da发888真人app资料
如果您对该da发888真人app感xing趣的hua,可以
da发888真人app名称: da鼠gai/gaidiao素依laixing蛋白激酶2(CAMK2)酶联mian疫吸附检测蕐ue梁宵/span>
da发888真人app型号: CAMK2
da发888真人appzhanshang: ELISA蕐ue梁宵/span>
da发888真人app文档: 无相关文档

jian单jie绍

奔驰宝马


da鼠gai/gaidiao素依laixing蛋白激酶2(CAMK2)酶联mian疫吸附检测蕐ue梁宵/strong>  的详细jie绍

da鼠gai/gaidiao素依laixing蛋白激酶2(CAMK2)酶联**吸附检测蕐ue梁宵span>

使yong说明书

预期应yong

本蕐ue梁衴unyong双da发888真萻i教行命span>ELISA法定liang测定da鼠血清、血浆、组织匀浆、细bao裂解ye、细baopei养上清ye和其ta生物ye体中gai/gaidiao素依laixing蛋白激酶2(CAMK2)含liang。

da鼠gai/gaidiao素依laixing蛋白激酶2(CAMK2)酶联**吸附检测蕐ue梁谢驹禳span>:

本蕐ue梁胁蓎ong双da发888真萻i教行腅LISA法。yongkangda鼠gai/gaidiao素依laixing蛋白激酶2(CAMK2)da发888真萻i教ò挥诿副臧迳希笛槭毖坊虮曜计分械膁a鼠gai/gaidiao素依laixing蛋白激酶2(CAMK2)与包被da发888真萻i教ń岷希卫氲某煞直幌慈ァR纁i加入生物素化的kangda鼠gai/gaidiao素依laixing蛋白激酶2(CAMK2)da发888真萻i教ê屠备鵪uo氧化物酶标ji的qin和素。kangda鼠gai/gaidiao素依laixing蛋白激酶2(CAMK2)da发888真萻i教ㄓ虢岷蟴ai包被da发888真萻i教ㄉxi膁a鼠gai/gaidiao素依laixing蛋白激酶2(CAMK2)结合、生物素与qin和素teyixing结合er形成**复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMBzai辣根guo氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止ye后变成黄色。yong酶标仪zai450nm波长处测OD值,da鼠gai/gaidiao素依laixing蛋白激酶2(CAMK2)nong度与OD450值之间呈正比,tongguo绘zhi标譲i呒扑愠鲅分衐a鼠gai/gaidiao素依laixing蛋白激酶2(CAMK2)的nong度。

描shu:

英文名称 Rat CAMK2 (Calcium/Calmodulin-Dependent Protein Kinase-Ⅱ) ELISA Kit
中文名称 da鼠gai/gaidiao素依laixing蛋白激酶2(CAMK2)酶联**吸附测定蕐ue梁宵/span>
huo号 X-EL-R0138c 种属 Rat/da鼠
规格 96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips)
检测fang法 双da发888真萻i教行姆?/span>
检测范wei 15.625~1000pg/mL 灵敏度 9.375pg/mL

成:

中文名称

英文名称

规格

bao存

  ELISA酶标板(可chaixie)

  Micro ELISA  Plate(Dismountable)

  8×12 / 8×6*

4/-20 #

冻干标准品

Reference Standard

  2/1 zhi*

4/-20 #

标准品&样品稀释ye

Reference Standard & Sample Diluent

  1 20mL/12mL*

4

nongsuo生物素化da发888真萻i教?/span>

Concentrated Biotinylated Detection Ab

  1zhi 120μL/70μL*

4/-20 #

生物素化da发888真萻i教ㄏ∈蛓e

Biotinytated Detection Ab Diluent

  1 10mL/6mL*

4

nongsuoHRP酶结合物

Concentrated HRP Conjugate

  1zhi 120μL/70μL*

4(bi光)

酶结合物稀释ye

HRP Conjugate Diluent

  1 10mL/6mL*

4

nongsuo洗涤ye(25×

ConcentratedWashBuffer (25×)

  1 30mL/16mL*

4

底物溶ye(TMB

Substrate Reagent

  1 10mL/6mL*

4(bi光)

穋ongχ罩箉e

Stop Solution

  1 10mL/6mL*

4

封板覆膜

Plate Sealer

  5/3 *

 

da发888真人app说明书

Product  Description

  1 

 

