.25

62.36

369.75

327.88

SD

1.08

1.25

4.21

5.31

24.69

32.87

CV(%)

6.5

8.8

6.0

8.5

6.6

10

  

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

Sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

18.72

13.68

65.98

61.25

387.22

425.26

SD

1.45

1.52

4.83

5.18

28.49

36.87

CV%

7.7

11.1

7.3

8.5

7.3

8.7

renzhong瘤坏si因子配体超家zu成员14(TNFSF14)试剂盒会chu现的问题及解决办法:

1. 加入穋onghong止液后,没有吸guang值或吸guang值偏低。

a.原因:wei加入mei标记物。

解决办法:请按照操作buzhou进行。

b.原因:试剂盒内容物wei能充分hui。

解决办法:确定试剂盒内容物hui温后再进行操作。

c.原因:室温太低。

解决办法:若室温太低(<19),请yu操作buzhou4,适当延长温育时jian。

d.原因:wei使用试剂盒的清xi液清xi。

解决办法: 请用试剂盒内所提供的清xi液清xi。

e.原因:试剂盒yi过有效期限。

解决办法:请更huan成仍在有效期限内的试剂盒。

2. 标准曲xianxian性不佳,或是平行性不好。

a.原因:温育位置避guang不好或受到气流干扰。

解决办法: 请确认温育位置既不touguangye不tou风(ru抽ti内)

b.原因:操作时jiantuo太久。

解决办法:请在方法熟练后再进行操作。

c.原因:微孔jianxiang互污染。

解决办法: 加样品时,请小心wujianchu微孔外,以免造成qi它微孔的污染。

d.原因:标准品或mei标记物所加入的量不一致。

解决办法:请使用yi校正过的移液qiang,bing确保qi与吸头之jian有高度密合性。

e.原因:添加样品或试剂的操作方法不正确。

解决办法:加样品或试剂时,吸头请wu接触微孔。

f.原因:xi板过程fasheng问题(ru管lu堵塞、xi完板后wei立ke进行xia一buzhou)

解决办法:请随时监控xi板机xi板过程,xi完后立即进行xia一buzhou。

3. 吸guang值均偏高(或xian性不够dou)

a.原因:室温太高(>25)

解决办法: 若无法絛ang褪夷谖露龋胧实彼醵蘠uzhou4的温育时jian。

b.原因:底物溶液受到污染。

解决办法: 若fa现底物溶液yi呈现淡蓝se,请不yao再使用。

c.原因:穋ongκ眏ian超过太久。

解决办法:请控制穋ongκ眏ian。

d.原因:mei标记物污染了盒内qi它试剂。

解决办法:使用过的吸头应立即ding弃,ke避免试剂jianxiang互污染,凡是试剂(特别是mei标记物与底物溶液)接触过的容器应立即清xi干净。(先以漂白shui浸泡,再以清shui冲xi干净,ke确保无残留)

4. 阴性标准品的吸guang謉ang蛓u阳性标准品的吸guang值。

a.原因:微孔zhong的试剂wei能充分混合。

解决办法: 试剂加完后,需轻敲盘四zhou使qi充分混合均詑uⅫ/span>

b.原因:xi板过程fasheng问题(tong2-f.)

解决办法:请参考2-f.

c.原因:添加样品或mei标记物的量不一致。

解决办法: 请参考2-d.

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