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大鼠钙调su(CAM)酶联免疫吸fu检测试剂盒

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大发888真人app名称: 大鼠钙调su(CAM)酶联免疫吸fu检测试剂盒
大发888真人app型号: CAM
大发888真人app展商: ELISA试剂盒
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大鼠钙调su(CAM)酶联免疫吸fu检测试剂盒  的详蟜u樯埸/font>

大鼠钙调su(CAM)酶联**吸fu检测试剂盒

使用shuo明书

yuqi应用

本试剂盒yun用双大发888真人平台夹心ELISA法定量测定大鼠血qing、血浆、组织yun浆、细胞liejie液、细胞pei养上qing液簍ui渌鷚u液体中钙调su(CAM)含量。

大鼠钙调su(CAM)酶联**吸fu检测试剂盒基本yuanli:

本试剂盒采用双大发888真人平台夹心ELISA法。用kang大鼠钙调su(CAM)大发888真人平台包beiyu酶标板上,shi验时样品huo标准品中的大鼠钙调su(CAM)yu包bei大发888真人平台结he,you离的成穤hi粁i去。依ci加ru生wusu化的kang大鼠钙调su(CAM)大发888真人平台和辣gen过氧化wu酶标记的亲和su。kang大鼠钙调su(CAM)大发888真人平台yu结hezai包bei大发888真人平台上的大鼠钙调su(CAM)结he、生wusuyu亲和su特异xing结heer形成**复hewu,you离的成穤hi粁i去。加ru显色diwu(TMB),TMBzai辣gen过氧化wu酶的催化下呈现lan色,加zhong止液后变成黄色。用酶标仪zai450nmbochang处测OD值,大鼠钙调su(CAM)浓度yuOD450值zhi间呈正比,通过hui制标准曲线计算出样品中大鼠钙调su(CAM)的浓秖u

miao述:

英文名称 Rat CAM (Calmodulin) ELISA Kit
中文名称 大鼠钙调su(CAM)酶联**吸fu测定试剂盒
货号 X-EL-R0140c 謟hi簏/span> Rat/大鼠
gui格 96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips)
检测方法 双大发888真人平台夹心法
检测fan围 0.156~10ng/mL 灵敏度 0.094ng/mL

组成:

中文名称

英文名称

gui格

保存

  ELISA酶标板(可拆卸)

  Micro ELISA  Plate(Dismountable)

  8×12 / 8×6*

4/-20 #

冻干标准品

Reference Standard

  2/1 *

4/-20 #

标准品&样品稀shi液

Reference Standard & Sample Diluent

  1 20mL/12mL*

4

浓缩生wusu化大发888真人平台

Concentrated Biotinylated Detection Ab

  1 120μL/70μL*

4/-20 #

生wusu化大发888真人平台稀shi液

Biotinytated Detection Ab Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓缩HRP胒u醜ewu

Concentrated HRP Conjugate

  1 120μL/70μL*

4(避guang)

胒u醜ewu稀shi液

HRP Conjugate Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓缩xi涤襤ai?/span>25×

ConcentratedWashBuffer (25×)

  1 30mL/16mL*

4

diwu溶襤ai?/span>TMB

Substrate Reagent

  1 10mL/6mL*

4(避guang)

fan应zhong止液

Stop Solution

  1 10mL/6mL*

4

封板覆膜

Plate Sealer

  5/3 *

 

大发888真人appshuo明书

Product  Description

  1 fen

 

zhi检报告

Certificate of Analysis

  1 fen

 

特别shuo明
*: [96T/48T](打开包装后请及时检查所有wu品是否齐全完整)
#: 
yizhou内使用可存yu4℃,需chang时间存放huo多ci使用建议存yu-20.                                      

大鼠钙调su(CAM)酶联**吸fu检测试剂盒检测前准备gong作:

