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大鼠gaidiao磷酸胒u岷蟙an白1(CABIN1)酶联mianyi吸fu检测试剂盒

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大发888真人app名称: 大鼠gaidiao磷酸胒u岷蟙an白1(CABIN1)酶联mianyi吸fu检测试剂盒
大发888真人app型号: CABIN1
大发888真人app展商: ELISA试剂盒
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简单介绍

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大鼠gaidiao磷酸胒u岷蟙an白1(CABIN1)酶联mianyi吸fu检测试剂盒  的详蟜u樯埸/font>

大鼠gaidiao磷酸胒u岷蟙an白1(CABIN1)酶联**吸fu检测试剂盒

使用说ming书

预qi应用

本试剂盒运用双大发888真人pingtai夹心ELISAfa定量测定大鼠血qing、血jiang、zu织匀jiang、细胞裂解液、细胞培yang上qing液和其他生wu液体中gaidiao磷酸胒u岷蟙an白1(CABIN1)含量。

大鼠gaidiao磷酸胒u岷蟙an白1(CABIN1)酶联**吸fu检测试剂盒ji本原理:

本试剂盒采用双大发888真人pingtai夹心ELISAfa。用抗大鼠gaidiao磷酸胒u岷蟙an白1(CABIN1)大发888真人pingtai包被于酶biaoban上,实验时样品或biao准品中的大鼠gaidiao磷酸胒u岷蟙an白1(CABIN1)与包被大发888真人pingtai结合,游离的成分被洗去。依ci紋ou肷鷚u素hua的抗大鼠gaidiao磷酸胒u岷蟙an白1(CABIN1)大发888真人pingtai和纀ei鵪uo氧huawu酶biao记的亲和素。抗大鼠gaidiao磷酸胒u岷蟙an白1(CABIN1)大发888真人pingtai与结合在包被大发888真人pingtai上的大鼠gaidiao磷酸胒u岷蟙an白1(CABIN1)结合、生wu素与亲和素teyi性结合而形成**复合wu,游离的成分被洗去。紋ou胂陨譿u(TMB),TMB在纀ei鵪uo氧huawu酶的催hua下呈现蓝色,加zhong止液hou变成黄色。用酶biao仪在450nm波长处测OD值,大鼠gaidiao磷酸胒u岷蟙an白1(CABIN1)nongdu与OD450值之间呈正比,通guo绘制biao准曲线计算出样品中大鼠gaidiao磷酸胒u岷蟙an白1(CABIN1)的nong秖u

描述:

英文名称 Rat CABIN1 (Calcineurin Binding Protein 1) ELISA Kit
中文名称 大鼠gaidiao磷酸胒u岷蟙an白1(CABIN1)酶联**吸fu测定试剂盒
huo号 X-EL-R0133c zhongshu Rat/大鼠
规格 96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips)
检测方fa 双大发888真人pingtai夹心fa
检测范围 0~ ling敏du 0

zu成:

中文名称

英文名称

规格

保存

  ELISA酶biaoban(可chai卸)

  Micro ELISA  Plate(Dismountable)

  8×12 / 8×6*

4/-20 #

冻ganbiao准品

Reference Standard

  2/1 *

4/-20 #

biao准品&样品稀释液

Reference Standard & Sample Diluent

  1 20mL/12mL*

4

nongsuo生wu素hua大发888真人pingtai

Concentrated Biotinylated Detection Ab

  1 120μL/70μL*

4/-20 #

生wu素hua大发888真人pingtai稀释液

Biotinytated Detection Ab Diluent

  1 10mL/6mL*

4

nongsuoHRP胒u岷蟱u

Concentrated HRP Conjugate

  1 120μL/70μL*

4(避guang)

胒u岷蟱u稀释液

HRP Conjugate Diluent

  1 10mL/6mL*

4

nongsuo洗di液(25×

ConcentratedWashBuffer (25×)

  1 30mL/16mL*

4

底wurong液(TMB

Substrate Reagent

  1 10mL/6mL*

4(避guang)

fan应zhong止液

Stop Solution

  1 10mL/6mL*

4

封ban覆膜

Plate Sealer

  5/3 zhang*

 

大发888真人app说ming书

Product  Description

  1 

 

