大发888zhenrenappziliao

ren原纤dan白3(FBN3)试剂盒

如果nindui该大发888zhenrenapp感兴趣de话,可以
大发888zhenrenapp名称: ren原纤dan白3(FBN3)试剂盒
大发888zhenrenappxing号: FBN3
大发888zhenrenapp展商: ELISA试剂盒
大发888zhenrenapp文dang: 无相关文dang

简单介shao

滚球体育


ren原纤dan白3(FBN3)试剂盒  de详xi介shao


ren原纤dan白3(FBN3)试剂盒

使用说ming书

ren原纤dan白3(FBN3)试剂盒基本原理:

本试剂盒cai用双大发888zhenren平台jia心ELISAfa。用抗renFBN3大发888zhenren平台包被yu酶标板上,实验时yang品或标准品中derenFBN3与包被大发888zhenren平台结合,you离de成分被洗去。依次加入生物素化祄u箁enFBN3大发888zhenren平台和la根过氧化物酶标记de亲和素。抗renFBN3大发888zhenren平台与结合在包被大发888zhenren平台上derenFBN3结合、生物素与亲和素特异性结合而形成**复合物,you离de成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在la根过氧化物酶de催化下呈现蓝色,加终止ye后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,renFBN3浓度与OD450值之间呈正bi,tong过绘制标准曲xian计算出yang品中renFBN3de浓度。

ren原纤dan白3(FBN3)试剂盒描述:

英文名称 Human FBN3 (Fibrillin 3) ELISA Kit
中文名称 ren原纤dan白3(FBN3)酶联**吸附测定试剂盒
货号 X-EL-H2268c 种属 Human/ren
规ge 96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips)
检测fangfa 双大发888zhenren平台jia心fa
检测fan围 0.313~20ng/mL ling敏度 0.188ng/mL

试剂盒组成:

中文名称

英文名称

规ge

保存

  ELISA酶标板(可拆卸)

  Micro ELISA  Plate(Dismountable)

  8×12 / 8×6*

4/-20 #

冻干标准品

Reference Standard

  2/1 *

4/-20 #

标准品&yang品稀释ye

Reference Standard & Sample Diluent

  1 20mL/12mL*

4

浓缩生物素化大发888zhenren平台

Concentrated Biotinylated Detection Ab

  1 120μL/70μL*

4/-20 #

生物素化大发888zhenren平台稀释ye

Biotinytated Detection Ab Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓缩HRP酶结合物

Concentrated HRP Conjugate

  1 120μL/70μL*

4(避光)

酶结合物稀释ye

HRP Conjugate Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓缩洗涤ye(25×

ConcentratedWashBuffer (25×)

  1 30mL/16mL*

4

底物溶ye(TMB

Substrate Reagent

  1 10mL/6mL*

4(避光)

反应终止ye

Stop Solution

  1 10mL/6mL*

4

封板覆膜

Plate Sealer

  5/3 zhang*

 

大发888zhenrenapp说ming书

Product  Description

  1 

 

质检报告

Certificate of Analysis

  1 

 

特别说ming
*: [96T/48T](打开包装后qing及时检chasuo有物品是否qi全完整)
#: 
一zhouna使用可存yu4℃,xu长时间存放或多次使用建议存yu-20.                                      

ren原纤dan白3(FBN3)试剂盒检测前准bei工作:

1. qing提前20分钟从bing箱中取出试剂盒,平衡至shi温。

2. 将浓缩洗涤ye用双zheng水稀释(1:25)。未用完de放回4℃。从bing箱中取出de浓缩洗涤ye可能有结晶,属yu正chang现象,可用40℃水浴微加热使结晶完全溶解后再配制洗涤ye(加热温度不yaochao过50℃,使用时洗涤ye应为shi温)。礲i帐褂谩Ⅻ/span>

3. 标准品yu10000×g离心1分钟,加入标准品&yang品稀释ye1.0mL至冻干标准品中,旋紧管gai,静置10分钟,上下diandao数次,待其充分溶解后,用移yeqi将其轻轻混匀(浓度为8000pg/mL)。然后根juxuyaojin行beibi稀释(注:不yao直接在反应孔中jin行beibi稀释)。建议配制成以下浓度:按照稀释fangfa图例 标准品&yang品稀释ye直接作为空白孔0ng/mL。如配制5ng/mL标准品:取0.5mL10ng/mLde上述标准品加入han有0.5mL标准品&yang品稀释yedeEP管中,混匀即可,其余浓度依ci类推。 

4. 生物素化大发888zhenren平台工作ye:实验前计算当次实验suoxu用量(以100μL/孔计),实际配制时应多配制100-200μL。使觤en?/span>15分钟,以生物素化大发888zhenren平台稀释ye稀释浓缩生物素化大发888zhenren平台(1:100)成工作浓度。礲i帐褂谩Ⅻ/span>

5. 酶结合物工作ye:实验前计算当次实验suoxu用量(以100μL/孔计),实际配制时应多配制100-200μL。使觤en?/span>15分钟,以酶结合物稀释ye稀释浓缩HRP酶结合物(1:100)成工作浓度。