质检bao告

Certificate of Analysis

  1 

 

te别说明
*: [96T/48T](da开包zhuang后请及时检查所有物品是否齐全wan整)
#: 
yi周内使yong可存于4℃,需长时间存放或duoci使yong建议存于-20.                                      

da鼠gai/gaidiao素依laixing蛋白激酶2(CAMK2)酶联**吸附检测蕐ue梁屑觳馇白急腹ぷ鳇/b>:

1. 请提前20分zhongcong冰箱中取出蕐ue梁校胶庵潦椅long

2. 将nongsuo洗涤yeyong双蒸水稀释(1:25)。蝐ong脀an的放hui4℃。cong冰箱中取出的nongsuo洗涤ye可能有结晶,属于正常现象,可yong40℃水浴微加热使结晶wan全溶解后再配zhi洗涤ye(加热wen度不要超guo50℃,使yong时洗涤ye应为室wen)。当日使yong。

3. 标准品: 于10000×g离心1分zhong,加入标准品&样品稀释ye1.0mL至冻干标准品中,旋紧管盖,静置10分zhong,上下颠dao数ci,待其充分溶解后,yong移ye器将其qingqinghun匀(nong度为1000pg/mL)。ran后根据需要进行倍比稀释(zhu:不要直jiezai穋ong字薪斜侗认∈停=ㄒ榕鋤hi成以下nong度:按zhao稀释fang法tu例 标准品&样品稀释ye直jie作为空白孔0ng/mL。如配zhi5ng/mL标准品:取0.5mL10ng/mL的上shu标准品加入含有0.5mL标准品&样品稀释ye的EP管中,hun匀即可,其余nong度依此类推。 

4. 生物素化da发888真萻i教üぷ鱵e:实验前计算当ci实验所需yongliang(以100μL/孔计),实ji配zhi时应duo配zhi100-200μL。使觤en?5分zhong,以生物素化da发888真萻i教ㄏ∈蛓e稀释nongsuo生物素化da发888真萻i教?1:100)成工作nong度。当日使yong。

5. 酶结合物工作ye:实验前计算当ci实验所需yongliang(以100μL/孔计),实ji配zhi时应duo配zhi100-200μL。使觤en?5分zhong,以酶结合物稀释ye稀释nongsuoHRP酶结合物(1:100)成工作nong度。

当日使yong。

da鼠gai/gaidiao素依laixing蛋白激酶2(CAMK2)酶联**吸附检测蕐ue梁宵/b>标准品稀释fang法tu例:(以500μL/管为例,也可根据实jiyongliang来稀释,如200μL/管)

1.使觤en敖械氖yue梁捅瓯净郝庵潦襴en(18-25oC),蕐ue敛荒苤眏iezai37oC溶解。

2.标准品(冻干品):每瓶标准品加入标准品稀释ye1mL,盖好后室wen静置dayue10分zhong,同时反复颠dao/搓动以助溶解,其nong度为1000pg/mL。准备7ge稀释标准品的EP管,每geEP管中加入500μL的标准品稀释ye,如tu所示依ci倍比稀释,标准品稀释ye(0pg/mL)直jie作为空白孔。为bao证实验结果有xiaoxing,每ci实验请使yong新的标准品溶ye。

      

1. zai各孔中加入标准品或样品各100μL, 37℃孵育90分zhong

2. 加入100μL 生物素化da发888真萻i教üぷ鱵e,37℃孵育60分zhong

3. 洗涤3ci

4. 加入100μL酶结合物工作ye, 37℃孵育30分zhong

5. 洗涤5ci

6. 加入90μL底物溶ye, 37℃孵育15分zhong左右

7. 加入50μL终止ye,立即zai450nm波长处测liangOD值

8. 结果计算

yi、操作因素对ELISA结果的影响ELISA操作步骤复杂,操作不当将引起较da的误差。以下叙shu各ge步骤中的影响因素。

1.加样

2.wen育

3.洗涤

4.显色

5.比色

er、灰区的设置tong常情况下,ELISA定xing实验以“阳xing”和“阴xing”来bao告结果,两zhe间有yi条分界线被称为“阳xingpan断值ao╟ut-off value,CO值),这是定xing**测定结果bao告的依据。

三、标本复查ELISA手工检测guo程复杂,影响因素较duo,即使室内质kongzaikong,也可能因孔间差yier造成结果的差yi,因此加da复查力度是bao证结果准确xing的可靠fang法,比如对HBsAg、HBeAg、HCV-Ab、HIV-Ab、TP-Ab等项目的可疑、ruo阳衴uan瓯炯吧賘ian模式的检测结果进行复查。

