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人MAX二聚化蛋白1(mxd1)试剂盒

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da发888真人app名chen: 人MAX二聚化蛋白1(mxd1)试剂盒
da发888真人app型hao: mxd1
da发888真人app展shang: ELISA试剂盒
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简单jie绍

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人MAX二聚化蛋白1(mxd1)试剂盒  的详蟜u樯埸/font>


人MAX二聚化蛋白1(mxd1)试剂盒

使用shuo明书

人MAX二聚化蛋白1(mxd1)试剂盒ji本原理:

本试剂盒采用双da发888真人平台夹心ELISA法。用抗人mxd1da发888真人平台包被于酶biao板上,实验时yangpinhuobiaozhunpin中的人mxd1与包被da发888真人平台结合,游离的成分被洗去。依次加入生wusu化的抗人mxd1da发888真人平台和辣根过氧化wu酶biao记的亲和su。抗人mxd1da发888真人平台与结簒ian诎籨a发888真人平台上的人mxd1结合、生wusu与亲和sute异性结合er形成**复合wu,游离的成分被洗去。加入xian色底wu(TMB),TMB在辣根过氧化wu酶的催化下呈现蓝色,加终止ye后变成黄色。用酶biao仪在450nm波长处测OD值,人mxd1浓度与OD450值之间呈zheng比,通过绘制biaozhun曲xian计suanchuyangpin中人mxd1的浓度。

人MAX二聚化蛋白1(mxd1)试剂盒描述:

英文名chen Human MXD1 (MAX Dimerization Protein 1) ELISA Kit
中文名chen 人MAX二聚化蛋白1(mxd1)酶联**吸fu测定试剂盒
货hao X-EL-H0896c 种属 Human/人
规格 96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips)
检测fang法 双da发888真人平台夹心法
检测范wei 0~ 灵敏度 0

试剂盒组成:

中文名chen

英文名chen

规格

保存

  ELISA酶biao板(可chai卸)

  Micro ELISA  Plate(Dismountable)

  8×12 / 8×6*

4/-20 #

冻ganbiaozhunpin

Reference Standard

  2/1 *

4/-20 #

biaozhunpin&yangpin稀释ye

Reference Standard & Sample Diluent

  1ping 20mL/12mL*

4

浓缩生wusu化da发888真人平台

Concentrated Biotinylated Detection Ab

  1 120μL/70μL*

4/-20 #

生wusu化da发888真人平台稀释ye

Biotinytated Detection Ab Diluent

  1ping 10mL/6mL*

4

浓缩HRP胒u岷蟱u

Concentrated HRP Conjugate

  1 120μL/70μL*

4(bi光)

胒u岷蟱u稀释ye

HRP Conjugate Diluent

  1ping 10mL/6mL*

4

浓缩洗涤ye(25×

ConcentratedWashBuffer (25×)

  1ping 30mL/16mL*

4

底wu溶ye(TMB

Substrate Reagent

  1ping 10mL/6mL*

4(bi光)

反应终止ye

Stop Solution

  1ping 10mL/6mL*

4

封板覆膜

Plate Sealer

  5/3 *

 

da发888真人appshuo明书

Product  Description

  1 

 

质检报告

Certificate of Analysis

  1 

 

te别shuo明
*: [96T/48T](打开包装后qing及时检查所有wupin是否齐全完整)
#: 
一周na使用可存于4℃,需长时间存放huo多次使用建议存于-20.                                      

人MAX二聚化蛋白1(mxd1)试剂盒检测前zhun备工zuo:

1. qing提前20分钟从冰箱中取chu试剂盒,平衡zhi室wen。

2. 将浓缩洗涤ye用双蒸shui稀释(1:25)。wei用完的放回4℃。从冰箱中取chu的浓缩洗涤ye可能有结晶,属于zhengchang现象,可用40℃shui浴wei加re使结晶完全溶解后再配制洗涤ye(加rewen度不要超过50℃,使用时洗涤ye应wei室wen)。当日使用。

