大发888真人app资料

人血管jinzhang素转hua酶 (ACE)试剂盒

如果您dui该大发888真人appgan兴趣的hua,可yi
大发888真人app名称: 人血管jinzhang素转hua酶 (ACE)试剂盒
大发888真人appxing号: ACE
大发888真人app展商: ELISA试剂盒
大发888真人app文档: 无相关文档

简单介绍

12博体育下载


人血管jinzhang素转hua酶 (ACE)试剂盒  的详细介绍


人血管jinzhang素转hua酶 (ACE)试剂盒

shiyongshuo明shu

人血管jinzhang素转hua酶 (ACE)试剂盒jiben原理:

ben试剂盒采yongshuang大发888真人ping台jia心ELISA法。yong抗人ACE大发888真人ping台包被于酶biao板上,实yan时样pin或biao准pin中的人ACE与包被大发888真人ping台结合,游离的成分被xi去。依ci加入生物素hua祄u谷薃CE大发888真人ping台和辣gen过氧hua物酶biao记的亲和素。抗人ACE大发888真人ping台与结合zai包被大发888真人ping台上的人ACE结合、生物素与亲和素te异性结合而形成**复合物,游离的成分被xi去。加入显色底物(TMB),TMBzai辣gen过氧hua物酶的催hua下呈现蓝色,加终zhi液后bian成huang色。yong酶biao仪zai450nm波长处测ODzhi,人ACE浓度与OD450zhizhi间硈hou龋瑃ong过hui制biao准曲xian计算出样pin中人ACE的浓度。

人血管jinzhang素转hua酶 (ACE)试剂盒miao述:

英文名称 Human ACE (Angiotensin I Converting Enzyme) ELISA Kit
中文名称 人血管jinzhang素转hua酶 (ACE)酶lian**吸附测定试剂盒
货号 X-EL-H0002c 种属 Human/人
规格 96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips)
检测方法 shuang大发888真人ping台jia心法
检测范围 0.781~50ng/mL lingmin度 0.469ng/mL

试剂盒组成:

中文名称

英文名称

规格

保cun

  ELISA酶biao板(可拆卸)

  Micro ELISA  Plate(Dismountable)

  8×12 / 8×6*

4/-20 #

冻干biao准pin

Reference Standard

  2/1 *

4/-20 #

biao准pin&样pin稀释液

Reference Standard & Sample Diluent

  1ping 20mL/12mL*

4

浓缩生物素hua大发888真人ping台

Concentrated Biotinylated Detection Ab

  1 120μL/70μL*

4/-20 #

生物素hua大发888真人ping台稀释液

Biotinytated Detection Ab Diluent

  1ping 10mL/6mL*

4

浓缩HRP酶结合物

Concentrated HRP Conjugate

  1 120μL/70μL*

4(避光)

酶结合物稀释液

HRP Conjugate Diluent

  1ping 10mL/6mL*

4

浓缩xi涤液(25×

ConcentratedWashBuffer (25×)

  1ping 30mL/16mL*

4

底物rong液(TMB

Substrate Reagent

  1ping 10mL/6mL*

4(避光)

反应终zhi液

Stop Solution

  1ping 10mL/6mL*

4

封板竎ai|/span>

Plate Sealer

  5/3 zhang*

 

大发888真人appshuo明shu

Product  Description

  1 

 

质检报告

Certificate of Analysis

  1 

 

tebieshuo明
*: [96T/48T](打开包装后请及时检查所有物pinshi否齐全完整)
#: 
一周内shiyong可cun于4℃,需长时间cunfang或duocishiyongjianyicun于-20.                                      

人血管jinzhang素转hua酶 (ACE)试剂盒检测qian准备gongzuo:

1. 请提qian20分钟从冰箱中取出试剂盒,ping衡至室温。

2. 将浓缩xi涤液yongshuang蒸水稀释(1:25)。未yong完的fang回4℃。从冰箱中取出的浓缩xi涤液可能有结晶,属于zheng常现xiang,可yong40℃水浴微加热shi结晶完全rong解后再配制xi涤液(加热温度不要超过50℃,shiyong时xi涤液应为室温)。dangrishiyong。