四、结果pan断和bao告常yong下lie几种fang法表示结果:

1.定xing测定

2.半定liang测定 结果yiban以滴度表蔶in

3.定liang测定 糲ong靡阎猯iang的标准品作yixilie稀释后进行ELISA测定,绘zhi标譲i撸峁杂帕糽iang或单位表蔶inaiELISA定liang检测中每yikuai穋ongΠ宥急匦牖鎧hi相应的标譲i摺

da鼠gai/gaidiao素依laixing蛋白激酶2(CAMK2)酶联**吸附检测蕐ue梁谢岢鱿值奈侍饧敖鈐ue办法:

1. 加入穋ongχ罩箉e后,没有吸光值或吸光值偏低。

a.原因:未加入酶标ji物。

解jue办法:请按zhao操作步骤进行。

b.原因:蕐ue梁心谌菸镂茨艹浞謍ui。

解jue办法:确定蕐ue梁心谌菸飄uiwen后再进行操作。

c.原因:室wen太低。

解jue办法:若室wen太低(<19℃),请于操作步骤4,适当延长wen育时间。

d.原因:未使yong蕐ue梁械那逑磞e清洗。

解jue办法: 请yong蕐ue梁心谒峁┑那逑磞e清洗。

e.原因:蕐ue梁幸裧uo有xiao期xian。

解jue办法:请geng换成rengzai有xiao期xian内的蕐ue梁小

2. 标譲i呦選ing不佳,或是平行xing不好。

a.原因:wen育位置bi光不好或受daoqi流干rao。

解jue办法: 请确认wen育位置既不透光也不透风(如chouti内)。

b.原因:操作时间拖太jiu。

解jue办法:请zaifang法shu练后再进行操作。

c.原因:微孔间相互污萰in

解jue办法: 加样品蔮ao胄⌒奈餵ian出微孔外,以mian造成其它微孔的污萰in

d.原因:标准品或酶标ji物所加入的liang不yi謑ong

解jue办法:请使yong已校正guo的移ye枪,bing确bao其与吸头之间有高度密合xing。

e.原因:添加样品或蕐ue恋牟僮鱢ang法不正确。

解jue办法:加样品或蕐ue潦bao非胛餵ie触微孔。

f.原因:洗板guo程发生问题(如管路堵塞、洗wan板后未立刻进行下yi步骤)。

解jue办法:请sui时监kong洗板机洗板guo程,洗wan后立即进行下yi步骤。

3. 吸光值均偏高(或线xing不够dou)。

a.原因:室wen太高(>25℃)。

解jue办法: 若无法降低室内wen度,请适当suo短步骤4的wen育时间。

b.原因:底物溶ye受dao污萰in

解jue办法: 若发现底物溶ye已呈现淡蓝色,请不要再使yong。

c.原因:穋ongκ奔涑琯uo太jiu。

解jue办法:请kongzhi穋ongκ奔洹

d.原因:酶标ji物污染liao盒内其它蕐ue痢

解jue办法:使yongguo的吸头应立即丢弃,可bimian蕐ue良湎嗷ノ廴荆彩鞘yue?te别是酶标ji物与底物溶ye)jie触guo的容器应立即清洗干净。(xian以漂白水浸泡,再以清水冲洗干净,可确bao无残留)

4. 阴衴uan曜计返奈庵档陀谘粜yuan曜计返奈庵怠

a.原因:微孔中的蕐ue廖茨艹浞謍un合。

解jue办法: 蕐ue良觲an后,需qing敲pan四周使其充分hun合均匀。

b.原因:洗板guo程发生问题(同2-f.)。

解jue办法:请参考2-f.

c.原因:添加样品或酶标ji物的liang不yi謑ong

解jue办法: 请参考2-d.

zhu意事项:

A zi细阅秎iao得魇椤

B 检查蕐ue梁斜昵┥xi挠衳iao期。如果超guo有xiao期,请勿使yong。

C 按说明书确定所有蕐ue疗肴ㄊ齦iang、体积)。

D 标本zhi备要规范,每份标本体积要按2-3ge复孔以蓌i膌iangzhi备(zhu存),jinliang分zhuang做备份。短期内无法实验zhe,zhu意低wenbao存。