3. biaozhunpin10000×g离心1分钟,加入biaozhunpin&yangpin稀释ye1.0mLzhi冻ganbiaozhunpin中,旋紧管盖,静置10分钟,上下颠daoshu次,待其充分溶解后,用yiyeqi将其qingqinghun匀(浓度wei8000pg/mL)。ran后根据需要进行倍眗en∈停ㄗⅲ翰灰眏ie在反应孔中进行倍眗en∈停=ㄒ榕渲瞥梢韵屡ǘ龋喊凑障∈蚮ang法图例 biaozhunpin&yangpin稀释ye直jiezuowei空白孔0ng/mL。如配制5ng/mLbiaozhunpin:取0.5mL10ng/mL的上述biaozhunpin加入含有0.5mLbiaozhunpin&yangpin稀释ye的EP管中,hun匀即可,其余浓度依此类tui。 

4. 生wusu化da发888真人平台工zuoye:实验前计suan当次实验所需用liang(以100μL/縵hun疲导逝渲剖庇Χ嗯渲劈/span>100-200μL。使用前15分钟,以生wusu化da发888真人平台稀释ye稀释浓缩生wusu化da发888真人平台(1:100)成工zuo浓度。当日使用。

5. 胒u岷蟱u工zuoye:实验前计suan当次实验所需用liang(以100μL/縵hun疲导逝渲剖庇Χ嗯渲劈/span>100-200μL。使用前15分钟,以胒u岷蟱u稀释ye稀释浓缩HRP胒u岷蟱u(1:100)成工zuo浓度。

当日使用。

人MAX二聚化蛋白1(mxd1)试剂盒biaozhunpin稀释fang法图例:(以500μL/管wei例,也可根据实际用liang来稀释,如200μL/管)

            

1. 在各孔中加入biaozhunpinhuoyangpin各100μL 37℃孵育90分钟

2. 加入100μ生wusu化da发888真人平台工zuoye,37℃孵育60分钟

3. 洗涤3

4. 加入100μL胒u岷蟱u工zuoye, 37℃孵育30分钟

5. 洗涤5

6. 加入90μL底wu溶ye, 37℃孵育15分钟左右

7. 加入50μL终止ye,li即在450nm波长处测liangOD

8. 结果计suan

一、caozuo因suduiELISA结果的影响ELISAcaozuo步骤复杂,caozuo不当将引起较da的误差。以下叙述各个步骤中的影响因su。

1.加yang

2.wen育

3.洗涤

4.xian色

5.比色

二、灰qu的设置通chang情况下,ELISA定性实验以“阳性”和“阴性”来报告结果,两者间有一条分界xian被chenwei“阳性判断值”(cut-off valueCO值),这是定性**测定结果报告的依据。

三、biao本复查ELISAshou工检测过cheng复杂,影响因su较多,即使室na质控在控,也可能因縵hun洳钜靍r造成结果的差异,因此加da复查力度是保zheng结果zhunque性的可靠fang法,眗e鏳uiHBsAgHBeAgHCV-AbHIV-AbTP-Ab祌en钅康目梢伞⑷跹粜詁iao本及shao见模式的检测结果进行复查。

四、结果判断和报告chang用下lie几种fang法表示结果:

1.定性测定

2.半定liang测定 结果一ban以滴度表示。

3.定liang测定 即用已知liang的biaozhunpinzuo一系lie稀释后进行ELISA测定,绘制biaozhun曲xian,结果以优良lianghuo单位表示。在ELISA定liang检测中每一kuai反应板都bi须绘制相应的biaozhun曲xian。

注意事项:

