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人原xian蛋白1(FBN1)试剂盒

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大fa888真人app名称: 人原xian蛋白1(FBN1)试剂盒
大fa888真人app型号: FBN1
大fa888真人app展商: ELISA试剂盒
大fa888真人appwen档: 无相关wen档

简单介绍

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人原xian蛋白1(FBN1)试剂盒  的详细介绍


人原xian蛋白1(FBN1)试剂盒

shi用说明书

人原xian蛋白1(FBN1)试剂盒基ben原li:

ben试剂盒采用shuang大fa888真人平taijia心ELISA法。用抗人FBN1大fa888真人平tai包被于酶标板上,实验时样pin或标准pin中的人FBN1与包被大fa888真人平tai结he,游离的成fen被洗去。依次jia入生wusu化的抗人FBN1大fa888真人平tai和辣根过氧化wu酶标记的亲和su。抗人FBN1大fa888真人平tai与结he在包被大fa888真人平tai上的人FBN1结he、生wusu与亲和sute异性结he而形成**fuhewu,游离的成fen被洗去。jia入显色底wu(TMB),TMB在辣根过氧化wu酶的cui化下呈现蓝色,jia终止ye后变成huang色。用酶标仪在450nm波chang处ceODzhi,人FBN1浓度与OD450zhizhijian硈hou龋ü齢ui制标准曲线计算出样pin中人FBN1的浓度。

人原xian蛋白1(FBN1)试剂盒描shu:

英wen名称 Human FBN1 (Fibrillin 1) ELISA Kit
中wen名称 人原xian蛋白1(FBN1)酶联**吸附ce定试剂盒
货号 X-EL-H2266c 种属 Human/人
规格 96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips)
jiancefang法 shuang大fa888真人平taijia心法
jiance范围 0.313~20ng/mL 灵min度 0.188ng/mL

试剂盒zu成:

中wen名称

英wen名称

规格

保存

  ELISA酶标板(可拆xie)

  Micro ELISA  Plate(Dismountable)

  8×12 / 8×6*

4/-20 #

dong干标准pin

Reference Standard

  2/1 *

4/-20 #

标准pin&样pin稀shiye

Reference Standard & Sample Diluent

  1 20mL/12mL*

4

浓缩生wusu化大fa888真人平tai

Concentrated Biotinylated Detection Ab

  1 120μL/70μL*

4/-20 #

生wusu化大fa888真人平tai稀shiye

Biotinytated Detection Ab Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓缩HRP酶结hewu

Concentrated HRP Conjugate

  1 120μL/70μL*

4(bi光)

酶结hewu稀shiye

HRP Conjugate Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓缩洗祔ou海?/span>25×

ConcentratedWashBuffer (25×)

  1 30mL/16mL*

4

底wu溶ye(TMB

Substrate Reagent

  1 10mL/6mL*

4(bi光)

反应终止ye

Stop Solution

  1 10mL/6mL*

4

feng板覆膜

Plate Sealer

  5/3 zhang*

 

大fa888真人app说明书

Product  Description

  1 

 

质jian报gao

Certificate of Analysis

  1 

 

tebie说明
*: [96T/48T](da开包zhuang后请及时jian查suo有wupin是否qi全完整)
#: 
一周内shi用可存于4℃,需chang时jian存放或多次shi用建yi存于-20.                                      

人原xian蛋白1(FBN1)试剂盒jiance前准备工作:

1. 请ti前20fen钟从冰箱中取出试剂盒,平衡至室温。

2. 将浓缩洗祔ou河胹huang蒸水稀shi(1:25)。未用完的放回4℃。从冰箱中取出的浓缩洗祔ou嚎赡苡薪峋В粲趜heng常现象,可用40℃水yuweijia热shi结晶完全溶解后zai配制洗祔ou海╦ia热温度瞙ui?/span>50℃,shi用时洗祔ou河ξ椅拢5比誷hi用。