E 准备好所有实验额外所需物品,(比如移ye器,试管,清洗器,酶标仪)。

F 按说明书将所yong蕐ue疗胶庵潦襴en,根据检测标本数liang确定所需蕐ue恋膌iang。

G 检查蕐ue梁心诿恐质yue恋膠hu存条件,bao证所有蕐ue辆磟hao蕐ue梁心谒得魇橥萍龅奶跫娲ⅰ

H 检查不稳定或zhe变质的蕐ue寥躽e(比如沉dian或变色)。有些蕐ue粒热绫曜计废∈蛓e或zhe检测稀释ye,可能zai设计时就含有沉dian物。所有蕐ue羫ai滴入酶标板之前,必需充分hun匀。er由于沉dian物的texing,zai加入酶标板之前,必需不停搅拌。

I bao证充分的孵育时间和wen度。

J 切勿使yong不同生产批号的蕐ue寥〈zhong惺yue粱騢un合蟴hong惺yue痢

K zaihun合或溶解蛋白溶ye蔮ao琤imian泡沫产生。

L zai实验开始之前,安排好实验流程。

M zai实验开始之前,清jie工作台。

N 若有问题,应与我gong司或代理shang的糺i鮶hi持联xi

da鼠gai/gaidiao素依laixing蛋白激酶2(CAMK2)酶联**吸附检测蕐ue梁薪峁鹥an断:

1. 每ge标准品的OD值减去空白孔的OD值后作tu,如设置复孔,则应取其平均值计算。襶uan曜计返膎ong度为heng坐标,OD值为纵坐标,绘出标譲i摺R嗫梢設D值为heng坐标,标准品的nong度为纵坐标,绘出标譲i摺

2. 推荐使yongzhuan业的曲线zhi作软件,如curve expert 1.3或1.4,zai软件界面既可根据样品OD值,由标譲i卟槌鱿嘤Φ膎ong度,乘以稀释倍数;亦可将样品的OD值代入标譲i叩哪夂蟜ang程式,计算出样品nong度,再乘以稀释倍数,糲i返氖礿inong度。

3. 若样品OD值高于标譲i呱蟲ian,应适当稀释后重测,计算nong度时应乘以稀释倍数。

 teyixing:

本蕐ue梁衴ong于检测da鼠gai/gaidiao素依laixing蛋白激酶2(CAMK2),经检测与其它相si物质无明显jiao叉穋ongΑⅫspan>

由于受dao糺i跫把纠丛吹膞ianzhi,不可能wan成秠un邢喙鼗蛳鄐i物质jiao叉穋ong觳猓虼吮臼yue梁杏锌赡苡胛淳觳獾钠渌镏视衘iao叉穋ongΑⅫb>

hui收lv:

分别于定值血清及血浆样本中加入yi定liang的da鼠gai/gaidiao素依laixing蛋白激酶2(CAMK2)(加标样品),重复测定bing计算其均值,hui收lv为测定值与理论值的比lv

线xing:

zai定值血清及血浆样本内加入适liang的da鼠gai/gaidiao素依laixing蛋白激酶2(CAMK2),bing倍比稀释成 1:21:41:81:16 的待测样本,线xing范wei糲i∈秃笱局衐a鼠gai/gaidiao素依laixing蛋白激酶2(CAMK2)含liang的测定值与理论值的比lv。


da鼠gai/gaidiao素依laixing蛋白激酶2(CAMK2)酶联**吸附检测蕐ue梁芯芏龋裹/b>

精密度yong样品测定值的变yixi数 CV 表蔶inⅫ/span>CV(%) = SD/mean×100

批内差:取同批ci蕐ue梁xie缘汀⒅小⒏咧刀ㄖ笛窘xie╨iang检测,每份样本连续测定 20 ci,分别计算不同nong度样本的平均值及 SD 值。

批间差:选取 3 ge不同批ci的蕐ue梁蟹直鸲缘汀⒅小⒏咧刀ㄖ笛窘xie╨iang测定,每ge样本使yong同yi蕐ue梁兄馗滁span>

测定 8 ci,分别计算不同nong度样本的平均值及 SD 值。

批内差: CV<10%

批间差: CV<12%

稳定xing:

经测定,蕐ue梁衵ai有xiao期内按推荐wen度bao存,其huoxing降低lv小于 5%

为减小外部因素对蕐ue梁衅苹登昂蠹觳庵档挠跋欤笛槭业幕肪程跫鑚inliangbao持yi致,尤其是实验室内wen度、shi度及wen育条件。其ci由同yi实验yuan来进行操作可减少人为误差。


da发888真人app留yan
标题
联xi人
联xi电hua
内容
验证ma
点击换yi张
zhu:1.可以使yong快捷键Alt+S或Ctrl+Enter发送信息!
2.如有必要,请您留下您的详细联xifang式!