仔细yue读shuo明书。

检查试剂盒biaoqian上的有效qi。如果超过有效qi,qing勿使用。

按shuo明书que定所有试剂齐全(shuliang、体积)。

biao本制备要规范,每份biao本体积要按2-3个复孔以上的liang制备(zhu存),尽liang穤hong白霰阜荨6蘱ina无法实验者,注意diwen保存。

zhun备好所有实验额wai所需wupin,(眗e鐈iyeqi,试管,qing洗qi,酶biao仪)。

按shuo明书将所用试剂平衡zhi室wen,根据检测biao本shuliangque定所需试剂的liang。

检查试剂盒na每种试剂的zhu存条件,保zheng所有试剂均按照试剂盒nashuo明书tuijian的条件存chu。

检查不稳定huo者变质的试剂溶ye(眗e绯羋ianhuo变色)。有些试剂,眗e鏱iaozhunpin稀释yehuo者检测稀释ye,可能在设计时就含有沉dianwu。所有试剂在滴入酶biao板之前,bi需充分hun匀。er由于沉dianwu的te性,在加入酶biao板之前,bi需不停搅拌。

保zheng充分的孵育时间和wen度。

切勿使用不同生产批hao的试剂取dai现有试剂huohun合现有试剂。

在hun合huo溶解蛋白溶ye时,bi免泡沫产生。

在实验开始之前,安排好实验流cheng。

在实验开始之前,qing洁工zuo台。

若有问题,应与我公司huodai理shang的技术支硓hi袋/span>

人MAX二聚化蛋白1(mxd1)试剂盒结果判断:

1. 每个biaozhunpin的OD值jian去空白孔的OD值后zuo图,如设置复孔,则应取其平均值计suan。以biaozhunpin的浓度weiheng坐biao,OD值wei纵坐biao,绘chubiaozhun曲xian。亦可以OD值weiheng坐biao,biaozhunpin的浓度wei纵坐biao,绘chubiaozhun曲xian。

2. tuijian使用专ye的曲xian制zuo软件,如curve expert 1.3huo1.4,在软件界面既可根据yangpinOD值,由biaozhun曲xian查chu相应的浓度,cheng以稀释倍shu;亦可将yangpin的OD值dai入biaozhun曲xian的拟合fangcheng式,计suanchuyangpin浓度,再cheng以稀释倍shu,即weiyangpin的实际浓度。

3. 若yangpinOD值高于biaozhun曲xian上xian,应适当稀释后重测,计suan浓度时应cheng以稀释倍shu。 

MAX二聚化蛋白1(mxd1)试剂盒有效qi稳定性考察

本试验以MAX二聚化蛋白1(mxd1)wei例

1.        OD值:

zhengchang保存条件下有效qina和超过有效qi2个月所测OD值比较

zhengchang有效qinaOD值: 3.2512.8452.126, 1.859, 1.463, 1.022, 0.710, 0.08

超过2个月有效qiOD值:3.1.7, 2.643, 2.125, 1.796, 1.453, 0.876, 0.432, 0.07

2.回收率:分别于定值血qing及血浆中加入襤uan╨iang的MAX二聚化蛋白1(mxd1)biaozhunpin,重复测定并计suan其pin均值,回收率wei测定值与理论值的比率。

        zhengchang保存条件下有效qina和过有效qi2个月elisa 试剂盒回收率检测结果

Sample

Conditions

Recovery range(%)

Average(%)

Serum(n=6)

normal

88-106

95

After 12 month

80-100

87

EDTA plasma(n=6)

normal

88-106

97

After 12 month

78-98

87

 

3.       xian性:分别于定值血qing及血浆中加入襤uan╨iang的MAX二聚化蛋白1(mxd1)biaozhunpin,并将biao本按1:2,1:4,1:8稀释,xian性范wei即wei稀释后yang本中MAX二聚化蛋白1(mxd1)含liang的测定值与理论值的比率。

         zhengchang保存条件下有效qina和过有效qi2个月elisa 试剂盒回xian性检测结果

Sample

Conditions

1:2

1:4

1:8

Serum(n=6)

normal

81-92%

85-90%

89-105%

After 12month

80-88%

82-87%

87-101%

EDTA plasma(n=6)

normal

93-104%

81-97%

91-96%

After 12month

82-95%

75-82%

74-90%

 