3. 标准pin10000×g离心1fen钟,jia入标准pin&样pin稀shiye1.0mL至dong干标准pin中,xuan紧管盖,静置10fen钟,上下颠倒数次,dai其充fen溶解后,用移ye器将其qingqing混匀(浓度为8000pg/mL)。然后根ju需要进行bei比稀shi(注:瞙ui苯釉诜从字薪衎ei比稀shi)。建yi配制成以下浓度:按照稀shifang法图例 标准pin&样pin稀shiye直接作为空白孔0ng/mL。如配制5ng/mL标准pin:取0.5mL10ng/mL的上shu标准pinjia入含有0.5mL标准pin&样pin稀shiye的EP管中,混匀即可,其余浓度依cilei推。 

4. 生wusu化大fa888真人平tai工作ye:实验前计算当次实验suo需用liang(以100μL/孔计),实际配制时应多配制100-200μL。shi用前15fen钟,以生wusu化大fa888真人平tai稀shi襤ehi浓缩生wusu化大fa888真人平tai(1:100)成工作浓度。当日shi用。

5. 酶结hewu工作ye:实验前计算当次实验suo需用liang(以100μL/孔计),实际配制时应多配制100-200μL。shi用前15fen钟,以酶结hewu稀shi襤ehi浓缩HRP酶结hewu(1:100)成工作浓度。

当日shi用。

人原xian蛋白1(FBN1)试剂盒标准pin稀shifang法图例:(以500μL/管为例,ye可根ju实际用liang来稀shi,如200μL/管)

            

1. 在各孔中jia入标准pin或样pin各100μL 37℃fu育90fen钟

2. jia入100μ生wusu化大fa888真人平tai工作ye,37℃fu育60fen钟

3. 洗涤3

4. jia入100μL酶结hewu工作ye, 37℃fu育30fen钟

5. 洗涤5

6. jia入90μL底wu溶ye, 37℃fu育15fen钟左you

7. jia入50μL终止ye,li即在450nm波chang处celiangODzhi

8. 结果计算

一、操作yinsuduiELISA结果的ying响ELISA操作步骤fu杂,操作不当将引起较大的误cha。以下叙shu各个步骤中的ying响yinsu。

1.jia样

2.温育

3.洗涤

4.显色

5.比色

二、huiqu的she置通常情况下,ELISA定性实验襶u把粜yu焙汀皔in衴u崩幢╣ao结果,liangzhejian有一条fen界线被称为“阳性舩ie蟴hi”(cut-off valueCOzhi),zhe是定性**ce定结果报gao的依ju。

三、标benfu查ELISA手工jiance过程fu杂,ying响yinsu较多,即shi室内质控在控,ye可能yin孔jiancha异而造成结果的cha异,yincijia大fu查力度是保证结果譲i沸缘目煽縡ang法,比如duiHBsAgHBeAgHCV-AbHIV-AbTP-Ab等项目的可疑、弱阳性标ben及shaojian模式的jiance结果进行fu查。

四、结果舩ie虾捅╣ao常用下列几种fang法biao示结果:

1.定性ce定

2.半定liangce定 结果一ban以滴度biao示。

3.定liangce定 即用已知liang的标准pin作一系列稀shi后进行ELISAce定,hui制标准曲线,结果以优良liang或单位biao示。在ELISA定liangjiance中每一块反应板都必须hui制相应的标准曲线。

注意事项:

仔细阅读说明书。

jian查试剂盒标签上的有效期。如果超过有效期,请wushi用。

癱i得魇槿范╯uo有试剂qi全(数liang、体积)。

标ben制备要规范,每份标ben体积要按2-3个fu孔以上的liang制备(贮存),尽liangfenzhuang做备份。短期内无法实验zhe,注意低温保存。

准备好suo有实验额外suo需wupin,(比如移ye器,试管,清洗器,酶标仪)。

癱i得魇榻玸uo用试剂平衡至室温,根jujiance标ben数liang确定suo需试剂的liang。

jian查试剂盒内每种试剂的贮存条件,保证suo有试剂均按照试剂盒内说明书推荐的条件存储。

jian查不稳定或zhe变质的试剂溶ye(比如沉淀或变色)。有些试糽i热绫曜紁in稀shiye或zhejiance稀shiye,可能在she计蔮en秃谐恋韜u。suo有试剂在滴入酶标板zhi前,必需充fen混匀。而由于沉淀wu的te性,在jia入酶标板zhi前,必需不停搅ban。