礲i帐褂谩Ⅻ/span>

ren原纤dan白3(FBN3)试剂盒标准品稀释fangfa图例:(以500μL/管为例,也可根ju实际用量来稀释,如200μL/管)

            

1. 在各孔中加入标准品或yang品各100μL 37℃fu育90分钟

2. 加入100μ生物素化大发888zhenren平台工作ye,37℃fu育60分钟

3. 洗涤3

4. 加入100μL酶结合物工作ye, 37℃fu育30分钟

5. 洗涤5

6. 加入90μL底物溶ye, 37℃fu育15分钟左右

7. 加入50μL终止ye,立即在450nm波长处测量OD

8. 结果计算

一、cao作因素duiELISA结果deying响ELISAcao作步zhou复杂,cao作瞙uai苯鸾洗骴e误差。以下叙述各个步zhou中deying响因素。

1.加yang

2.温育

3.洗涤

4.显色

5.bi色

er、灰区de设置tongchangqing况下,ELISA定性实验以“阳性”和“yin性”来报告结果,两zhe间有一条分界xian被称为“阳性判断值”(cut-off valueCO值),这是定性**测定结果报告de依ju。

san、标本复chaELISA手工检测过程复杂,ying响因素较多,即使shina质控在控,也可能因孔间差异而造成结果de差异,因ci加大复cha力度是保zheng结果准que性祄u煽縡angfa,bi如duiHBsAgHBeAgHCV-AbHIV-AbTP-Ab等项mu祄u梢伞⑷跹粜员瓯炯皊hao见mo蔶iang募觳饨峁鹙in行复cha。

四、结果判断和报告chang用下列几謟hi絝a表示结果:

1.定性测定

2.半定量测定 结果一般以滴度表示。

3.定量测定 即用yi知量de标准品作一系列稀释后jin行ELISA测定,绘制标准曲xian,结果以you良量或单位表示。在ELISA定量检测中每一块反应板dubixu绘制相应de标准曲xian。

注意shi项:

仔xi阅读说ming书。

检cha试剂盒标签上de有效期。如果chao过有效期,qing勿使用。

癱i祄ing书que定suo有试剂qi全(数量、体积)。

标本制beiyao规fan,每份标本体积yao按2-3个复孔以上de量制bei(贮存),尽量穤hong皕uobei份。短期na无fa实验zhe,注意低温保存。

准bei好suo有实验额外suoxu物品,(bi如移yeqi,试管,清洗qi,酶标仪)。

癱i祄ing书将suo用试剂平衡至shi温,根ju检测标本数量que定suoxu试剂de量。

检cha试剂盒na每种试剂de贮存条件,保zhengsuo有试剂均按照试剂盒na说ming书推荐de条件存chu。

检cha不稳定或zhe变质de试剂溶ye(bi如沉淀或变色)。有些试剂,bi如标准品稀释ye或zhe检测稀释ye,可能在设计时jiuhan有沉淀物。suo有试剂在滴入酶标板之前,bixu充分混匀。而由yu沉淀物de特性,在加入酶标板之前,bixu不停搅ban。

保zheng充分defu育时间和温度。

切勿使用不同生产批号de试剂取代现有试剂或混合现有试剂。

在混合或溶解dan白溶ye时,避mianpao沫产生。

在实验开始之前,安排好实验流程。

在实验开始之前,清洁工作台。

若有问题,应与我gong司或代理商de技术支持联系

ren原纤dan白3(FBN3)试剂盒结果判断:

1. 每个标准品deOD值jian去空白孔deOD值后作图,如设置复孔,则应取其平均值计算。以标准品de浓度为横zuo标,OD值为纵zuo标,绘出标准曲xian。yi可以OD值为横zuo标,标准品de浓度为纵zuo标,绘出标准曲xian。

2. 推荐使用zhuan襠ang那鷛ian制作软件,如curve expert 1.31.4,在软件界面既可根juyang品OD值,由标准曲xiancha出相应de浓度,cheng以稀释bei数;yi可将yang品deOD值代入标准曲xiande拟合fang程式,计算出yang品浓度,再cheng以稀释bei数,即为yang品de实际浓度。

3. 若yang品OD值高yu标准曲xian上限,应适当稀释后重测,计算浓度时应cheng以稀释bei数。 

ren原纤dan白3(FBN3)试剂盒有效期稳定性考察

本试验以原纤dan白3(FBN3)为例

1.        OD值:

正chang保存条件下有效期na和chao过有效期2个月suo测OD值bi较

正chang有效期naOD值: 3.2512.8452.126, 1.859, 1.463, 1.022, 0.710, 0.08

chao过2个月有效期OD值:3.1.7, 2.643, 2.125, 1.796, 1.453, 0.876, 0.432, 0.07

2.回收率:分别yu定值血清及血浆中加入一定量de原纤dan白3(FBN3)标准品,重复测定并计算其品均值,回收率为测定值与理论謉ang腷i率。

        正chang保存条件下有效期na和过有效期2个月elisa 试剂盒回收率检测结果

Sample

Conditions

Recovery range(%)

Average(%)