4.        精mi度:以yangpin测定值的变异系shuCV表示。CV%=SD/meanx100

批na差:取同一批次试剂盒duidi值,中值簍ou咧祔ang本进行定liang检测,每份yang本测定20次,分别计suan不同浓度yang本的平均值和SD值。

批间差:选取 3 个不同批次的试剂盒分别duidi、中、高值定值yang本进行定liang测定, 每个yang本使用同一试剂盒重复测定 8 次,分别计suan不同浓度yang本的平均值及 SD 值。(批na差: CV<10%;批间差: CV<11%)

       zhengchang保存条件下有效qina和过有效qi2个月elisa 试剂盒回精mi度检测结果

                    Intra-assay precision

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

16.68

14.22

70.25

62.36

369.75

327.88

SD

1.08

1.25

4.21

5.31

24.69

32.87

CV(%)

6.5

8.8

6.0

8.5

6.6

10

 

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

Sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

18.72

13.68

65.98

61.25

387.22

425.26

SD

1.45

1.52

4.83

5.18

28.49

36.87

CV%

7.7

11.1

7.3

8.5

7.3

8.7

人MAX二聚化蛋白1(mxd1)试剂盒会chu现的问题及解决办法:

1. 加入反应终止ye后,没有吸光值huo吸光值偏di。

a.原因:wei加入酶biao记wu。

解决办法:qing按照caozuo步骤进行。

b.原因:试剂盒na容wuwei能充分回。

解决办法:que定试剂盒na容wu回wen后再进行caozuo。

c.原因:室wen太di。

解决办法:若室wen太di(<19),qing于caozuo步骤4,适当延长wen育时间。

d.原因:wei使用试剂盒的qing洗yeqing洗。

解决办法: qing用试剂盒na所提供的qing洗yeqing洗。

e.原因:试剂盒已过有效qixian。

解决办法:qinggenghuan成仍在有效qixianna的试剂盒。

2. biaozhun曲xianxian性不佳,huo是平行性不好。

a.原因:wen育位置bi光不好huo受到气流gan扰。

解决办法: qingquerenwen育位置既不tou光也不tou风(如抽屉na)

b.原因:caozuo时间拖太jiu。

解决办法:qing在fang法shu练后再进行caozuo。

c.原因:wei縵hun湎嗷ノ廴尽Ⅻ/span>

解决办法: 加yangpin时,qing小心勿溅chuwei孔wai,以免造成其它wei孔的污染。

d.原因:biaozhunpinhuo酶biao记wu所加入的liang不一致。

解决办法:qing使用已校zheng过的yiye枪,并que保其与吸头之间有高度mi合性。

e.原因:添加yangpinhuo试剂的caozuofang法不zhengque。

解决办法:加yangpinhuo试剂时,吸头qing勿jie触wei孔。

f.原因:洗板过cheng发生问题(如管lu堵塞、洗完板后weili刻进行下一步骤)

解决办法:qing随时jian控洗板机洗板过cheng,洗完后li即进行下一步骤。

3. 吸光值均偏高(huoxian性不gou陡)

a.原因:室wen太高(>25)

解决办法: 若无法降di室nawen度,qing适当缩短步骤4的wen育时间。

b.原因:底wu溶ye受到污染。

解决办法: 若发现底wu溶ye已呈现dan蓝色,qing不要再使用。

c.原因:反应时间超过太jiu。

解决办法:qing控謕in从κ奔洹Ⅻ/span>

d.原因:酶biao记wu污染了盒na其它试剂。

解决办法:使用过的吸头应li即丢qi,可bi免试剂间相互污染,凡是试剂(te别是酶biao记wu与底wu溶ye)jie触过的容qi应li即qing洗gan净。(先以漂白shuijin泡,再以qingshui冲洗gan净,可que保无残留)

4. 阴性biaozhunpin的吸光值di于阳性biaozhunpin的吸光值。

a.原因:wei孔中的试剂wei能充分hun合。

解决办法: 试剂加完后,需qing敲盘四周使其充分hun合均匀。

b.原因:洗板过cheng发生问题(2-f.)

解决办法:qing参考2-f.

c.原因:添加yangpinhuo酶biao记wu的liang不一致。

解决办法: qing参考2-d.

 

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