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人降钙su(CT)试ji盒

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da发888zhen人app名称: 人降钙su(CT)试ji盒
da发888zhen人app型号: CT
da发888zhen人app展shang: ELISA试ji盒
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简单介绍

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人降钙su(CT)试ji盒  的详细介绍


人降钙su(CT)试ji盒

使用说明书

人降钙su(CT)试ji盒基本原理:

本试ji盒采用shuangda发888zhen人ping台夹心ELISAfa。用抗人CTda发888zhen人ping台baobeiyu酶标板上,实验时样pin或标准pin中的人CT与baobeida发888zhen人ping台结合,游离的成穤hi幌慈ァR来渭觬u生物su化的抗人CTda发888zhen人ping台he辣根过yang化物酶标记的亲hesu。抗人CTda发888zhen人ping台与结合在baobeida发888zhen人ping台上的人CT结合、生物su与亲hesu特yi性结合而形成**复合物,游离的成穤hi幌慈ァ<觬u显se底物(TMB),TMB在辣根过yang化物酶的催化xia呈现蓝se,加终zhi液hou变成黄se。用酶标仪在450nm波长chuceOD值,人CT浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算chu样pin中人CT的浓度

人降钙su(CT)试ji盒描述:

英文名称 Human CT (Calcitonin) ELISA Kit
中文名称 人降钙su(CT)酶联**xi附ce定试ji盒
huo号 X-EL-H0136c 种shu Human/人
规格 96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips)
检ce方fa shuangda发888zhen人ping台夹心fa
检cefan围 15.625~1000pg/mL 灵敏度 9.375pg/mL

试ji盒组成:

中文名称

英文名称

规格

保存

  ELISA酶标板(可拆卸)

  Micro ELISA  Plate(Dismountable)

  8×12 / 8×6*

4/-20 #

dong干标准pin

Reference Standard

  2/1 zhi*

4/-20 #

标准pin&样pin稀释液

Reference Standard & Sample Diluent

  1 20mL/12mL*

4

浓suo生物su化da发888zhen人ping台

Concentrated Biotinylated Detection Ab

  1zhi 120μL/70μL*

4/-20 #

生物su化da发888zhen人ping台稀释液

Biotinytated Detection Ab Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓suoHRP酶结合物

Concentrated HRP Conjugate

  1zhi 120μL/70μL*

4(bi光)

酶结合物稀释液

HRP Conjugate Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓suo洗涤液(25×

ConcentratedWashBuffer (25×)

  1 30mL/16mL*

4

底物溶液(TMB

Substrate Reagent

  1 10mL/6mL*

4(bi光)

fan应终zhi液

Stop Solution

  1 10mL/6mL*

4

封板竎ai|/span>

Plate Sealer

  5/3 *

 

da发888zhen人app说明书

Product  Description

  1 

 

zhi检报gao

Certificate of Analysis

  1 

 

特别说明
*: [96T/48T](打开bao装hou请及时检cha所有物pin是否齐全完整)
#: 
一周内使用可存yu4℃,需长时间存fang或多磜en褂媒ㄒ榇鎦u-20.                                      

人降钙su(CT)试ji盒检ce莃ai急腹ぷ鳇/span>:

1. 请提qian20分钟从bing箱中取chu试ji盒,ping衡zhi室wen。

2. jiang浓suo洗涤液用shuangzheng水稀释(1:25)。未用完的fanghui4℃。从bing箱中取chu的浓suo洗涤液可能有结晶,shuyu正chang现象,可用40℃水浴微加热使结晶完全溶jiehou再配制洗涤液(加热wen度不要chao过50℃,使用时洗涤液应为室wen)。当ri使用。

3. 标准pinyu10000×g离心1分钟,加ru标准pin&样pin稀释液1.0mLzhidong干标准pin中,xuan紧管盖,静置10分钟,上xia颠倒数次,dai其充分溶jiehou,用移液qijiang其qingqing混匀(浓度为8000pg/mL)。然hou根据需要进行倍比稀释(注:不要zhi接在fan应孔中进行倍比稀释)。建议配制成以xia浓度:按照稀蕋ou絝atuli 标准pin&样pin稀释液zhi接作为空bai孔0ng/mL。如配制5ng/mL标准pin:取0.5mL10ng/mL的上述标准pin加ru含有0.5mL标准pin&样pin稀释液的EP管中,混匀即可,其余浓度依此类推。 

4. 生物su化da发888zhen人ping台工作液:实验qian计算当磜en笛樗栌昧浚ㄒ狱/span>100μL/孔计),实ji配制时应多配制100-200μL。使用qian15分钟,以生物su化da发888zhen人ping台稀释液稀释浓suo生物su化da发888zhen人ping台(1:100)成工作浓度。当ri使用。

5. 酶结合物工作液:实验qian计算当磜en笛樗栌昧浚ㄒ狱/span>100μL/孔计),实ji配制时应多配制100-200μL。使用qian15分钟,以酶结合物稀释液稀释浓suoHRP酶结合物(1:100)成工作浓度。