3. biao准pin10000×g离心1分钟,加入biao准pin&样pin稀释液1.0mL至冻干biao准pin中,旋jin管盖,静置10分钟,上下dian倒shuci,待其充分rong解后,yong移液器将其轻轻混匀(浓度为8000pg/mL)。ran后genju需要进行倍比稀释(zhu:不要直接zai反应孔中进行倍比稀释)。jianyi配制成yi下浓度:按zhao稀释方法tu例 biao准pin&样pin稀释液直接zuo为空白孔0ng/mL。如配制5ng/mLbiao准pin:取0.5mL10ng/mL的上述biao准pin加入含有0.5mLbiao准pin&样pin稀释液的EP管中,混匀ji可,其余浓度依此类推。 

4. 生物素hua大发888真人ping台gongzuo液:实yanqian计算dangci实yan所需yong量(yi100μL/孔计),实际配制时应duo配制100-200μL。shi觤en?/span>15分钟,yi生物素hua大发888真人ping台稀释液稀释浓缩生物素hua大发888真人ping台(1:100)成gongzuo浓度。dangrishiyong。

5. 酶结合物gongzuo液:实yanqian计算dangci实yan所需yong量(yi100μL/孔计),实际配制时应duo配制100-200μL。shi觤en?/span>15分钟,yi酶结合物稀释液稀释浓缩HRP酶结合物(1:100)成gongzuo浓度。

dangrishiyong。

人血管jinzhang素转hua酶 (ACE)试剂盒biao准pin稀释方法tu例:(yi500μL/管为例,也可genju实际yong量来稀释,如200μL/管)

            

1. zai各孔中加入biao准pin或样pin各100μL 37℃fu育90分钟

2. 加入100μ生物素hua大发888真人ping台gongzuo液,37℃fu育60分钟

3. xi涤3ci

4. 加入100μL酶结合物gongzuo液, 37℃fu育30分钟

5. xi涤5ci

6. 加入90μL底物rong液, 37℃fu育15分钟左右

7. 加入50μL终zhi液,lijizai450nm波长处测量ODzhi

8. 结果计算

一、操zuo因素duiELISA结果的影响ELISA操zuo步骤复杂,操zuo不dang将引起絰i蟮膚u差。yi下叙述各个步骤中的影响因素。

1.加样

2.温育

3.xi涤

4.显色

5.比色

二、灰区的设置tong常qing况下,ELISA定性实yanyi“阳性”和“yin性”来报告结果,两者间有一条分界xian被称为“阳性判断zhi”(cut-off valueCOzhi),zheshi定性**测定结果报告的依ju。

三、biaoben复查ELISA蕑hiぜ觳夤谈丛樱跋煲蛩亟蟙uo,jishi室内质控zai控,也可能因孔间差异而造成结果的差异,因此加大复查力度shi保证结果准确性祄u蒶ao方法,比如duiHBsAgHBeAgHCV-AbHIV-AbTP-Ab等项mu祄u梢伞⑷跹粜詁iaoben及少见模式的检测结果进行复查。

si、结果判断和报告常yong下列ji种方法表示结果:

1.定性测定

2.半定量测定 结果一banyi滴度表蔶inⅫ/span>

3.定量测定 jiyong已知量的biao准pinzuo一系列稀释后进行ELISA测定,hui制biao准曲xian,结果yi优良量或单位表蔶inaiELISA定量检测中每一块反应板dubi须hui制相应的biao准曲xian。

zhu意事项:

zi细阅读shuo明shu。

检查试剂盒biao签上的有效qi。如果超过有效qi,请wushiyong。

按shuo明shu确定所有试剂齐全(shu量、体积)。

biaoben制备要规范,每份biaoben体积要按2-3个复孔yi上的量制备(zhucun),jin量分装zuo备份。短qi内无法实yan者,zhu意di温保cun。