质检报gao

Certificate of Analysis

  1 

 

tebie说ming
*: [96T/48T](打开包装hou请ji时检查所有wu品是否齐全完整)
#: 
一周内使用可存于4℃,xu长时间存fang或多ci使用建议存于-20.                                      

大鼠gaidiao磷酸胒u岷蟙an白1(CABIN1)酶联**吸fu检测试剂盒检测前准bei工作:

1. 请ti前20穤hong哟颖鵻iang中qu出试剂盒,ping衡至室温。

2. 将nongsuo洗di液用双蒸水稀释(1:25)。未用完的fang回4℃。从冰xiang中qu出的nongsuo洗di液可能有结晶,shu于正chang现象,可用40℃水浴wei紋ou仁菇峋耆玶ong解houzaipei制洗di液(紋ou任耫u不要超guo50℃,使用时洗di液应为室温)。当日使用。

3. biao准品: 于10000×g离心1穤hong樱you隻iao准品&样品稀释液1.0mL至冻ganbiao准品中,旋紧guan盖,jing置10穤hong樱舷碌叩故齝i,dai其充分rong解hou,用yi液器将其轻轻hun匀(nongdu为)。ranhou根据xu要进行倍比稀释(注:不要直接在fan应孔中进行倍比稀释)。建议pei制成以下nongdu:按照稀释方fa图例 biao准品&样品稀释液直接作为空白孔0ng/mL。如pei制5ng/mLbiao准品:qu0.5mL10ng/mL的上述biao准品紋ou牒?.5mLbiao准品&样品稀释液的EPguan中,hun匀即可,其余nongdu襩ai薼ei推。 

4. 生wu素hua大发888真人pingtai工作液:实验前计算当ci实验所xu用量(以100μL/孔计),实际pei制时应多pei制100-200μL。使用前15穤hong樱陨鷚u素hua大发888真人pingtai稀释液稀释nongsuo生wu素hua大发888真人pingtai(1:100)成工作nong秖u5比帐褂谩

5. 胒u岷蟱u工作液:实验前计算当ci实验所xu用量(以100μL/孔计),实际pei制时应多pei制100-200μL。使用前15穤hong樱悦fu岷蟱u稀释液稀释nongsuoHRP胒u岷蟱u(1:100)成工作nong秖u

当日使用。

大鼠gaidiao磷酸胒u岷蟙an白1(CABIN1)酶联**吸fu检测试剂盒biao准品稀释方fa图例:(以500μL/guan为例,也可根据实际用量lai稀释,如200μL/guan)

1.使用前将所有的试剂和biao本huan慢均衡至室温(18-25oC),试剂不能直接在37oCrong解。

2.biao准品(冻gan品)ao科縝iao准品紋ou隻iao准品稀释液1mL,盖haohou室温jing置大约10穤hong樱瑃ong时fan复颠倒/搓dong以助rong解,其nongdu为8000pg/mL。准bei7个稀释biao准品的EPguan,每个EPguan中紋ou挈span>500μL的biao准品稀释液,如图所示依ci倍比稀释,biao准品稀释液(0pg/mL)直接作为空白孔。为保证实验结果有效性,每ci实验请使用新的biao准品rong液。

      

1. 在各孔中紋ou隻iao准品或样品各100μL, 37℃孵育90穤hong

2. 紋ou?00μL 生wu素hua大发888真人pingtai工作液,37℃孵育60穤hong

3. 洗di3ci

4. 紋ou?00μL胒u岷蟱u工作液, 37℃孵育30穤hong

5. 洗di5ci

6. 紋ou?0μL底wurong液, 37℃孵育15穤hong幼笥

7. 紋ou?0μLzhong止液,立即在450nm波长处测量OD值

8. 结果计算

一、操作因素对ELISA结果的影响ELISA操作步骤复杂,操作不当将引起较大的误cha。以下xu述各个步骤中的影响因素。

1.加样

2.温育

3.洗di

4.显色

5.比色

er、灰区的设置通chang情况下,ELISA定性实验以“阳性”和“阴性”lai报gao结果,两者间有一tiao分界线被称为“阳性判断值”(cut-off value,CO值),这是定性**测定结果报gao的依据。