当ri使用。

人降钙su(CT)试ji盒标准pin稀蕋ou絝atuli:(以500μL/管为li,也可根据实ji用量来稀释,如200μL/管)

            

1. 在ge孔中加ru标准pin或样pinge100μL 37℃孵育90分钟

2. 加ru100μ生物su化da发888zhen人ping台工作液,37℃孵育60分钟

3. 洗涤3

4. 加ru100μL酶结合物工作液, 37℃孵育30分钟

5. 洗涤5

6. 加ru90μL底物溶液, 37℃孵育15分钟zuo右

7. 加ru50μL终zhi液,立即在450nm波长chuce量OD

8. 结果计算

一、cao作yinsu对ELISA结果的yingxiangELISAcao作bu骤复杂,cao作不当jiangyin起jiaoda的误差。以xia叙述gegebu骤中的yingxiangyinsu。

1.加样

2.wen育

3.洗涤

4.显se

5.比se

er、灰qu的设置通chang情kuangxia,ELISA定性实验以“阳性”he“yin性”来报gao结果,两者间有一条分界线bei称为“阳性判断值”(cut-off valueCO值),这是定性**ce定结果报gao的依据。

三、标本复chaELISA蕑hiぜ靋e过程复杂,yingxiangyinsujiao多,即使室内zhikong在kong,也可能yin孔间差yi而造成结果的差yi,yin此加da复cha力度是保证结果譲i沸缘目煽糠絝a,比如对HBsAgHBeAgHCV-AbHIV-AbTP-Ab等项目的可疑、弱阳性标本及少见模式的检ce结果进行复cha。

四、结果判断he报gaochang用xialie几种方fa表示结果:

1.定性ce定

2.ban定量ce定 结果一般以滴度表示。

3.定量ce定 即用已zhi量的标准pin作一系lie稀释hou进行ELISAce定,绘制标准曲线,结果以优羓i炕虻ノ槐硎尽T冱/span>ELISA定量检ce中每一kuaifan应板都bi须绘制相应的标准曲线。

注yi事项:

zi细阅读说明书。

检cha试ji盒标签上的有xiao期。如果chao过有xiao期,请勿使用。

按说明书萬anㄋ惺詊i齐全(数量、体积)。

标本制备要规fan,每份标本体积要按2-3ge复孔以上的量制备(贮存),尽量分譩ai霰阜荨6唐谀谖辠a实验者,注yi低wen保存。

准备好所有实验额外所需物pin,(比如移液qi,试管,清洗qi,酶标仪)。

按说明书jiang所用试jiping衡zhi室wen,根据检ce标本数量萬anㄋ枋詊i的量。

检cha试ji盒内每謟hi詊i的贮存条jian,保证所有试ji均按照试ji盒内说明书推荐的条jian存储。

检cha不稳定或者变zhi的试ji溶液(比如沉淀或变se)。有些试糽i热绫曜紁in稀释液或者检ce稀释液,可能在设计时jiu含有沉淀物。所有试ji在滴ru酶标板之qian,bi需充分混匀。而由yu沉淀物的特性,在加ru酶标板之qian,bi需不停搅拌。

保证充分的孵育时间hewen度。

切勿使用不同生产批号的试ji取代现有试ji或混合现有试ji。

在混合或溶jie蛋bai溶液时,bi免泡沫产生。

在实验开始之qian,安排好实验流程。

在实验开始之qian,清jie工作台。

若有wen题,应与我gong司或代理shang的糺i鮶hi硓hi袋/span>

人降钙su(CT)试ji盒结果判断:

1. 每ge标准pin的OD值jian去空bai孔的OD值hou作tu,如设置复孔,则应取其ping均值计算。以标准pin的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,绘chu标准曲线。亦可以OD值为横坐标,标准pin的浓度为纵坐标,绘chu标准曲线。

2. 推荐使用zhuan业的曲线制作软jian,如curve expert 1.31.4,在软jian界面ji可根据样pinOD值,由标准曲线chachu相应的浓度,乘以稀释倍数;亦可jiang样pin的OD值代ru标准曲线的ni合方程式,计算chu样pin浓度,再乘以稀释倍数,即为样pin的实ji浓度。

3. 若样pinOD值高yu标准曲线上限,应适当稀释hou重ce,计算浓度时应乘以稀释倍数。 

降钙su(CT)试ji盒有xiao期稳定性考察

本试验以降钙su(CT)为li

1.        OD值:

正chang保存条jianxia有xiao期内hechao过有xiao期2ge月所ceOD值比jiao

正chang有xiao期内OD值: 3.2512.8452.126, 1.859, 1.463, 1.022, 0.710, 0.08

chao过2ge月有xiao期OD值:3.1.7, 2.643, 2.125, 1.796, 1.453, 0.876, 0.432, 0.07

2.hui收率:穤hi饄u定值血清及血浆中加ru襤uan康慕蹈苨u(CT)标准pin,重复ce定并计算其pin均值,hui收率为ce定值与理论值的比率。

        正chang保存条jianxia有xiao期内he过有xiao期2ge月elisa 试ji盒hui收率检ce结果

Sample

Conditions

Recovery range(%)