1. 请提前20分钟从冰箱中qu出试剂盒,平衡zhi室温。

2. 将浓缩xi涤液用双蒸水稀shi(1:25)。wei用完的放回4℃。从冰箱中qu出的浓缩xi涤液可能有结晶,属yu正常现xiang,可用40℃水浴微加热使结晶完全溶jie后zai配制xi涤襤ai尤任露炔hui?0℃,使用时xi涤液应为室温)。当日使用。

3. 标准品: yu10000×g离心1分钟,加ru标准品&样品稀shi液1.0mLzhi冻干标准品中,旋jin管盖,静置10分钟,上下颠倒数ci,待其充分溶jie后,用移液器将其qingqing混yun(浓度为10ng/mL)。ran后genju需要进行bei比稀shi(注:瞙ui獄hi接zaifan应孔中进行bei比稀shi)。建议配制成yi下浓度:按照稀蕋ou椒╰u例 标准品&样品稀shi液zhi接作为空白孔0ng/mL。如配制5ng/mL标准品:qu0.5mL10ng/mL的上述标准品加ru含有0.5mL标准品&样品稀shi液的EP管中,混yunji可,其yu浓度依此类tui。 

4. 生wusu化大发888真人平台gong作襤ai簊hi验前计算当cishi验所需用量(yi100μL/孔计),shi际配制时应多配制100-200μL。使用前15分钟,yi生wusu化大发888真人平台稀shi襤ehi浓缩生wusu化大发888真人平台(1:100)成gong作浓秖u5比帐褂谩

5. 胒u醜ewugong作襤ai簊hi验前计算当cishi验所需用量(yi100μL/孔计),shi际配制时应多配制100-200μL。使用前15分钟,yi胒u醜ewu稀shi襤ehi浓缩HRP胒u醜ewu(1:100)成gong作浓秖u

当日使用。

大鼠钙调su(CAM)酶联**吸fu检测试剂盒标准品稀蕋ou椒╰u例ai▂i500μL/管为例,襜u蒰enjushi际用量来稀shi,如200μL/管)

1.使用前将所有的试剂和标本缓man均衡zhi室温(18-25oC),试剂不能zhi接zai37oC溶jie。

2.标准品(冻干品):每瓶标准品加ru标准品稀shi液1mL,盖好后室温静置大约10分钟,tong时fan复颠倒/搓动yi助溶jie,其浓度为10ng/mL。准备7个稀shi标准品的EP管,每个EP管中加ru500μL的标准品稀shi襤ai鐃u所示依cibei比稀shi,标准品稀shi液(0pg/mL)zhi接作为空白孔。为保证shi验结果有xiaoxing,胟an蝧hi验请使用xin的标准品溶液。

      

1. zai各孔中加ru标准品huo样品各100μL, 37℃fu育90分钟

2. 加ru100μL 生wusu化大发888真人平台gong作襤ai?7℃fu育60分钟

3. xi涤3ci

4. 加ru100μL胒u醜ewugong作襤ai?nbsp;37℃fu育30分钟

5. xi涤5ci

6. 加ru90μLdiwu溶襤ai?nbsp;37℃fu育15分钟左右

7. 加ru50μLzhong止襤ai琹ijizai450nmbochang处测量OD值

8. 结果计算

yi、操作因su对ELISA结果的影xiangELISA操作步骤复杂,操作不当将引起絰i蟮奈蟛睢i下叙述各个步骤中的影xiang因su。

1.加样

2.温育

3.xi涤

4.显色

5.比色

二、hui区的设置通常情况下,ELISA定xingshi验yi“阳xing”和“阴xing”来报告结果,两者间有yi条分界线bei称为“阳xing判断值”(cut-off value,CO值),这是定xing**测定结果报告的依ju。

san、标本复查ELISA手gong检测过cheng复杂,影xiang因su较多,ji使室内zhi控zai控,襜u赡芤蚩准洳钜靍r造成结果的差异,因此加大复查力度是保证结果准quexing的可靠方法,比如对HBsAg、HBeAg、HCV-Ab、HIV-Ab、TP-Ab等项目的可yi、弱阳xing标本及少见模蔶iang募觳饨峁懈床椤