三、biao本复查ELISA手工检测guo程复杂,影响因素较多,即使室内质控在控,也可能因孔间chayi而造成结果的chayi,因此加大复查lidu是保证结果准que性的可靠方fa,比如对HBsAg、HBeAg、HCV-Ab、HIV-Ab、TP-Ab等项目的可疑、ruo阳性biao本ji少见模式的检测结果进行复查。

四、结果判断和报gaochang用下列jizhong方fa表示结果:

1.定性测定

2.半定量测定 结果一般以滴du表示。

3.定量测定 即用已zhi量的biao准品作一系列稀释hou进行ELISA测定,绘制biao准曲线,结果以优良量或单位表示。在ELISA定量检测中每一块fan应ban都bi须绘制相应的biao准曲线。

大鼠gaidiao磷酸胒u岷蟙an白1(CABIN1)酶联**吸fu检测试剂盒会出现的问题ji解jue办fa:

1. 紋ou雈an应zhong止液hou,没有吸guang值或吸guang值偏低。

a.原因:未紋ou朊竍iao记wu。

解jue办fa:请按照操作步骤进衳iao

b.原因:试剂盒内容wu未能充分回。

解jue办fa:que定试剂盒内容wu回温houzai进行操作。

c.原因:室温tai低。

解jue办fa:若室温tai低(<19℃),请于操作步骤4,适当延长温育时间。

d.原因:未使用试剂盒的qing洗液qing洗。

解jue办fa: 请用试剂盒内所tigong的qing洗液qing洗。

e.原因:试剂盒已guo有效qi限。

解jue办fa:请更huan成仍在有效qi限内的试剂簒iao

2. biao准曲线线性不佳,或是ping行性不hao。

a.原因:温育位置避guang不hao或shou到气流gan扰。

解jue办fa: 请que认温育位置既不透guang也不透风(如chou屉内)。

b.原因:操作时间拖tai久。

解jue办fa:请在方fashu练houzai进行操作。

c.原因:wei孔间相互污染。

解jue办fa: 加样品时,请xiao心wujian出wei孔外,以mian造成其tawei孔的污染。

d.原因:biao准品或酶biao记wu所紋ou氲牧坎灰恢隆

解jue办fa:请使用已校正guo的yi液枪,bingque保其与吸头之间有高du密合性。

e.原因:添加样品或试剂的操作方fa不正que。

解jue办fa:加样品或试剂时,吸头请wu接触wei孔。

f.原因:洗banguo程发生问题(如guan路du塞、洗完banhou未立刻进行下一步骤)。

解jue办fa:请随时监控洗ban机洗banguo程,洗完hou立即进行下一步骤。

3. 吸guang值均偏高(或线性不筯uan?。

a.原因:室温tai高(>25℃)。

解jue办fa: 若wufa降低室内温du,请适当suoduan步骤4的温育时间。

b.原因:底wurong液shou到污染。

解jue办fa: 若发现底wurong液已呈现淡蓝色,请不要zai使用。

c.原因:fan应时间超guotai久。

解jue办fa:请控制fan应时间。

d.原因ao竍iao记wu污染了盒内其ta试剂。

解jue办fa:使用guo的吸头应立即丢弃,可避mian试剂间相互污染,fan是试剂(tebie是酶biao记wu与底wurong液)接触guo的容器应立即qing洗ganjing。(先以piao白水浸泡,zai以qing水冲洗ganjing,可que保wu残留)

4. 阴性biao准品的吸guang值低于阳性biao准品的吸guang值。

a.原因:wei孔中的试剂未能充分hun合。

解jue办fa: 试剂加完hou,xu轻敲盘四周使其充分hun合均詑u

b.原因:洗banguo程发生问题(tong2-f.)。

解jue办fa:请参考2-f.

c.原因:添加样品或酶biao记wu的量不一致。

解jue办fa: 请参考2-d.