准备好所有实yan额外所需物pin,(比如移液器,试管,清xi器,酶biao仪)。

按shuo明shu将所yong试剂ping衡至室温,genju检测biaobenshu量确定所需试剂的量。

检查试剂盒内每种试剂的zhucun条件,保证所有试剂均按zhao试剂盒内shuo明shu推荐的条件cun储。

检查不稳定或者bian质的试剂rong液(比如沉淀或bian色)。有些试剂,比如biao准pin稀释液或者检测稀释液,可能zai设计蔮en秃谐恋砦铩K惺约羫ai滴入酶biao板zhiqian,bi需充分混匀。而由于沉淀物的te性,zai加入酶biao板zhiqian,bi需不停jiao拌。

保证充穤hi膄u育时间和温度。

切wushiyong不同生chan批号的试剂取代现有试剂或混合现有试剂。

zai混合或rong解dan白rong液时,避免泡沫chan生。

zai实yan开始zhiqian,癱ai藕檬祔an流程。

zai实yan开始zhiqian,清洁gongzuo台。

若有问题,应与我公薺ing虼砩痰募际踔hilian系

人血管jinzhang素转hua酶 (ACE)试剂盒结果判断:

1. 每个biao准pin的ODzhi减去空白孔的ODzhi后zuotu,如设置复孔,则应取其ping均zhi计算。yibiao准pin的浓度为横坐biao,ODzhi为纵坐biao,hui出biao准曲xian。yi可yiODzhi为横坐biao,biao准pin的浓度为纵坐biao,hui出biao准曲xian。

2. 推荐shiyong专业的曲xian制zuo软件,如curve expert 1.31.4,zai软件界面既可genju样pinODzhi,由biao准曲xian查出相应的浓度,乘yi稀释倍shu;yi可将样pin的ODzhi代入biao准曲xian的ni合方程式,计算出样苀angǘ龋俪藋i稀释倍shu,糲i鵳in的实际浓度。

3. 若样pinODzhi高于biao准曲xian上限,应适dang稀释后zhong测,计算浓度时应乘yi稀释倍shu。 

血管jinzhang素转hua酶 (ACE)试剂盒有效qi稳定性考察

ben试yanyi血管jinzhang素转hua酶 (ACE)为例

1.        ODzhi:

zheng常保cun条件下有效qi内和超过有效qi2个月所测OD謉ang冉吸/span>

zheng常有效qi内ODzhi: 3.2512.8452.126, 1.859, 1.463, 1.022, 0.710, 0.08

超过2个月有效qiODzhi:3.1.7, 2.643, 2.125, 1.796, 1.453, 0.876, 0.432, 0.07

2.回shou率:分bie于定zhi血清及血浆中加入襤uan康难躩inzhang素转hua酶 (ACE)biao准pin,zhong复测定并计算其pin均zhi,回shou率为测定zhi与理论zhi的比率。

        zheng常保cun条件下有效qi内和过有效qi2个月elisa 试剂盒回shou率检测结果

Sample

Conditions

Recovery range(%)

Average(%)

Serum(n=6)

normal

88-106

95

After 12 month

80-100

87

EDTA plasma(n=6)

normal

88-106

97

After 12 month

78-98

87

 

3.       xian性:分bie于定zhi血清及血浆中加入襤uan康难躩inzhang素转hua酶 (ACE)biao准pin,并将biaoben按1:2,1:4,1:8稀释,xian性范围糲i∈秃笱鵥en中血管jinzhang素转hua酶 (ACE)含量的测定zhi与理论zhi的比率。

         zheng常保cun条件下有效qi内和过有效qi2个月elisa 试剂盒回xian性检测结果

Sample

Conditions

1:2

1:4

1:8

Serum(n=6)

normal

81-92%

85-90%

89-105%

After 12month

80-88%

82-87%

87-101%

EDTA plasma(n=6)

normal

93-104%

81-97%

91-96%

After 12month

82-95%

75-82%

74-90%

 

4.        精密度:yi样pin测定zhi的bian异系shuCV表蔶inⅫ/span>CV%=SD/meanx100

批内差:取同一批ci试剂盒duidizhi,中zhi和高zhi样ben进行定量检测,每份样ben测定20ci,分bie计算不同浓度样ben的ping均zhi和SDzhi。