四、结果判断和报告常用下lie几种方法表示结果:

1.定xing测定

2.半定量测定 结果yi般yi滴度表示。

3.定量测定 ji用已知量的标准品作yi系lie稀shi后进行ELISA测定,hui制标准曲线,结果yi优良量huo单位表示。zaiELISA定量检测中每yi块fan应板都必须hui制相应的标准曲线。

大鼠钙调su(CAM)酶联**吸fu检测试剂盒会出现的问题及jie决办法:

1. 加rufan应zhong止液后,mei有吸guang值huo吸guang值pian低。

a.yuan因:wei加ru酶标记wu。

jie决办法:请按照操作步骤进行。

b.yuan因:试剂盒内容wuwei能充分回。

jie决办法:萬anㄊ约梁心谌輜u回温后zai进行操作。

c.yuan因:室温太低。

jie决办法:若室温太低(<19℃),请yu操作步骤4,蕇hi毖觕hang温育时间。

d.yuan因:wei使用试剂盒的qingxi液qingxi。

jie决办法: 请用试剂盒内所提供的qingxi液qingxi。

e.yuan因:试剂盒已过有xiaoqi限。

jie决办法:请genghuan成仍zai有xiaoqi限内的试剂盒。

2. 标准曲线线xing不jia,huo是平行xing不好。

a.yuan因:温育位置避guang不好huo受到气流干扰。

jie决办法: 请que认温育位置既不透guang也不透风(如chou屉内)。

b.yuan因:操作时间拖太久。

jie决办法:请zai方法熟lian后zai进行操作。

c.yuan因:微孔间相互wu染。

jie决办法: 加样品时,请小心勿jian出微孔外,yi免造成其它微孔的wu染。

d.yuan因:标准品huo酶标记wu所加ru的量不yi致。

jie决办法:请使用已校正过的移液枪,并que保其yu吸touzhi间有gao度密hexing。

e.yuan因:添加样品huo试剂的操作方法不正que。

jie决办法:加样品huo试剂时,吸tou请勿接触微孔。

f.yuan因e窗骞齝heng发生问题(如管耭an氯i完板后weili刻进行下yi步骤)。

jie决办法:请随时jian控xi板机xi板过cheng,xi完后liji进行下yi步骤。

3. 吸guang值均piangao(huo线xing不够陡)。

a.yuan因:室温太gao(>25℃)。

jie决办法: 若无法jiang低室内温度,请蕇hi彼醵滩街?的温育时间。

b.yuan因:diwu溶液受到wu染。

jie决办法: 若发现diwu溶液已呈现淡lan色,请瞙ui獄ai使用。

c.yuan因:fan应时间超过太久。

jie决办法:请控制fan应时间。

d.yuan因:酶标记wuwu染了盒内其它试剂。

jie决办法:使用过的吸tou应lijiding弃,可避免试剂间相互wu染,凡是试剂(特别是酶标记wuyudiwu溶液)接触过的容器应lijiqingxi干净。(xianyi漂白水jin泡,zaiyiqing水chongxi干净,可que保无残留)

4. 阴xing标准品的吸guang值低yu阳xing标准品的吸guang值。

a.yuan因:微孔中的试剂wei能充分混he。

jie决办法: 试剂加完后,需qing敲pan四zhou使其充分混he均yun。

b.yuan因e窗骞齝heng发生问题(tong2-f.)。

jie决办法:请参考2-f.

c.yuan因:添加样品huo酶标记wu的量不yi致。

jie决办法: 请参考2-d.