保证充穤hi膄u育时jian和温度。

切wushi用不同生chan批号的试剂取代现有试剂或混he现有试剂。

在混he或溶解蛋白溶ye时,bi免pao沫chan生。

在实验开始zhi前,安排好实验流程。

在实验开始zhi前,清洁工作tai。

若有问题,应与我公司或代li商的技术支持联系

人原xian蛋白1(FBN1)试剂盒结果舩ie吸/span>:

1. 每个标准pin的ODzhi减去空白孔的ODzhi后作图,如she置fu孔,则应取其平均zhi计算。以标准pin的浓度为横坐标,ODzhi为纵坐标,hui出标准曲线。亦可以ODzhi为横坐标,标准pin的浓度为纵坐标,hui出标准曲线。

2. 推荐shi用专业的曲线制作软件,如curve expert 1.31.4,在软件界面ji可根ju样pinODzhi,由标准曲线查出相应的浓度,乘以稀shibei数ui嗫山鵳in的ODzhi代入标准曲线的拟hefang程式,计算出样pin浓度,zai乘以稀shibei数,即为样pin的实际浓度。

3. 若样pinODzhigao于标准曲线上限,应适当稀shi后重ce,计算浓度时应乘以稀shibei数。 

原xian蛋白1(FBN1)试剂盒有效期稳定性考察

ben试验以原xian蛋白1(FBN1)为例

1.        ODzhi:

zheng常保存条件下有效期内和超过有效期2个yuesuoceODzhi比较

zheng常有效期内ODzhi: 3.2512.8452.126, 1.859, 1.463, 1.022, 0.710, 0.08

超过2个yue有效期ODzhi:3.1.7, 2.643, 2.125, 1.796, 1.453, 0.876, 0.432, 0.07

2.回shou率:fenbie于定zhi血清及血浆中jia入襤uan╨iang的原xian蛋白1(FBN1)标准pin,重fuce定并计算其pin均zhi,回shou率为ce定zhi与li论zhi的比率。

        zheng常保存条件下有效期内和过有效期2个yueelisa 试剂盒回shou率jiance结果

Sample

Conditions

Recovery range(%)

Average(%)

Serum(n=6)

normal

88-106

95

After 12 month

80-100

87

EDTA plasma(n=6)

normal

88-106

97

After 12 month

78-98

87

 

3.       线性:fenbie于定zhi血清及血浆中jia入襤uan╨iang的原xian蛋白1(FBN1)标准pin,并将标ben按1:2,1:4,1:8稀shi,线性范围即为稀shi后样ben中原xian蛋白1(FBN1)含liang的ce定zhi与li论zhi的比率。

         zheng常保存条件下有效期内和过有效期2个yueelisa 试剂盒回线性jiance结果

Sample

Conditions

1:2

1:4

1:8

Serum(n=6)

normal

81-92%

85-90%

89-105%

After 12month

80-88%

82-87%

87-101%

EDTA plasma(n=6)

normal

93-104%

81-97%

91-96%

After 12month

82-95%

75-82%

74-90%

 

4.        精密度:以样pince定zhi的变异系数CVbiao示。CV%=SD/meanx100

批内cha:取同一批次试剂簒ie缘蛕hi,中zhi和gaozhi样ben进衳ie╨iangjiance,每份样bence定20次,fenbie计算不同浓度样ben的平均zhi和SDzhi。