批间差:选取 3 个不同批ci的试剂盒分bieduidi、中、高zhi定zhi样ben进行定量测定, 每个样benshiyong同一试剂盒zhong复测定 8 ci,分bie计算不同浓度样ben的ping均zhi及 SD zhi。(批内差: CV<10%;批间差: CV<11%)

       zheng常保cun条件下有效qi内和过有效qi2个月elisa 试剂盒回精密度检测结果

                    Intra-assay precision

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

16.68

14.22

70.25

62.36

369.75

327.88

SD

1.08

1.25

4.21

5.31

24.69

32.87

CV(%)

6.5

8.8

6.0

8.5

6.6

10

 

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

Sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

18.72

13.68

65.98

61.25

387.22

425.26

SD

1.45

1.52

4.83

5.18

28.49

36.87

CV%

7.7

11.1

7.3

8.5

7.3

8.7

人血管jinzhang素转hua酶 (ACE)试剂盒会出蟴hi奈侍饧敖饩霭旆ǎ裹/span>

1. 加入反应终zhi液后,没有吸光zhi或吸光zhi偏di。

a.原因:未加入酶biao记物。

解决办法:请按zhao操zuo步骤进行。

b.原因:试剂盒内容物未能充分回。

解决办法:确定试剂盒内容物回温后再进行操zuo。

c.原因:室温太di。

解决办法:若室温太di(<19),请于操zuo步骤4,适dang延长温育时间。

d.原因:未shiyong试剂盒的清xi液清xi。

解决办法: 请yong试剂盒内所提供的清xi液清xi。

e.原因:试剂盒已过有效qi限。

解决办法:请更换成仍zai有效qi限内的试剂盒。

2. biao准曲xianxian性不佳,或shiping行性不好。

a.原因:温育位置避光不好或受到qi流干扰。

解决办法: 请确认温育位置既不透光也不透风(如抽屉内)

b.原因:操zuo时间拖太久。

解决办法:请zai方法熟lian后再进行操zuo。

c.原因:微孔间相hu污ran。

解决办法: 加样pin时,请小心wu溅出微孔外,yi免造成其它微孔的污ran。

d.原因:biao准pin或酶biao记物所加入的量不一致。

解决办法:请shiyong已校zheng过的移液qiang,并确保其与吸头zhi间有高度密合性。

e.原因:添加样pin或试剂的操zuo方法不zheng确。

解决办法:加样pin或试剂时,吸头请wu接触微孔。

f.原因:xi板过程发生问题(如管路du塞、xi完板后未li刻进行下一步骤)

解决办法:请随时监控xi板机xi板过程,xi完后liji进行下一步骤。

3. 吸光zhi均偏高(或xian性不筯uan伏/span>)

a.原因:室温太高(>25)

解决办法: 若无法降di室内温度,请适dang缩短步骤4的温育时间。

b.原因:底物rong液受到污ran。

解决办法: 若发蟴hi孜飏ong液已呈蟴hi渡氩灰賡hiyong。

c.原因:反应时间超过太久。

解决办法:请控謕in从κ奔洹Ⅻ/span>

d.原因:酶biao记物污ran了盒内其它试剂。

解决办法:shiyong过的吸头应liji丢弃,可避免试剂间相hu污ran,凡shi试剂(tebieshi酶biao记物与底物rong液)接触过的容器应liji清xi干jing。(先yipiao白水jin泡,再yi清水冲xi干jing,可确保无残留)

4. yin性biao准pin的吸光zhidi于阳性biao准pin的吸光zhi。

a.原因:微孔中的试剂未能充分混合。

解决办法: 试剂加完后,需轻敲pansi周shi其充分混合均匀。

b.原因:xi板过程发生问题(2-f.)

解决办法:请参考2-f.

c.原因:添加样pin或酶biao记物的量不一致。

解决办法: 请参考2-d.

 

大发888真人app留言
biao题
lian系人
lian系电hua
内容
zhu:1.可yishiyong快捷键Alt+S或Ctrl+Enter发送信息!
2.如有bi要,请您留下您的详细lian系方式!