注意事项:

A 仔细阅读说ming书。

B 检查试剂盒biao签上的有效qi。如果超guo有效qi,请wu使用。

C 按说ming书que定所有试剂齐全(数量、体积)。

D biao本制bei要规范,每份biao本体积要按2-3个复孔以上的量制bei(贮存),尽量分装做bei份。duanqi内wufa实验者,注意低温保存。

E 准beihao所有实验e外所xuwu品,(比如yi液器,试guan,qing洗器,酶biao仪)。

F 按说ming书将所用试剂ping衡至室温,根据检测biao本数量que定所xu试剂的量。

G 检查试剂盒内每zhong试剂的贮存tiaojian,保证所有试剂均按照试剂盒内说ming书推荐的tiaojian存储。

H 检查不wen定或者变质的试剂rong液(比如沉淀或变色)。有些试剂,比如biao准品稀释液或者检测稀释液,可能在设计时就含有沉淀wu。所有试剂在祑en朊竍iaoban之前,bixu充分hun詑u6捎诔恋韜u的te性,在紋ou朊竍iaoban之前,bixu不停搅ban。

I 保证充分的孵育时间和温秖u

J 切wu使用不tong生产pi号的试剂qu代现有试剂或hun合现有试剂。

K 在hun合或rong解dan白rong液时,避mian泡沫产生。

L 在实验开始之前,安paihao实验流程。

M 在实验开始之前,qing洁工作tai。

N 若有问题,应与我gong薺ing虼砩痰募际踔С至

大鼠gaidiao磷酸胒u岷蟙an白1(CABIN1)酶联**吸fu检测试剂盒结果判断:

1. 每个biao准品的OD值减去空白孔的OD值hou作图,如设置复孔,则应qu其ping均值计算。以biao准品的nongdu为heng坐biao,OD值为纵坐biao,绘出biao准曲线。亦可以OD值为heng坐biao,biao准品的nongdu为纵坐biao,绘出biao准曲线。

2. 推荐使用专业的曲线制作ruanjian,如curve expert 1.3或1.4,在ruanjian界面既可根据样品OD值,由biao准曲线查出相应的nongdu,乘以稀释倍数;亦可将样品的OD值代入biao准曲线的拟合方程式,计算出样苀ang╠u,zai乘以稀释倍数,糲i返氖导蕁ong秖u

3. 若样品OD值高于biao准曲线上限,应适当稀释hou重测,计算nongdu时应乘以稀释倍数。

 teyi性:

本试剂盒用于检测大鼠gaidiao磷酸胒u岷蟙an白1(CABIN1),经检测与其ta相似wu质wuming显交chafan应。

由于shou到技术ji样本lai源的限制,不可能完成对所有相关或相似wu质交chafan应检测,因此本试剂盒有可能与未经检测的其tawu质有交chafan应。

回收率:

分bie于定值血qingji血jiang样本中紋ou胍huan康拇笫骻aidiao磷酸胒u岷蟙an白1(CABIN1)(加biao样品),重复测定bing计算其均值,回收率为测定謉i肜砺壑档谋嚷

线性:

在定值血qingji血jiang样本内紋ou胧柿康拇笫骻aidiao磷酸胒u岷蟙an白1(CABIN1),bing倍比稀释成 1:21:41:81:16 的dai测样本,线性范围糲i∈蚳ou样本中大鼠gaidiao磷酸胒u岷蟙an白1(CABIN1)含量的测定謉i肜砺壑档谋嚷省Ⅻspan>


大鼠gaidiao磷酸胒u岷蟙an白1(CABIN1)酶联**吸fu检测试剂盒精密du:

精密du用样苀an舛ㄖ档谋鋣i系数 CV 表示。CV(%) = SD/mean×100

pi内cha:qutongpici试剂盒对低、謝iao⒏咧刀ㄖ笛窘卸考觳狳/span>,每份样本连续测定 20 ci,分bie计算不tongnongdu样本的ping均值ji SD 值。

pi间cha:选qu 3 个不tongpici的试剂盒分bie对低、謝iao⒏咧刀ㄖ笛窘卸坎舛ǎ扛鲅臼褂胻ong一试剂盒重复

测定 8 ci,分bie计算不tongnongdu样本的ping均值ji SD 值。

pi内cha: CV<10%

pi间cha: CV<12%

wen定性:

经测定,试剂盒在有效qi内按推荐温du保存,其活性降低聅hi∮冱span> 5%。

为减xiao外部因素对试剂盒破坏前hou检测值的影响,实验室的环境tiaojianxu尽量保持一致,you其是实验室内温秖u⑹猟uji温育tiaojian。其ci由tong一实验员lai进行操作可减少萻ong骳ha。


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