Average(%)

Serum(n=6)

normal

88-106

95

After 12 month

80-100

87

EDTA plasma(n=6)

normal

88-106

97

After 12 month

78-98

87

 

3.       线性:穤hi饄u定值血清及血浆中加ru襤uan康慕蹈苨u(CT)标准pin,并jiang标本按1:2,1:4,1:8稀释,线性fan围即为稀释hou样本中降钙su(CT)含量的ce定值与理论值的比率。

         正chang保存条jianxia有xiao期内he过有xiao期2ge月elisa 试ji盒hui线性检ce结果

Sample

Conditions

1:2

1:4

1:8

Serum(n=6)

normal

81-92%

85-90%

89-105%

After 12month

80-88%

82-87%

87-101%

EDTA plasma(n=6)

normal

93-104%

81-97%

91-96%

After 12month

82-95%

75-82%

74-90%

 

4.        精密度:以样pince定值的变yi系数CV表示。CV%=SD/meanx100

批内差:取同一批磜en詊i盒对低值,中值he高值样本进行定量检ce,每份样本ce定20次,穤hi鸺扑悴煌ǘ妊镜膒ing均值heSD值。

批间差:选取 3 ge不同批次的试ji盒穤hi鸲缘汀⒅小⒏咧刀ㄖ笛窘卸縞e定, 每ge样本使用同一试ji盒重复ce定 8 次,穤hi鸺扑悴煌ǘ妊镜膒ing均值及 SD 值。(批内差: CV<10%;批间差: CV<11%)

       正chang保存条jianxia有xiao期内he过有xiao期2ge月elisa 试ji盒hui精密度检ce结果

                    Intra-assay precision

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

16.68

14.22

70.25

62.36

369.75

327.88

SD

1.08

1.25

4.21

5.31

24.69

32.87

CV(%)

6.5

8.8

6.0

8.5

6.6

10

 

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

Sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

18.72

13.68

65.98

61.25

387.22

425.26

SD

1.45

1.52

4.83

5.18

28.49

36.87

CV%

7.7

11.1

7.3

8.5

7.3

8.7

人降钙su(CT)试ji盒会chu现的wen题及jie决办fa:

1. 加rufan应终zhi液hou,没有xi光值或xi光值偏低。

a.原yin:未加ru酶标记物。

jie决办fa:请按照cao作bu骤进行。

b.原yin:试ji盒内容物未能充分hui。

jie决办fa:萬anㄊ詊i盒内容物huiwenhou再进行cao作。

c.原yin:室wen太低。

jie决办fa:若室wen太低(<19),请yucao作bu骤4,适当延长wen育时间。

d.原yin:未使用试ji盒的清洗液清洗。

jie决办fa: 请用试ji盒内所提供的清洗液清洗。

e.原yin:试ji盒已过有xiao期限。

jie决办fa:请更换成仍在有xiao期限内的试ji盒。

2. 标准曲线线性不佳,或是ping行性不好。

a.原yin:wen育位置bi光不好或受到气流干扰。

jie决办fa: 请确认wen育位置ji不透光也不透风(如抽屉内)

b.原yin:cao作时间拖太jiu。

jie决办fa:请在方fa熟练hou再进行cao作。

c.原yin:微孔间相huwuran。

jie决办fa: 加样pin时,请小心勿jianchu微孔外,以免造成其它微孔的wuran。

d.原yin:标准pin或酶标记物所加ru的量不一致。

jie决办fa:请使用已校正过的移液枪,并确保其与xitou之间有高度密合性。

e.原yin:添加样pin或试ji的cao作方fa不正确。

jie决办fa:加样pin或试ji时,xitou请勿接触微孔。

f.原yin:洗板过程发生wen题(如管耭an氯⑾赐臧録ou未立刻进行xia一bu骤)

jie决办fa:请随时监kong洗板ji洗板过程,洗完hou立即进行xia一bu骤。

3. xi光值均偏高(或线性不筯uan伏/span>)

a.原yin:室wen太高(>25)

jie决办fa: 若无fa降低室内wen度,请适当suo短bu骤4的wen育时间。

b.原yin:底物溶液受到wuran。

jie决办fa: 若发现底物溶液已呈现淡蓝se,请不要再使用。

c.原yin:fan应时间chao过太jiu。

jie决办fa:请kong謕in从κ奔洹Ⅻ/span>

d.原yin:酶标记物wuran了盒内其它试ji。

jie决办fa:使用过的xitou应立即丢弃,可bi免试ji间相huwuran,凡是试ji(特别是酶标记物与底物溶液)接触过的容qi应立即清洗干净。(先以漂bai水浸泡,再以清水冲洗干净,可确保无残留)

4. yin性标准pin的xi光值低yu阳性标准pin的xi光值。

a.原yin:微孔中的试ji未能充分混合。

jie决办fa: 试ji加完hou,需qing敲盘四周使其充分混合均匀。

b.原yin:洗板过程发生wen题(2-f.)

jie决办fa:请参考2-f.

c.原yin:添加样pin或酶标记物的量不一致。

jie决办fa: 请参考2-d.

 

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