注意事项:

A 仔细阅读shuo明书。

B 检查试剂盒标签上的有xiaoqi。如果超过有xiaoqi,请勿使用。

C 按shuo明书萬anㄋ惺约疗肴ㄊ俊⑻寤

D 标本制备要guifan,每fen标本体积要按2-3个复孔yi上的量制备(贮存),尽量分装做备fen。短qi内无法shi验者,注意低温保存。

E 准备好所有shi验e外所需wu品,(比如移液器,试管,qingxi器,酶标仪)。

F 按shuo明书将所用试剂平衡zhi室温,genju检测标本数量萬anㄋ枋约恋牧俊

G 检查试剂盒内每謟hi约恋闹嫣跫Vに惺约辆凑帐约梁心趕huo明书tui荐的条件存储。

H 检查不稳定huo者变謘hi氖约寥芤haiū热绯恋韍uo变色)。有些试剂,比如标准品稀shi液huo者检测稀shi襤ai赡躾ai设计时jiu含有沉淀wu。所有试剂zai滴ru酶标板zhi前,必需充分混yun。er由yu沉淀wu的特xing,zai加ru酶标板zhi前,必需不停jiaoban。

I 保证充分的fu育时间和温秖u

J 切勿使用不tong生产批号的试剂qudai现有试剂huo混he现有试剂。

K zai混hehuo溶jie蛋白溶液时,避免泡沫产生。

L zaishi验开始zhi前,anpai好shi验流cheng。

M zaishi验开始zhi前,qing洁gong作台。

N 若有问题,应yu我公司huodaili商的技术支硓hi

大鼠钙调su(CAM)酶联**吸fu检测试剂盒结果判断:

1. 每个标准品的OD值减去空白孔的OD值后作tu,如设置复孔,则应qu其平均值计算。yi标准品的浓度为横坐标,OD值为zong坐标,hui出标准曲线。亦可yiOD值为横坐标,标准品的浓度为zong坐标,hui出标准曲线。

2. tui荐使用专ye的曲线制作软件,如curve expert 1.3huo1.4,zai软件界面既可genju样品OD值,由标准曲线查出相应的浓度,乘yi稀shibei数ui嗫山返腛D值dairu标准曲线的拟he方cheng式,计算出样品浓度,zai乘yi稀shibei数,ji为样品的shi际浓秖u

3. 若样品OD值gaoyu标准曲线上限,应蕇hi毕hi后重测,计算浓度时应乘yi稀shibei数。

 特异xing:

本试剂盒用yu检测大鼠钙调su(CAM),经检测yu其它相似wuzhi无明显交叉fan应。

由yu受到技术及样本来源的限制,不可能完成秠un邢喙豩uo相似wuzhi交叉fan应检测,因此本试剂盒有可能yuwei经检测的其它wuzhi有交叉fan应。

回收lv:

穤hi饄u定值血qing及血浆样本中加ruyi定量的大鼠钙调su(CAM)(加标样品),重复测定并计算其均值,回收lv为测定值yuli论值的比lv

线xing:

zai定值血qing及血浆样本内加rushi量的大鼠钙调su(CAM),并bei比稀shi成 1:21:41:81:16 的待测样本,线xingfan围ji为稀shi后样本中大鼠钙调su(CAM)含量的测定值yuli论值的比lv。


大鼠钙调su(CAM)酶联**吸fu检测试剂盒精密度:

精密度用样品测定值的变异系数 CV 表示。CV(%) = SD/mean×100

批内差:qutong批ci试剂盒对低、中、gao值定值样本进行定量检测,每fen样本连续测定 20 ci,穤hi鸺扑悴籺ong浓度样本的平均值及 SD 值。

批间差:选qu 3 个不tong批ci的试剂盒穤hi鸲缘汀⒅小ao值定值样本进行定量测定,每个样本使用tongyi试剂盒重复

测定 8 ci,穤hi鸺扑悴籺ong浓度样本的平均值及 SD 值。

批内差: CV<10%

批间差: CV<12%

稳定xing:

经测定,试剂盒zai有xiaoqi内按tui荐温度保存,其活xingjiang低lv小yu 5%

为减小外bu因su对试剂盒破坏前后检测值的影xiang,shi验蕐e幕肪cheng跫杈×勘3謞i致,尤其是shi验室内温秖u⑹燃拔掠跫F鋍i由tongyishi验员来进行操作可减少人为误差。


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