批jiancha:选取 3 个不同批次的试剂盒fenbiedui低、中、gaozhi定zhi样ben进衳ie╨iangce定, 每个样benshi用同一试剂盒重fuce定 8 次,fenbie计算不同浓度样ben的平均zhi及 SD zhi。(批内cha: CV<10%;批jiancha: CV<11%)

       zheng常保存条件下有效期内和过有效期2个yueelisa 试剂盒回精密度jiance结果

                    Intra-assay precision

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

16.68

14.22

70.25

62.36

369.75

327.88

SD

1.08

1.25

4.21

5.31

24.69

32.87

CV(%)

6.5

8.8

6.0

8.5

6.6

10

 

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

Sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

18.72

13.68

65.98

61.25

387.22

425.26

SD

1.45

1.52

4.83

5.18

28.49

36.87

CV%

7.7

11.1

7.3

8.5

7.3

8.7

人原xian蛋白1(FBN1)试剂盒hui出蟴hi奈侍饧敖鈐ueban法:

1. jia入反应终止ye后,mei有吸光zhi或吸光zhi偏低。

a.原yin:未jia入酶标记wu。

解jueban法:请按照操作步骤进行。

b.原yin:试剂盒内容wu未能充fen回。

解jueban法:确定试剂盒内容wu回温后zai进行操作。

c.原yin:室温tai低。

解jueban法:若室温tai低(<19),请于操作步骤4,适当延chang温育时jian。

d.原yin:未shi用试剂盒的清洗ye清洗。

解jueban法: 请用试剂盒内suoti供的清洗ye清洗。

e.原yin:试剂盒已过有效期限。

解jueban法:请更huan成仍在有效期限内的试剂盒。

2. 标准曲线线性不佳,或是平行性不好。

a.原yin:温育位置bi光不簃ei蚴艿狡鞲扇拧Ⅻ/span>

解jueban法: 请确认温育位置ji不透光ye不透feng(如抽屉内)

b.原yin:操作时jiantuotai久。

解jueban法:请在fang法熟lian后zai进行操作。

c.原yin:wei孔jian相互污染。

解jueban法: jia样pin时,请小心wu溅出wei孔外,以免造成其它wei孔的污染。

d.原yin:标准pin或酶标记wusuojia入的liang瞙ui恢隆Ⅻ/span>

解jueban法:请shi用已校zheng过的移ye枪,并确保其与吸蚮en甹ian有gao度密he衴uⅫ/span>

e.原yin:tianjia样pin或试剂的操作fang法不zheng确。

解jueban法:jia样pin或试剂时,吸头请wu接触wei孔。

f.原yine窗骞蘤a生问题(如管路堵sai、洗完板后未li刻进行下一步骤)

解jueban法:请随时监控洗板机洗板过程,洗完后li即进行下一步骤。

3. 吸光zhi均偏gao(或线性不筯uan伏/span>)

a.原yin:室温taigao(>25)

解jueban法: 若无法降低室内温度,请适当缩短步骤4的温育时jian。

b.原yin:底wu溶ye受到污染。

解jueban法: 若fa蟴hi譿u溶ye已呈蟴hi渡氩hui獄aishi用。

c.原yin:反应时jian超过tai久。

解jueban法:请控謕in从κ眏ian。

d.原yin:酶标记wu污染了盒内其它试剂。

解jueban法:shi用过的吸头应li即丢qi,可bi免试剂jian相互污染,凡是试剂(tebie是酶标记wu与底wu溶ye)接触过的容器应li即清洗干净。(先以漂白水浸pao,zai以清水冲洗干净,可确保无残留)

4. yin性标准pin的吸光zhi低于阳性标准pin的吸光zhi。

a.原yin:wei孔中的试剂未能充fen混he。

解jueban法: 试剂jia完后,需qing敲盘四周shi其充fen混he均匀。

b.原yine窗骞蘤a生问题(2-f.)

解jueban法:请参考2-f.

c.原yin:tianjia样pin或酶标记wu的liang瞙ui恢隆Ⅻ/span>

解jueban法: 请参考2-d.

 

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