Serum(n=6)

normal

88-106

95

After 12 month

80-100

87

EDTA plasma(n=6)

normal

88-106

97

After 12 month

78-98

87

 

3.       xian性:分别yu定值血清及血浆中加入一定量de原纤dan白3(FBN3)标准品,并将标本按1:2,1:4,1:8稀释,xian性fan围即为稀释后yang本中原纤dan白3(FBN3)han量de测定值与理论謉ang腷i率。

         正chang保存条件下有效期na和过有效期2个月elisa 试剂盒回xian性检测结果

Sample

Conditions

1:2

1:4

1:8

Serum(n=6)

normal

81-92%

85-90%

89-105%

After 12month

80-88%

82-87%

87-101%

EDTA plasma(n=6)

normal

93-104%

81-97%

91-96%

After 12month

82-95%

75-82%

74-90%

 

4.        精密度:以yang苀an舛ㄖdang谋湟煜凳?/span>CV表示。CV%=SD/meanx100

批na差:取同一批次试剂盒dui低值,中值和高值yang本jin行定量检测,每份yang本测定20次,分别计算不同浓度yang本de平均值和SD值。

批间差:选取 3 个不同批次de试剂盒分别dui低、中、高值定值yang本jin行定量测定, 每个yang本使用同一试剂盒重复测定 8 次,分别计算不同浓度yang本de平均值及 SD 值。(批na差: CV<10%;批间差: CV<11%)

       正chang保存条件下有效期na和过有效期2个月elisa 试剂盒回精密度检测结果

                    Intra-assay precision

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

16.68

14.22

70.25

62.36

369.75

327.88

SD

1.08

1.25

4.21

5.31

24.69

32.87

CV(%)

6.5

8.8

6.0

8.5

6.6

10

 

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

Sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

18.72

13.68

65.98

61.25

387.22

425.26

SD

1.45

1.52

4.83

5.18

28.49

36.87

CV%

7.7

11.1

7.3

8.5

7.3

8.7

ren原纤dan白3(FBN3)试剂盒会出现de问题及解决办fa:

1. 加入反应终止ye后,没有吸光值或吸光值偏低。

a.原因:未加入酶标记物。

解决办fa:qing按照cao作步zhoujin行。

b.原因:试剂盒na容物未能充分回。

解决办fa:que定试剂盒na容物回温后再jin行cao作。

c.原因:shi温太低。

解决办fa:若shi温太低(<19),qingyucao作步zhou4,适当延长温育时间。

d.原因:未使用试剂盒de清洗ye清洗。

解决办fa: qing用试剂盒nasuo提供de清洗ye清洗。

e.原因:试剂盒yi过有效期限。

解决办fa:qing更换成reng在有效期限nade试剂盒。

2. 标准曲xianxian性不佳,或是平行性不好。

a.原因:温育位置避光不好或shou到气流干扰。

解决办fa: qingque认温育位置既不透光也不透风(如chou屉na)

b.原因:cao作时间拖太久。

解决办fa:qing在fangfa熟练后再jin行cao作。

c.原因:微孔间相互污染。

解决办fa: 加yang品时,qing小心勿溅出微孔外,以mian造成其它微孔de污染。

d.原因:标准品或酶标记物suo加入de量不一致。

解决办fa:qing使用yi校正过de移ye枪,并que保其与吸头之间有高度密合性。

e.原因:tian加yang品或试剂decao作fangfa不正que。

解决办fa:加yang品或试剂时,吸头qing勿接触微孔。

f.原因:洗板过程发生问题(如管耭an氯⑾赐臧搴笪戳⒖蘪in行下一步zhou)

解决办fa:qing随时监控洗板机洗板过程,洗完后立即jin行下一步zhou。

3. 吸光值均偏高(或xian性不够陡)

a.原因:shi温太高(>25)

解决办fa: 若无fajiang低shina温度,qing适当缩短步zhou4de温育时间。

b.原因:底物溶yeshou到污染。

解决办fa: 若发现底物溶yeyi呈现淡蓝色,qing不yao再使用。

c.原因:反应时间chao过太久。

解决办fa:qing控制反应时间。

d.原因:酶标记物污染了盒na其它试剂。

解决办fa:使用过de吸头应立即丢qi,可避mian试剂间相互污染,fan是试剂(特别蕅iao副昙俏镉氲孜锶躽e)接触过de容qi应立即清洗干净。(先以漂白水浸pao,再以清水chong洗干净,可que保无残留)

4. yin性标准品de吸光謉ang蛓u阳性标准品de吸光值。

a.原因:微孔中de试剂未能充分混合。

解决办fa: 试剂加完后,xu轻qiao盘四zhou使其充分混合均匀。

b.原因:洗板过程发生问题(2-f.)

解决办fa:qingcan考2-f.

c.原因:tian加yang品或酶标记物de量不一致。

解决办fa: qingcan考2-d.

 

大发888zhenrenapp留言
标题
联系ren
联蟙ang缁?/span>
na容
验zheng码
点ji换一zhang
注:1.可以使用kuai捷键Alt+S或Ctrl+Enter发送信息!
2.如有biyao,qingnin留下ninde详xi联系fang式!